Анализ крови egfr норма в израиле

Анализ крови egfr норма в израиле thumbnail

Для того чтобы в обществе царили мир и порядок, каждый человек должен соблюдать закон и уважать интересы окружающих. Это правило работает не только в социуме, но и в биологии. Тело человека, как и любого другого многоклеточного организма, не сможет существовать, если его отдельные клетки не будут подчиняться общим законам. Каждый житель «многоклеточного государства» должен знать свое место, выполнять определенные функции и помнить, что он — часть единого целого.

Что же заставляет живые клетки позабыть об эгоизме и работать на благо всего организма? Это свойство закодировано в их генетическом коде. Существуют определенные молекулы, белки, которые регулируют клеточную жизнь.

Одна из таких молекул — рецептор эпидермального фактора роста, по-английски — epidermal growth factor receptor, сокращенно — EGFR. Еще его обозначают как ErbB-1 и HER1. За открытие этой молекулы в 1986 году получили Нобелевскую премию два ученых — американский биохимик Стэнли Коэн и итальянский биолог Рита Леви-Монтальчини.

Какие функции в организме выполняет рецептор эпидермального фактора роста?

В названии этого белка не случайно есть слово «рецептор». В анатомии рецепторами называют нервные окончания, благодаря которым мы ощущаем прикосновения, тепло, холод, боль и пр. В молекулярной биологии это белок, который находится на поверхности клетки и обеспечивает её «чувствительность» к определенным молекулярным сигналам.

Молекула EGFR как бы пронизывает клеточную мембрану: одна ее часть «выглядывает» наружу, а другая находится внутри клетки.

Когда сигнальная молекула (например, эпидермальный фактор роста) достигает клетки и взаимодействует с EGFR, этот белок активируется и запускает внутри клетки каскад биохимических реакций. В итоге клетка начинает размножаться.

Такой сигнал должен «включаться» строго в определенное время. Его усиление или ослабление грозят серьезными последствиями. Если EGFR недостаточно активен, у человека может развиваться болезнь Альцгеймера. А чрезмерная активность рецептора приводит к тому, что клетка бесконтрольно размножается — и это может привести к раку. А начинается всё с генов. Белок EGFR становится чрезмерно активен при определенных мутациях. Из-за одних генетических дефектов этого белка слишком много, из-за других меняется его структура. А итог один — клетки постоянно делятся.

Мутации EGFR и рак

Мутации гена EGFR определяются при разных типах рака, включая злокачественные опухоли легких, головы и шеи, толстой кишки, поджелудочной, молочной железы, яичников, мочевого пузыря, почек и др.

Из-за повышенной активности рецептора эпидермального фактора роста опухолевые клетки быстрее размножаются, агрессивнее вторгаются в окружающие ткани, метастазируют. Усиливается ангиогенез — образование новых кровеносных сосудов, питающих опухоль.

В общем наличие мутации EGFR в опухолевых клетках ухудшает прогноз для пациента.

Когда ученые поняли, что рецептор эпидермального фактора роста играет роль в развитии рака, возникла идея создать лекарственные препараты, которые могли бы блокировать этот белок. И сегодня такие препараты существуют.

Но нужно понимать, что молекулярно-генетические характеристики и гистологический тип рака — разные и не всегда связанные между собой вещи. Если взять две одинаковые злокачественные опухоли легких, то в одной активность EGFR может быть повышена, а в другой нет. Рассматривая опухоль под микроскопом, нельзя сказать, есть ли в ней такие мутации, будут ли в данном случае эффективен препараты из группы блокаторов EGFR. Для этого нужны специальные анализы. И они тоже существуют.

Кому показан анализ на EGFR?

В настоящее время показанием к исследованию является немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в особенности если он представлен аденокарциномой (гистологический тип НМРЛ, который встречается в 40% случаев), в случаях, когда пациенту показано лечение ингибиторами EGFR. Это исследование помогает проверить, будет ли пациент реагировать на терапию.

  • Ингибиторы EGFR эффективны у 80% больных, имеющих мутацию в гене рецептора эпидермального фактора роста. Причем, у некоторых из этих пациентов препараты действуют довольно сильно и в течение длительного времени.
  • При отсутствии данных мутаций ингибиторы EGFR эффективны лишь у 10% пациентов.

Ингибиторы EGFR помогают в течение некоторого времени, в среднем 8 месяцев. Затем развивается резистентность: в злокачественной опухоли происходят новые мутации, и она перестает реагировать на лечение. В этом случае врач может назначить повторный анализ. Для этого нужно снова взять образец опухоли и отправить в лабораторию.

Не все мутации в гене EGFR делают рак чувствительным к ингибиторам рецептора эпидермального фактора роста. Некоторые, напротив, вызывают резистентность. Одна из таких мутаций обозначается как T790M. Если она обнаружена, применяют препарат, который эффективен в таких случаях — осимертиниб. Именно из-за мутации T790M злокачественные опухоли чаще всего (в 60% случаев) перестают реагировать на ингибиторы EGFR.

Анализ на мутации в гене EGFR может быть выполнен как отдельно, так и в составе панели, которая также включает исследования других мутаций — в частности, в генах KRAS, ALK, ROS1, BRAF. Это поможет врачу подобрать оптимальную терапию.

Специалисты из Колледжа американских патологов (CAP), Международной ассоциации по изучению рака легких (IASLC) и Ассоциации по молекулярной патологии (AMP) рекомендуют всем пациентам с раком легких, в частности, аденокарциномой, сдавать анализы на наличие генетических мутаций, при которых показано лечение таргетными препаратами, независимо от пола, этнической принадлежности и отношения к курению.

Избыточная активность гена рецептора эпидермального фактора роста, как мы упомянули, встречается и при других типах рака. Но на данный момент анализ рекомендован только при немелкоклеточном раке легкого.

Методы определения статуса мутаций EGFR

Для того чтобы провести анализ на мутации в гене EGFR, нужно провести биопсию — получить образец опухолевой ткани. При этом образец должен быть достаточно большого размера и содержать достаточное количество опухолевых клеток. Поэтому важно, чтобы забор материала проводил опытный врач, который хорошо владеет этим навыком.

Для того чтобы обнаружить мутантный ген EGFR, обычно применяют полимеразную цепную реакцию (ПЦР): метод предполагает создание множества копий ДНК с помощью ферментов.

Когда анализ завершен, лаборатория выдает одно из двух заключений:

  • Результат положительный: обнаружена мутация в гене EGFR, при этом указывают, какая именно.
  • Результат отрицательный: мутация не обнаружена.

На основе этих данных врач (онколог, химиотерапевт) определяется с дальнейшей тактикой лечения.

Методы лечения: ингибиторы EGFR и их эффективность

Ингибиторы EGFR относятся к группе таргетных препаратов. В отличие от классических химиопрепаратов, они действуют прицельно, на определенную молекулу, а не поражают все подряд быстро размножающиеся клетки.

Для лечения рака легкого применяют такие ингибиторы EGFR, как гефитиниб (Иресса), эрлотиниб (Тарцева), афатиниб (Гиотриф), бригатиниб (Алунбриг), икотиниб (Конмана). При раке толстой кишки применяют цетуксимаб (Эрбитукс), панитумумаб (Вектибикс).

Ингибиторы EGFR имеют разную химическую структуру, разные механизмы действия, и в зависимости от этого их можно разделить на две большие группы:

  • «Малые молекулы» воздействуют на тирозинкиназу — часть EGFR, которая находится внутри клетки и запускает каскад биохимических реакций при активации рецептора. К этой группе относятся: Тарцева, Иресса, Алунбриг.
  • Моноклональные антитела — аналоги антител, которые работают в составе иммунной системы и защищают организм от инфекций, других патогенов. Они распознают участок EGFR, который находится снаружи клетки, связываются с ним и не дают рецептору активироваться. К этой группе относят Эрбитукс, Вектибикс.

При раке легкого ингибиторы EGFR чаще всего используют на поздних стадиях, отдельно или в сочетании с химиопрепаратами.

Таргетные препараты действуют более прицельно по сравнению с классическими химиопрепаратами, тем не менее, они могут приводить к некоторым побочным эффектам. При применении ингибиторов EGFR чаще всего возникают такие проблемы, как сыпь и инфекции кожи, диарея, потеря аппетита. Более серьезные побочные эффекты встречаются редко.

Гефитиниб (Иресса) в лечении больных с мутацией EGFR

Гефитиниб — таргетный препарат из группы ингибиторов EGFR для лечения немелкоклеточного рака легких в случаях, когда опухоль проросла в окружающие ткани, либо имеются отдаленные метастазы. В 2002 году он был одобрен в Японии, в 2003 году — в США. На данный момент гефитиниб продается более чем в 60 странах мира.

Препарат принимают в виде таблеток, по одной в день. Доказано, что в более высоких дозах гефитиниб не действует более эффективно, но возрастает риск побочных эффектов.

Чем доказана эффективность гефитиниба?

В 2009 году завершилась третья фаза клинического исследования, в котором участвовали пациенты с запущенной аденокарциномой легкого из Восточной Азии. Испытуемых поделили на три группы. В первой группе лечение проводилось гефитинибом, в двух других — химиопрепаратами карбоплатином и паклитакселом. В подгруппе пациентов, имеющих мутацию гена EGFR, эффективность гефитиниба оказалась значительно выше.

В Европейской клинике применяются все таргетные препараты, зарегистрированные на территории России, и у нас есть возможность провести молекулярно-генетические исследования, которые помогут выявить мутации и подобрать оптимальную терапию. Свяжитесь с нами, мы знаем, как помочь.

Источник

[12-067]
Определение мутации гена EGFR в тканях опухолей

22645 руб.

Определение мутации гена EGFR в тканях опухолей – молекулярно-генетическое исследование биоптата опухолевой ткани, позволяющее выявить наличие определенных мутаций в гене рецептора эпидермального фактора роста, играющих роль в злокачественной трансформации.

Синонимы русские

Тест на мутации гена EGFR, мутации гена рецептора эпидермального фактора роста – EGFR, прогноз терапии при НМРЛ, немелкоклеточный рак легкого, таргетная терапия.

Синонимы английские

EGFR Mutation Testing, Epidermal Growth Factor Receptor Mutation Analysis, HER-1, erbB-1.

Метод исследования

Автоматическое секвенирование.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани (в парафиновом блоке).

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них. Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную “цель” в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как, в отличие от стандартной химиотерапии, практически не действуют на нормальные ткани и характеризуются большей эффективностью. Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия.

Одной из таких молекулярных особенностей опухолевых клеток при немелкоклеточном раке легкого является мутация в гене, кодирующем аминокислотную последовательность рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). Рецептор представляет собой белок, расположенный в оболочке клетки и способный связываться со специфическими веществами, которые его активируют, – факторами роста. При стимуляции рецептора внутри клетки запускается каскад биохимических реакций, который называется сигнальным путём. Сигнальный путь EGFR участвует в регуляции роста, деления, выживания и гибели клеток. При так называемых активирующих мутациях в гене EGFR в клетке вырабатывается аномальный рецептор, который способен активировать свой сигнальный путь независимо от связывания с фактором роста, инициируя тем самым процесс злокачественной трансформации. Это приводит к повышению пролиферации опухолевых клеток, росту опухоли, стимуляции ее внедрения в окружающие ткани и метастазирования. Открытие роли сигнального пути EGFR в онкогенезе послужило стимулом к созданию препаратов, способных воздействовать на этот механизм, – ингибиторов EGFR: гефитиниб (иресса), эрлотиниб (тарцева) и афатиниб (гиотриф). Это небольшие молекулы, которые проникают в раковые клетки, ингибируют тирозинкиназы – ключевые ферменты патологического сигнального пути – и препятствуют передаче пролиферативных стимулов. Стоит отметить, что существует несколько активирующих мутаций гена EGFR. Некоторые из них определяют чувствительность опухолевых клеток к ингибиторам тирозинкиназ – Del19, L858R, G719X, L861Q, S768I, – а некоторые, наоборот, устойчивость к ним – Ins20, T790M. Мутация Т790М в гене EGFR является наиболее частой причиной возникновения резистентности к проводимой таргетной терапии. Своевременное ее выявление помогает выяснить причину неэффективности терапии ингибиторами тирозинкиназ и принять решение о смене препаратов. Поэтому для назначения эффективной таргетной терапии всем пациентам необходимо тестирование на наличие как мутаций чувствительности, так и мутаций устойчивости.

Материалом для исследования служит ДНК опухолевых клеток. Она может быть выделена из биоптата опухоли, находящегося в парафиновом блоке. Если же на исследование предоставлен образец опухоли в емкости с фиксирующим раствором, из него изготавливаются парафиновые блоки для возможности длительного хранения и использования в последующем для других диагностических тестов.

Для чего используется исследование?

  • Для определения показаний к терапии низкомолекулярными ингибиторами EGFR у пациентов с немелкоклеточным раком легкого (как местнораспространенные, так и метастатические стадии).

Когда назначается исследование?

  • При наличии гистологически верифицированного немелкоклеточного рака легкого – впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

  • Положительный результат – мутация обнаружена. Также указывается вид выявленной мутации.

  • Отрицательный результат – мутации не обнаружены.

Что может влиять на результат?

Нарушение техники фиксации биопсийного материала, которое может привести к деградации генетического материала и невозможности тестирования.



Важные замечания

  • Терапия немелкоклеточного рака легкого с выявленными мутациями гена EGFR ингибиторами тирозинкиназ 1 и 2 поколения (гефитиниб, эрлотиниб, афатиниб) через 8-12 месяцев обычно становится неэффективной. В 60% случаев это происходит из-за появления мутации Т790М, обуславливающей резистентность опухоли к этим препаратам. Поэтому при признаках прогрессирования заболевания на фоне терапии ИТК 1 и 2 поколения необходимо проведение тестирования на мутацию Т790М в гене EGFR. При этом на исследование должен направляться материал, полученный после прогрессирования опухоли. Первоначально возможно исследование плазмы крови. Пациенты с выявленной мутацией Т790М, как правило, отвечают на терапию другим препаратом – осимертинибом.
  • Если мутации гена EGFR не обнаружены, необходимо провести тестирование на перестройку гена ALK и мутацию гена BRAFV600. Это мутации, которые также играют роль в возникновении немелкоклеточного рака легкого, но встречаются реже, чем мутации EGFR, и не сочетаются с ними. Для них также существуют таргетные препараты.
  • В некоторых стандартах диагностики рекомендуется также тестирование на мутации гена KRAS, кодирующего один из белков в цепи сигнального пути EGFR. Они более характерны для колоректального рака, но в 16% случаев встречаются и при немелкоклеточном раке легкого. Наличие мутаций гена KRAS приводит к неэффективности блокирования EGFR таргетными препаратами, так как сигнальный путь активируется независимо от рецептора. Таким образом, если перед исследованием на мутации EGFR уже выполнялось тестирование на мутации KRAS и его результат положительный – целесообразность теста на мутации EGFR и применение таргетных препаратов следует обсудить с врачом. Однако в качестве первичной диагностики исследование биоптата немелкоклеточного рака легкого на мутации KRAS нецелесообразно, тест на мутации EGFR в этой ситуации более предпочтителен.
  • По некоторым данным, избыточное количество EGFR отмечается и при опухолях другой локализации – толстой кишки, поджелудочной железы, молочных желез. Однако на данный момент оценка мутационного статуса гена EGFR, как и применение таргетных препаратов, рекомендована только для мелкоклеточного рака легкого.

Также рекомендуется

  • Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве

  • Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)

  • Гистологическое исследование биопсийного материала

  • Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски

  • Определение мутации гена BRAF в тканях опухолей

  • Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ

Кто назначает исследование?

Онколог, химиотерапевт.

Литература

  1. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1500-1501.

  2. The Basic science of Oncology. Fifth edition. Ian F. Tannock, Robert G. Bristow, Richard P. Hill, Lea Harrington. McGrow-Hill Education, 2013. Pages 173-179.

  3. Программа RUSSCO “Совершенствование молекулярно-генетической диагностики в российской федерации”. Практическое руководство для врачей. www.cancergenome.ru

  4. Доклад “Современные возможности таргетной терапии НМРЛ”, Имянитов Е. Н. Вестник московского онкологического общества, №11 (602), 2013. С. 3-6.

Источник

Рак легкого на сегодняшний день занимает одно из первых мест в мире по уровню смертности среди злокачественных новообразований.

Ежегодно в России от рака легкого погибают около 60 тыс. человек, что составляет 20% от всех умерших от злокачественных заболеваний.

Для рака легкого и других нозоологий характерны генетические нарушения, связанные с циклом деления клеток. Ген EGFR кодирует рецептор эпидермального фактора роста.

При немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) любой гистологии объединенные частоты мутаций EGFR варьируются в диапазоне от 8,4 до 35,9% у постоянных/заядлых курильщиков и от 37,6 до 62,5% у никогда не куривших/изредка куривших пациентов (European Society of Medical Oncology https://oncologypro.esmo.org).

Мутации гена EGFR, связанные с раком легких

EGFR представляет из себя трансмембранный гликопротеин, входящий в семейство рецепторных тирозинкиназ. EGFR влияет на ангиогенез, пролиферацию и увеличение метастатической активности клеток. Наличие ряда мутаций в гене EGFR приводит к димеризации рецептора, фосфорилированию его внутриклеточного тирозинкиназного домена и активации сигнальных путей протеинкиназ. Фосфорилированные белки, в свою очередь, активируют факторы транскрипции, регулирующие синтез мРНК и белков. Большинство соматических мутаций гена EGFR, обнаруживаемых у больных немелкоклеточным раком лёгкого (НМРЛ), локализованы в экзонах 18-21, кодирующих тирозинкиназный домен. Открытие этих мутаций немедленно связали с положительным ответом на терапию ингибиторами тирозинкиназы EGFR.

Наибольший интерес вызывают мутации, связанные с чувствительностью к ингибиторам тирозинкиназы (ИТК). Это делеции в экзоне 19 (del19), которые могут иметь различный размер, замена L858R в экзоне 21, а также мутации, связанные с устойчивостью к ИТК, например, мутация T790M в экзоне 20.

Методы определения мутаций гена EGFR у человека

Одним из первых методов определения соматических мутаций в гене EGFR было секвенирование по Сэнгеру, которое предполагало анализ всей кодирующей области. Однако, этот метод имеет низкую чувствительность (около 20% содержания мутантной ДНК в образце), поэтому были разработаны более чувствительные способы, основанные на прямом анализе мутаций и делеций гена EGFR.

Современные методы анализа соматических мутаций представляют собой либо таргетное секвенирование генов, либо полногеномное/полноэкзомное секвенирование. Однако, необходимо отметить, что это дорогостоящие методы.

В молекулярно-генетических исследованиях используют преимущественно ДНК, выделенную непосредственно из опухолевой ткани.

И хотя операционный материал обычно доступен в виде фиксированного в формалине биопсийного материала (FFPE-блоки), тем не менее, получение качественного биологического материала для анализа требует особых методических подходов. Поскольку опухоль часто является гетерогенной и имеет различные молекулярно-генетические профили, генетический анализ мутаций в тканях может быть затруднен. Более того, при НМРЛ EGFR тестирование не проводится у 20% пациентов из-за недоступности или нехватки тканевого материала.

Поэтому наиболее перспективным направлением представляется определение статуса мутаций гена EGFR не только в ткани, но и в циркулирующей опухолевой ДНК (цоДНК), содержащейся в плазме крови, количество которой увеличивается за счёт распада опухолевых клеток.

Это существенно заметно на поздних стадиях заболевания.

Таргетная терапия при лечении рака легких

На сегодняшний день в России доступны EGFR-тесты, которые предназначены для определения статуса мутаций гена EGFR методом ПЦР в реальном времени для пациентов с диагнозом метастатический немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) III- IV стадии для определения показаний к таргетной терапии низкомолекулярными ингибиторами тирозинкиназы EGFR. Стоимость таких ДНК тестов в Российских генетических лабораториях начинается от 10 000 рублей.

Клиническая значимость данных тестов состоит в определении показаний к таргетной терапии (направленного лечения) и мониторинга ответа при патологии – метастатический немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) III- IV стадии.

Алгоритм действий

Возможности применения диагностического тестирования на определение статуса мутаций гена EGFR сводится к следующему алгоритму: определение наличия мутаций, принятие решения о лечении, мониторинг лечения (мониторинг ответа на ингибиторы EGFR).

Перспективами будущей диагностики являются скрининг для ранней диагностики, принятие решения о терапии и мониторинг рецидивов. Таким образом, делается упор на ранний первичный скрининг НМРЛ, равно как и других нозоологий. Это является одной из главных задач персонализированной медицины при лечении онкологических заболеваний, которая сочетает традиционные методы химиотерапии и таргетные препараты нового поколения для достижения наилучшего возможного результата для пациента.

Будьте здоровы!

Автор статьи: Сергей Попов, PhD, молекулярный генетик, заведующий отделом неинвазивной пренатальной диагностики генетической лаборатории Медикал Геномикс.

Источник