Анализ крови у овец норма
Сельского хозяйство
Д.Т.Рахимжанова, к.в.н., доцент
АО «КАТУ им. С.Сейфуллина», Республика Казахстан,
Астана
ИНТЕПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ ОВЕЦ
В технике
гематологических исследований в настоящее время все чаще применяют электронно-измерительные
приборы, которые позволяют быстро получать наиболее точные результаты.
Электронные счетчики автоматы и гематологические комплексы за несколько минут и
даже секунд определяют число эритроцитов, лейкоцитов, кровяных пластинок,
количество гемоглобина, белка и ряда других параметров крови [1,2]. Гематологический анализатор
нового поколения PCE-170N (Австрия) имеет множество
полезных функций и предоставляет более надежный уровень точности и
удобства. Особенностями данной модели
является то, что все 18 получаемых параметров крови, могут быть показаны на
экране в виде гистограммы и распечатаны. Поскольку данный прибор предназначен,
главным образом, для медицинских целей, встал вопрос о том, соответствуют ли
получаемые параметры прибора PCE-170N истинным значениям при
исследовании крови животных. Возможно ли прямое исследование показателей крови
различных видов животных и птиц, или необходимы, какие либо коррективы.
Таким образом, целью
наших исследований было провести сравнительный анализ некоторых гематологических
показателей у овец с применением традиционных методов исследования, с данными,
полученными при помощи гематологического анализатора PCE-170N.
Для проведения исследований
использовали овец в возрасте 1,5-2 года. Подбор овец
в опытную группу проводили по принципу аналогов, использованы клинически
здоровые животные. Для гематологических исследований у опытных овец кровь из яремной вены брали в утреннее время,
преимущественно перед кормлением.
Для получения цельной крови, чтобы
она не свертывалась, добавляли антикоагулянт гепарин из расчета 50 ЕД на 10 мл крови (0,5 мл). В крови
определяли: количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов в камере Горяева; гемоглобин
гематиновым методом по Сали; гематокритную величину микрометодом в модификации Й.Тодорова; цветовой
показатель. Определение
количества эритроцитов и лейкоцитов проводили по общепринятой методике в
счетной камере, путем разбавления крови пробирочным методом по Н.М.Николаеву. Подсчет тромбоцитов проводили
по методике Хауке. Гемоглобин в
крови определяли гематиновым методом по Сали на гемометре ГС-3. Гематокритный показатель
(относительный объем эритроцитов) определяли микрометодом в модификации
Й.Тодорова с использованием капилляров Панченкова.
Полученные результаты обрабатывали
методом вариационной статистики (по Г.Ф.Лакину) [3] и сравнивали с нормативами
гематологических показателей. Результаты исследования крови
общепринятыми методами приведены 1 таблице.
Таблица 1 –
Результаты исследований крови овец общепринятыми методами (n=10)
№ | Показатели | Полученные величины | Нормальные величины |
1 | Лейкоциты, 109/л | 11,8±1,6 | 6,0-14,0 |
2 | Эритроциты, 1012/л | 3,3±2,1 | 7,0-12,0 |
3 | Тромбоцитов 109/л | 950,6±11,3 | 270-500 |
4 | Гемоглобин, г/л | 120,6±2,0 | 90-133 |
5 | Гематокрит, л/л | 14,6±0,9 | 25-45 |
6 | Цветовой показатель, ед | 0,5±0,06 | 0,9-1,1 |
При
сравнении полученных результатов с нормальными величинами периферической крови
овец были выявлены отклонения по таким показателям, как количество эритроцитов,
тромбоцитов и гематокрита. Так у опытных овец выявлены следующие изменения: эритроцитопения,
уменьшение гематокритного показателя и тромбоцитоз.
На втором этапе
работы эти же пробы крови овец были исследованы на гематологическом анализаторе PCE-170N.
Автоматические
приборы для подсчета частиц крови основаны на регистрации электрических
импульсов, возникающих при прохождении микрочастиц через отверстие датчика.
Такие приборы назывались кондуктометрическими, а принцип их работы назывался
– импульсный.
Гематологический
анализатор PCE-170N является прибором нового
поколения, который кроме счетчика частиц укомплектован гемоглобинометром,
электронным оборудованием, экраном и наружным принтером. Гематологический
анализатор PCE-170N предоставляет 18 стабильных
параметров крови благодаря высокотехнологичному компьютеру, который преобразует
измеренные сигналы в цифровые процессы.
Для сравнения
полученных результатов исследования с нормальными величинами нами проведены вычисления
ряда таких параметров как средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC) или средний объем эритроцита (MCV). В частности, нормальные
величины таких показателей как, абсолютные количества лимфоцитов, гранулоцитов,
моноцитов были высчитаны нами с учетом общего количества лейкоцитов (100%) и
данных нормальной лейкоцитарной формулы овец. Следует отметить, что в доступной
ветеринарной литературе, мы не нашли нормальные величины крови овец для таких
показателей как, PCT (процент
тромбоцитов), MPV (средний
объем тромбоцитов) и PDW (ширина измерения тромбоцитов).
Результаты исследования
крови на гематологическом анализаторе PCE-170N представлены в таблице 2. Анализ результатов этих данных выявил наличие
отклонений по большинству параметров. Так у исследованных овец увеличено
количество лимфоцитов и моноцитов, количество же гранулоцитов наоборот понижено.
Такая же картина характерна для относительных количеств этих видов лейкоцитов,
за исключением моноцитов. Их относительное количество соответствует норме (2,1±0,06 %). Следовательно, у овец, содержащихся в условиях
клиники, наблюдается абсолютный видовой лейкоцитоз – лимфоцитоз. Уменьшение же
гранулоцитов (гранулоцитопения), по-видимому, связано с нейтропенией, поскольку
нейтрофилы составляют основную массу гранулоцитов крови. Картина красной крови
опытных животных также имеет существенные различия по сравнению с нормой. Так у
исследованных овец наблюдается уменьшение количества эритроцитов (3,8±0,4 млн/мкл) и гематокритного показателя (10,8±0,1%). Количество же гемоглобина соответствует нормальным
величинам (123,0±0,08 г/л). Все показатели,
отражающие физико-химические свойства эритроцитов (MCV, MCH и MCHC), так называемые индексы
эритроцитов, наоборот повышены, что связано с компенсаторной реакцией
кроветворных органов. Следовательно, наблюдаемое уменьшение числа эритроцитов
(эритроцитопения), вызвано недостаточным и неполноценным кормлением. Уменьшение
гематокритного показателя свидетельствует о наличии железодефицитной или В12-дефицитной
анемии.
Наиболее значительные
изменения обнаружены в показателях количества тромбоцитов. У опытных овец их
количество увеличено почти в 14 раз (7001,1±0,05 против 270-500 тыс/мкл у
здоровых животных). Увеличение количества тромбоцитов встречается после
операций и при многих незаразных и инфекционных заболеваниях. Однако, с учетом
клинического обследования животных, когда никаких существенных симптомов заболеваний
обнаружено не было, можно сделать предположение, о том, что данный феномен
связан с физиологическим распределительным тромбоцитозом, когда при возбуждении
симпатической нервной системы или после физической нагрузки, происходит выброс
тромбоцитов из депо-селезенки. В медицинской практике такой феномен наблюдается
у спортсменов и называется «тренинг-тромбоцитоз».
Таким образом,
результаты исследования крови на гематологическом анализаторе PCE-170N выявили наличие у животных таких
симптомов как лимфоцитоз, нейтропения, эритропения, уменьшение гематокрита,
увеличение среднего объема эритроцитов, среднего содержания гемоглобина в
эритроците и средней концентрации гемоглобина в эритроците.
При сравнении
результатов исследования крови, полученных с использованием разных методик
выявлено, что по основным показателям
(количества лейкоцитов, эритроцитов) наблюдается достаточное сходство
(11,8±1,6 против
12,3±0,6 и 3,3±2,1 против 3,8±0,4 соответственно). Показатели гемоглобина и гематокрита
отличаются больше, но в целом однонаправлены и
соответствуют обнаруженным изменениям. Наиболее существенные различия
были обнаружены по количеству тромбоцитов 7001,1±0,05 (на аппарате PCE-170N) против 950,6±11,3 (метод Хауке). По-видимому, это связано с тем, что
данный прибор предназначен для исследования крови человека, когда нормальное
количество тромбоцитов находится в пределах 180-320 тыс/мкл. А поскольку плазма
крови овец богата тромбоцитами (в норме 270-500 тыс/мкл), то для получения
более точных данных, необходимо было ее предварительно разбавить изотоническим
раствором хлорида натрия.
Следует отметить, что
при статистической обработке данных, полученных на аппарате PCE-170N, не было случая, чтобы результат
какого-либо измерения отличался от остальных данных. В то же время, при
исследовании крови общепринятыми методами, в частности при подсчете эритроцитов
и лейкоцитов, в результате неточного разведения крови, были случаи, когда
некоторые данные приходилось отбрасывать. Большой разброс отклонений был также
при определении гемоглобина гематиновым методом по Сали.
Характеристикой
разброса экспериментальных данных служит среднее квадратичное отклонение
σ, которое можно определить по размаху наблюдений по формуле σ = хмак – хмин /
К, где: хмак и хмин –
максимальное и минимальное значение в данном ряде наблюдений; К – величина
коэффициента для данного числа измерений [3].
Таблица 2 – Результаты
исследования крови овец на гематологическом анализаторе PCE-170N (n=10)
№ п/п | Показатели аппарата и их обозначения | Полученные величины | Нормальные величины |
1 | WBC (x 103/µL) – количество лейкоцитов, 103/мкл | 12,3±0,6 | 6,0-14,0 |
2 | LYM (x 103/µL) – лимфоциты, абсолютное кол-во, 103/мкл | 11,8±0,2 | 2,4-7,0 |
3 | MON (x 103|µL) – моноциты, абсолютное кол-во, 103/мкл | 0,21±0,06 | 0,12-0,7 |
4 | GRA – (x 103/µL)- гранулоциты, абсолютное | 0,5±0,03 | 2,5-9,2 |
5 | LYM (%)– лимфоциты, относительное | 95,3±0,5 | 40-50 |
6 | MON (%)– моноциты, относительное | 2,1±0,06 | 2-5 |
7 | GRA (%)- гранулоциты, | 2,6±0,02 | 42-66 |
8 | RBC (x 106/µL) – количество эритроцитов, 106/мкл | 3,8±0,4 | 7,0-12,0 |
9 | HGB (g/dL) – гемоглобин, г/100 мл | 12,3±0,08 | 9,0-13,3 |
10 | HCT (%) – гематокрит | 10,8±0,1 | 25-45 |
11 | MCV (fL) – средний объем эритроцита, | 45,1±0,08 | 35,7-37,5 |
12 | MCH (pg)- среднее содержание | 53,3±0,06 | 24-33 |
13 | MCHC (g/dL) – средняя концентрация | 99,8±0,2 | 30-36% (86,8-94,7) |
14 | RDW (%) – ширина распределения | 0,0 | – |
15 | PLT (x 103/µL) – количество кровяных | 7001,1±0,05 | 270-500 |
16 | PCT (%) – значение кровяных | 0,999±0,01 | – |
17 | MPV (fL) – | 13,5±0,07 | – |
18 | PDW (fL) – | 6,0±0,02 | – |
В
наших исследованиях среднее квадратичное отклонение по всем показателям крови
было минимальным для данных, полученных на гематологическом анализаторе.
Среднее значение «m» (ошибка
средней арифметической) при определении на гематологическом анализаторе было
минимальным (0,24 против 3,58), что свидетельствует о высокой точности
полученных данных. Использование гематологического анализатора позволяет
получить большее количество параметров крови (18) а, следовательно, более полно
оценить состояние организма животных. Сравнительный анализ данных, полученных
при использовании общепринятых тестов, с результатами
электронно-автоматического метода выявил значительное преимущество последнего
по стабильности результатов (ошибка ±1%).
Использование
гематологического анализатора PCE-170N для исследования крови животных
является удобным и экономически эффективным (экономический эффект на 1 тенге
затрат составил 8,8 тенге) по сравнению с прямыми микроскопическими методами
исследований. Производительность
гематологического анализатора PCE-170N превышает общепринятые методы
исследования крови. Весь процесс, от введения образца крови до получения 18
результатов, длится не более 30 сек, а для исследования 1 пробы крови
общепринятыми методами необходимо в среднем около 2-х часов.
Несомненным
достоинством использования гематологического комплекса является и то, что
получаемые параметры красной крови позволяют дифференцировать различные виды
анемий и в данном случае свидетельствовали о наличии у животных мегалоцитарной
и макроцитарной анемий. При длительном, хроническом течении данной патологии
этот феномен представляет собой компенсаторную реакцию со стороны органов
кроветворения.
Поскольку
у животных количество тромбоцитов периферической крови значительно выше чем у
людей, то при их подсчете на гематологическом анализаторе рекомендуется
разбавить исследуемую кровь физиологическим раствором или ввести соответствующий
коэффициент. Для овец, при существующей настройке
аппарата, он равен 0,14.
Литература
1
Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник/ Меньшиков В.В.,
Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под ред. В.В.Меньшикова.-М.:
Медицина, 1987, – С.106-173.
2
Бикхард К. Клиническая ветеринарная патофизиология./ Пер. с нем. В.Пулинец.-М.:
ООО «АКВАРИУМ ПРИНТ», 2005.-С.38-92.
3
Лакин Г.Ф. Биометрия: Учебное
пособие для биологич. спец. вузов. 3—изд., перераб. и доп..- М.: Высшая школа,
1980.- 293 с.
| / Обзоры и публикации / Ветеринария | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|