Гемоглобин свободный и связанный

При диагностике заболеваний врачи анализируют уровень свободного гемоглобина. Это общий показатель железосодержащего белка, который входит в состав кровяных клеток-эритроцитов. Он позволяет определить, насколько полноценно органы получают кислород и питательные вещества. Поэтому при появлении отклонений от нормы необходимо искать причину, проводить профилактическое лечение.
Функциональное предназначение гемоглобина
Свободным или плазменным гемоглобином называется основной белок в крови человека. Он входит в состав эритроцитов и выполняет главную роль в переносе кислорода к тканям. Дополнительно он аккумулирует молекулы углекислого газа, очищая плазму от накопившихся продуктов распада, стимулируя процесс регенерации клеток внутренних органов и систем.
В анализах свободный гемоглобин обозначается формулой Hb. При его недостатке организм человека испытывает кислородное голодание. Это проявляется в обострении хронических заболеваний, ухудшении самочувствия, нарушении работы головного мозга и нервной системы. Даже при отклонении в 15-25 единиц человек ощущает слабость, сонливость, жалуется на понижение концентрации внимания и памяти.
Виды свободного гемоглобина
Основная масса свободного гемоглобина концентрируется в печени человека, остальное количество находится в плазме. Выделяется два вида такого белка:
- Фетальный. Диагностируется только в крови новорожденных малышей. К 10–12 месяцам его структура меняется на обычную, снижается концентрация с 80% до 1%.
- Гликированный. Белок формируется при связке с молекулами глюкозы. По его количеству в анализе врачи могут с высокой точностью выявить сахарный диабет на ранней стадии.
На уровень гемоглобина влияет не только возраст пациента: в течение суток он меняется на 5–6%, реагирует на недосыпание, жирную или сладкую пищу, стрессовое состояние человека. Но показатель не используется при комплексной диагностике хронических болезней.
Важно!
Уровень свободного гемоглобина показывает, насколько слажено и правильно работают органы и системы пациента. Он помогает выявить скрытые воспаления и нарушения внутрисосудистого гемолиза, патологии сердечного клапана, атеросклероз.
Нормы свободного гемоглобина для детей
В первые месяцы жизни уровень свободного гемоглобина в крови грудничка превышает 80% от общего показателя. Это связано с быстрым метаболизмом, усиленной работой почек и системы кроветворения, которая перестает зависеть от материнской. Нормальным считается показатель:
- первая неделя до 230 г/л;
- до 6 месяцев понижение до 140 г/л;
- в год после рождения 145–160 г/л.
Кроме возрастных норм, во внимание следует принимать особенности питания, введение или отсутствие прикорма. При анемии у малышей замедляется рост и развитие, плохо набирается вес, ребенок становится более раздражительным и плаксивым. В период полового созревания на уровень начинает влиять и пол, гормональные особенности.
Уровень свободного гемоглобина у взрослых
У людей старше 18 лет показатель не зависит от возраста, остается относительно стабильным при отсутствии проблем со здоровьем. Но при любых диетах, нарушениях режима дня он не должен превышать 2–4% от общего гемоглобина. Если белок проникает в плазму, у человека уменьшается количество эритроцитов, меньше кровяных телец участвует в процессе кислородного обмена.
Основная сложность при диагностике уровня свободного гемоглобина – для его определения требуется специальный комплексный анализ. Методы Бинга и спектрофотометрии предполагают выделение белков из плазмы, исследование сывороточного альбумина и холестерина. Сравнение таких показателей в динамике используется при подозрении на инсульт, инфаркт миокарда.
Нормальные показатели для женщин
Для женщины среднего возраста и комплекции нормальным считается показатель 120–150 г/л. При ежемесячной менструации он падает до 110 г/л, но быстро возвращается в норму, не требует приема специальных препаратов или витаминов. Отклонения встречаются в следующих ситуациях:
- курение;
- гормональный сбой на фоне патологий репродуктивной системы;
- менопауза;
- строгие диеты;
- физическое переутомление.
При беременности уровень свободного гемоглобина падает: организм женщины старается «задействовать» все белки в переносе кислорода. Врачи строго контролируют этот показатель, чтобы не допустить гипоксии плода, патологий развития нервной системы. Но и превышение нормы в 140 г/л несет опасность тромбоза, варикозного расширения вен, тромбоэмболии легких во время родоразрешения.
Читайте также
Показатель Hb в крови для мужчин
Для среднестатистического мужчины нормальный уровень гемоглобина определяется в диапазоне 140–170 г/л. Показатель завышен по сравнению с женским из-за воздействия тестостерона – основного мужского гормона. По этой же причине происходит естественное снижение после 55 лет. У ряда пациентов наблюдается понижение нормы на фоне:
- чрезмерного физического труда;
- злоупотребления сигаретами или алкоголем;
- болезни щитовидной железы.
Свободный железосодержащий белок повышен у профессиональных спортсменов, поэтому врачам сложнее определить у них анемию или нарушения функциональности кровеносных сосудов.
Важно!
У мужчин, проживающих в высокогорных районах, от природы наблюдается низкий уровень свободного гемоглобина. Так организм адаптируется к повышенному давлению, исключая кислородное голодание мозга.
Энзимодефицитные анемии
Опасной для здоровья ситуацией может стать развитие энзимодефицитной анемии. Оно связано с превышением нормы свободного гемоглобина в плазме. Почки человека не успевают выводить его с мочой, происходит накопление с продуктами распада в печени. В течение нескольких дней нарушается работа селезенки, снижается выработка кровяных телец.
Читайте также
При энзимодефицитной анемии у больного резко падает гемоглобин, возникают судороги, головокружение и снижение артериального давления. Он жалуется на сонливость и слабость, отказывается от еды. При пальпации врач замечает увеличение печени в правом подреберье. При отсутствии лечения у человека заметно ухудшается состав крови, обостряются хронические заболевания.
Уровень свободного гемоглобина – важный показатель, который помогает врачам своевременно обнаружить опасное для жизни пациента осложнение. Любые отклонения от принятой нормы, выявленные в анализах, должны стать поводом для полного обследования. Зачастую его превышение помогает специалисту понять причину ухудшения самочувствия, бессонницы или тахикардии.
Цифры напротив символа Hb, или гемоглобина, в бланке с результатами общего анализа крови могут раскрыть врачу причины низкого давления, головокружения, судорог ног пациента, а также оповестить о надвигающихся серьезных угрозах. Своевременное выявление отклонений и приведение концентрации гемоглобина в норму позволит избежать серьезных проблем со здоровьем. Речь идет о снижении рисков инфарктов и инсультов у людей в возрасте, патологий развития детей, ухудшения состояния матери и плода во время беременности.
Что такое гемоглобин и каковы его функции
Гемоглобин (Hb) — сложный железосодержащий белок, содержащийся в эритроцитах (красных кровяных тельцах) крови и частично присутствующий в свободном виде в плазме. Именно он осуществляет перенос кислорода от легких к клеткам и углекислого газа — в обратном направлении. Если говорить образно, то эритроцит — это своеобразное грузовое судно, курсирующее по кровяному руслу, а молекулы гемоглобина — контейнеры, в которых транспортируется кислород и углекислый газ. В норме один эритроцит вмещает порядка 400 млн молекул гемоглобина.
Участие в газообмене — важнейшая, но не единственная функция «кровяных шаров» (от греч. haima — «кровь» + лат. globus — «шар»). Благодаря своим уникальным химическим свойствам гемоглобин является ключевым элементом буферной системы крови, поддерживающим кислотно-щелочной баланс в организме. Hb связывает и выводит на клеточном уровне кислые соединения (препятствует ацидозу — закислению тканей и крови). А в легких, куда он поступает в форме карбгемоглобина (HbCO2), за счет синтеза углекислоты предотвращает противоположный процесс — защелачивание крови, или алкалоз[1].
Производная Hb — метгемоглобин (HbOH) — обладает еще одним полезным свойством: прочно связывать синильную кислоту и другие токсичные вещества. Таким образом, железосодержащий белок принимает удар на себя и снижает степень отравления организма[2].
Итак, гемоглобин крайне важный элемент жизнедеятельности и патологическое уменьшение его концентрации (анемия или малокровие) может спровоцировать в лучшем случае ломкость ногтей и волос, сухость и шелушение кожи, мышечные судороги, тошноту и рвоту, головокружение. Острая же форма анемии вызывает кислородное голодание клеток, приводящее к обморокам, галлюцинациям и фатальным последствиям — гипоксии мозга, атрофии нервных клеток, параличу дыхательной системы.
Как должно быть в норме
Уровень гемоглобина в нашей крови может несколько увеличиваться и уменьшаться по естественным причинам. Обновление гемоглобина связано с жизненным циклом эритроцита, к которому он прикреплен. Так, примерно каждые 120 дней часть молекул гемоглобина вместе с эритроцитами отправляется в печень — на расщепление и после вновь синтезируется, присоединяясь к свободному эритроциту[3].
Количество гемоглобина зависит от возраста и пола, меняется в процессе вынашивания и рождения ребенка[4].
На гемоглобин также оказывают влияние специфические условия труда или проживания (например, повышенные показатели бывают у пилотов и жителей гористой местности), приверженность вегетарианству и донорство (эти факторы, напротив, снижают гемоглобин)[5].
Согласно рекомендациям ВОЗ[6], нормой гемоглобина считается:
- для детей от полугода до 5 лет — 110 г/л и выше;
- для детей 5–11 лет — 115 г/л и больше;
- для детей 12–14 лет, а также девушек и женщин (15 лет и старше) — 120 г/л и выше;
- для мужчин (15 лет и старше) — 130–160 г/л.
Беременным женщинам, обеспечивающим минералами (в том числе железом) себя и малыша, важно следить, чтобы уровень гемоглобина не падал ниже 110 г/л. Отметим, что, по данным ВОЗ, железодефицитная анемия (ЖДА) диагностируется у 38,2% беременных на планете[7]. Дефицит молекул гемоглобина может возникнуть после 20-й недели «интересного положения»: из-за увеличения объема циркулирующей крови, растущих потребностей плода, уменьшения поступления и всасывания железа вследствие токсикоза и расстройств ЖКТ. В это время женщину может мучить слабость, головокружение, одышка даже при непродолжительной ходьбе, судороги нижних конечностей. Опасное следствие острых форм ЖДА — преждевременные роды, задержки в развитии плода.
Кстати, необычные вкусовые запросы беременных (вплоть до анекдотичных, таких как салат из жареной клубники и селедки) порой тоже связаны с потребностью в железе для синтеза гемоглобина. Роды, сопровождающиеся потерей крови, ведут к дополнительному понижению гемоглобина. В целом от зачатия до появления ребенка на свет организм женщины утрачивает порядка 700 мг железа, еще 200 мг — за период лактации[8]. На восстановление запасов требуется не менее трех лет.
Виды анализов на гемоглобин
Подсчет числа молекул гемоглобина производится при общем анализе крови. Помимо количества белка (строка Hb), в бланке анализа могут указать MCH/MCHC, что соответствует среднему содержанию/концентрации гемоглобина в эритроците. Это уточнение позволяет подсчитать полезный железопротеин и исключить из расчета аномальные, нестабильные формы гемоглобина, не способные переносить кислород.
Для измерения гемоглобина во внелабораторных условиях — в машинах скорой помощи или при проведении профилактических выездных осмотров — применяются специальные гемоглобинометры. Это портативные приборы, в которые помещается кровь с реагентом для фотометрического автоматического определения количества гемоглобина.
Для массового тестирования на анемию в странах третьего мира ВОЗ разработала малозатратный колорометрический метод исследования. При колориметрии каплю крови наносят на специальную хроматографическую бумагу и сопоставляют ее со шкалой цветов, соответствующих разным показателям гемоглобина с шагом 20 г/л[9].
Уровень гликированного гемоглобина определяется и при биохимическом анализе венозной крови. Цель исследования в данном случае — определение глюкозы в крови, которая образует прочное соединение с гемоглобином и лишает его возможности транспортировать кислород. Показатель важен для диагностики сахарного диабета и оценки эффективности его лечения.
Чем опасен повышенный гемоглобин в крови
Высокий гемоглобин может быть вызван объективной нехваткой кислорода, стимулирующей организм на увеличенное производство этого белка крови. Подобная патология часто фиксируется у экипажей воздушных судов и часто летающих пассажиров, жителей высокогорья, альпинистов, горнолыжников. В силу большей потребности в кислороде повышенный уровень гемоглобина свойственен профессиональным спортсменам, преимущественно лыжникам, легкоатлетам, борцам, тяжелоатлетам. Это физиологический механизм компенсации, не вызывающий никаких медицинских опасений (кавказское долголетие — яркий тому пример).
Повысить гемоглобин может и пагубная привычка: во время курения человек вдыхает меньше кислорода, чем требуется, и организм реагирует на это выработкой дополнительного гемоглобина.
К сожалению, повышенный гемоглобин может указывать и на патологии системы кроветворения: эритроцитоз, рак крови, обезвоживание организма, порок сердца и легочно-сердечную недостаточность, а также на непроходимость кишечника[10].
Увеличенное количество гликированного гемоглобина отмечается при сахарном диабете: часть молекул Hb «перетягивает» на себя глюкозу, и для нормального дыхания требуются добавочные кислородные «контейнеры»[11].
Повышенный свободный гемоглобин в плазме фиксируется и при ожоговых поражениях вследствие разрушения эритроцитов с высвобождением из них гемоглобина[12].
Опасность высокого гемоглобина (+20 г/л от нормы и более) заключается в сгущении и увеличении вязкости крови, приводящему к образованию тромбов. Тромбы, в свою очередь, могут вызвать инсульт, инфаркт, кровотечение в ЖКТ или венозный тромбоз[13].
Гемоглобин ниже нормы: что это значит и к чему приводит
Железо — один из самых распространенных и легко добываемых химических элементов на Земле. При этом, как ни парадоксально, от дефицита железа в организме страдает больше людей, чем от какого-либо другого нарушения здоровья[14]. В группе риска население из низких социальных слоев, не получающее достаточного количества железа из продуктов питания, женщины репродуктивного возраста и дети, то есть люди, у которых «приход» элемента меньше «расхода».
Причиной низкого уровня гемоглобина (минус 20 г/л от нормы и более) зачастую являются скудное или несбалансированное питание — недостаточное поступление железа и меди, витаминов A, С и группы B или употребление железосодержащей пищи совместно с цинком, магнием, хромом или кальцием, которые не позволяют Fe усваиваться[15].
Низкие показатели могут наблюдаться у вегетарианцев, т.к. негемовое железо из растительной пищи усваивается намного хуже, чем гемовое, источником которого служат продукты животного происхождения[16].
Смежная причина — наличие кишечных паразитов, которые перехватывают поступающие микроэлементы и витамины. Усвоению железа могут также мешать проблемы с желудочно-кишечным трактом.
Заметное снижение уровня гемоглобина сопровождает кровопотери, вызванные ранениями, оперативным вмешательством, менструацией, кровотечениями, возникающими во время родов и абортов, а также при донации крови и ее компонентов.
На уровень гемоглобина влияют и скрытые кровопотери при патологии ЖКТ (язвы желудка и ДКП), варикозе, миомах и кистах органов женской половой системы, кровоточивость десен.
Причины снижения гемоглобина, возникающие во время беременности и лактации, а также осложнения, к которым они могут привести, мы рассмотрели выше. Длительный железодефицит у мужчин, детей и небеременных женщин имеют сходную симптоматику: ухудшение состояния кожи, ногтей и волос, головокружение, обмороки, онемение рук и ног, беспричинная слабость.
Кислородное голодание вследствие недостатка гемоглобина может привести к ухудшению памяти, замедлению нервных реакций, в запущенной форме — к атрофии клеток мозга и других органов и систем организма.
Усиленное кровообращение (более частый прогон гемоглобина от легких к тканям и обратно) чревато проблемами с сердцем и сосудами: кардиомиопатией и развитием сердечной недостаточности.
Низкий гемоглобин негативно отражается на буферной функции: это значит, что закисление крови подрывает иммунную защиту организма, снижает сопротивляемость простудным и инфекционным заболеваниям.
Наиболее уязвимы перед анемией дети и подростки. Острый дефицит жизненно важного минерала может сказаться на их умственном и физическом развитии[17].
Гемоглобин — незаменимый участник жизнедеятельности, на который возложены важнейшие функции: перенос кислорода и углекислого газа, сохранение кислотно-щелочного баланса, противостояние ядам. Еще одна функция — сигнальная — помогает по отклонению уровня гемоглобина от нормы выявить риски развития патологий и принять контрмеры. Таким образом, контроль и оперативная коррекция уровня гемоглобина — не прихоть врачей, а действенный способ сохранить здоровье.
Функциональное предназначение гемоглобина
Свободным или плазменным гемоглобином называется основной белок в крови человека. Он входит в состав эритроцитов и выполняет главную роль в переносе кислорода к тканям. Дополнительно он аккумулирует молекулы углекислого газа, очищая плазму от накопившихся продуктов распада, стимулируя процесс регенерации клеток внутренних органов и систем.
В анализах свободный гемоглобин обозначается формулой Hb. При его недостатке организм человека испытывает кислородное голодание. Это проявляется в обострении хронических заболеваний, ухудшении самочувствия, нарушении работы головного мозга и нервной системы. Даже при отклонении в 15-25 единиц человек ощущает слабость, сонливость, жалуется на понижение концентрации внимания и памяти.
Виды свободного гемоглобина
Основная масса свободного гемоглобина концентрируется в печени человека, остальное количество находится в плазме. Выделяется два вида такого белка:
- Фетальный. Диагностируется только в крови новорожденных малышей. К 10–12 месяцам его структура меняется на обычную, снижается концентрация с 80% до 1%.
- Гликированный. Белок формируется при связке с молекулами глюкозы. По его количеству в анализе врачи могут с высокой точностью выявить сахарный диабет на ранней стадии.
На уровень гемоглобина влияет не только возраст пациента: в течение суток он меняется на 5–6%, реагирует на недосыпание, жирную или сладкую пищу, стрессовое состояние человека. Но показатель не используется при комплексной диагностике хронических болезней.
Уровень свободного гемоглобина показывает, насколько слажено и правильно работают органы и системы пациента. Он помогает выявить скрытые воспаления и нарушения внутрисосудистого гемолиза, патологии сердечного клапана, атеросклероз.
Различные формы гемоглобина и их уровень в крови
Говоря об уровне Hb в крови, обычно имеют в виду так называемый «общий», или «свободный», гемоглобин, то есть количество этого белка в здоровых красных кровяных тельцах – эритроцитах. Если их достаточно, гемоглобин в крови остается в пределах нормы, если их меньше, чем нужно, он снижается, а если слишком много – повышается.
Однако услышав о высоком гликированном или о фетальном гемоглобине пациент не может понять, почему врач встревожен. Дело в том, что этот белок существует в нашей крови в нескольких формах, его норма в каждом случае различна, а отклонения от нее говорят о серьезных заболеваниях.
- Гликированный гемоглобин (HbA1c) образуется связыванием Hb эритроцитов с глюкозой. Он растет при переизбытке сахара в крови и указывает на сахарный диабет.
- Фетальный гемоглобин в крови новорожденных отличается от «взрослого», и в норме должен полностью замениться им в конце первого года жизни ребенка.
Гликированныйо гемоглобин измеряется в процентах к общему, и его количество не должно превышать 4-6,5 %. Норма фетального гемоглобина у новорожденного – до 80 %, но в крови взрослого человека его содержание должно быть не больше 1 % по отношению к общему.
Нормы свободного гемоглобина для детей
В первые месяцы жизни уровень свободного гемоглобина в крови грудничка превышает 80% от общего показателя. Это связано с быстрым метаболизмом, усиленной работой почек и системы кроветворения, которая перестает зависеть от материнской. Нормальным считается показатель:
- первая неделя до 230 г/л;
- до 6 месяцев понижение до 140 г/л;
- в год после рождения 145–160 г/л.
Кроме возрастных норм, во внимание следует принимать особенности питания, введение или отсутствие прикорма. При анемии у малышей замедляется рост и развитие, плохо набирается вес, ребенок становится более раздражительным и плаксивым. В период полового созревания на уровень начинает влиять и пол, гормональные особенности.
Цианметгемоглобиновый метод определения гемоглобина в крови
Один из наиболее точных методов определения гемоглобина в крови – это цианметгемоглобиновый. Он заключается в добавлении к сыворотке крови раствора Добкина, содержащего железосинеродистый и цианистый калий, соду. Гемоглобин при этом переходит в метгемоглобин, а потом в цианметгемоглобин. Затем пробирка помещается в спектрофотометр и ее освещают светом. По непоглощенной части измеряют оптическую плотность и переводят показатель в уровень гемоглобина. Этот же принцип определения используется и при автоматических замерах при помощи портативного гемоглобинометра.
Уровень свободного гемоглобина у взрослых
У людей старше 18 лет показатель не зависит от возраста, остается относительно стабильным при отсутствии проблем со здоровьем. Но при любых диетах, нарушениях режима дня он не должен превышать 2–4% от общего гемоглобина. Если белок проникает в плазму, у человека уменьшается количество эритроцитов, меньше кровяных телец участвует в процессе кислородного обмена.
Основная сложность при диагностике уровня свободного гемоглобина – для его определения требуется специальный комплексный анализ. Методы Бинга и спектрофотометрии предполагают выделение белков из плазмы, исследование сывороточного альбумина и холестерина. Сравнение таких показателей в динамике используется при подозрении на инсульт, инфаркт миокарда.
Нормальные показатели для женщин
Для женщины среднего возраста и комплекции нормальным считается показатель 120–150 г/л. При ежемесячной менструации он падает до 110 г/л, но быстро возвращается в норму, не требует приема специальных препаратов или витаминов. Отклонения встречаются в следующих ситуациях:
- курение;
- гормональный сбой на фоне патологий репродуктивной системы;
- менопауза;
- строгие диеты;
- физическое переутомление.
При беременности уровень свободного гемоглобина падает: организм женщины старается «задействовать» все белки в переносе кислорода. Врачи строго контролируют этот показатель, чтобы не допустить гипоксии плода, патологий развития нервной системы. Но и превышение нормы в 140 г/л несет опасность тромбоза, варикозного расширения вен, тромбоэмболии легких во время родоразрешения.
Показатель Hb в крови для мужчин
Для среднестатистического мужчины нормальный уровень гемоглобина определяется в диапазоне 140–170 г/л. Показатель завышен по сравнению с женским из-за воздействия тестостерона – основного мужского гормона. По этой же причине происходит естественное снижение после 55 лет. У ряда пациентов наблюдается понижение нормы на фоне:
- чрезмерного физического труда;
- злоупотребления сигаретами или алкоголем;
- болезни щитовидной железы.
Свободный железосодержащий белок повышен у профессиональных спортсменов, поэтому врачам сложнее определить у них анемию или нарушения функциональности кровеносных сосудов.
У мужчин, проживающих в высокогорных районах, от природы наблюдается низкий уровень свободного гемоглобина. Так организм адаптируется к повышенному давлению, исключая кислородное голодание мозга.
Подведём итоги
Нормальный уровень гемоглобина обеспечивает естественную поставку кислорода ко всем органам организма, а также качественное выведение продуктов распада. Отклонение от общепринятых параметров в сторону уменьшения или увеличения показателей этого компонента в биологической жидкости негативным образом отражается на дееспособности и функциональности всех без исключения органов.
Контроль критериев гемоглобинной массы стоит осуществлять каждому человеку, простейшим способом считается ежегодное прохождение медицинского обследования с обязательной сдачей крови на общий анализ. Любые отклонения от нормы количества эритроцитов должны стать обоснованным предлогом для дальнейшего обследования и лечения имеющихся проблем со здоровьем.
Энзимодефицитные анемии
Опасной для здоровья ситуацией может стать развитие энзимодефицитной анемии. Оно связано с превышением нормы свободного гемоглобина в плазме. Почки человека не успевают выводить его с мочой, происходит накопление с продуктами распада в печени. В течение нескольких дней нарушается работа селезенки, снижается выработка кровяных телец.
При энзимодефицитной анемии у больного резко падает гемоглобин, возникают судороги, головокружение и снижение артериального давления. Он жалуется на сонливость и слабость, отказывается от еды. При пальпации врач замечает увеличение печени в правом подреберье. При отсутствии лечения у человека заметно ухудшается состав крови, обостряются хронические заболевания.
Уровень свободного гемоглобина – важный показатель, который помогает врачам своевременно обнаружить опасное для жизни пациента осложнение. Любые отклонения от принятой нормы, выявленные в анализах, должны стать поводом для полного обследования. Зачастую его превышение помогает специалисту понять причину ухудшения самочувствия, бессонницы или тахикардии.
источник
ГЕМОГЛОБИНЕМИЯ
ГЕМОГЛОБИНЕМИЯ
(
haemoglobinaemia
; гемоглобин + греч. haima кровь) — повышенное содержание свободного гемоглобина в плазме крови.
У здоровых лиц в плазме содержится лишь незначительное (1—4 мг%) количество свободного гемоглобина. Это гемоглобин, выделившийся из закончивших свой жизненный цикл эритроцитов. В плазме он связывается в основном гаптоглобином (см.), образуя гаптоглобин-гемоглобиновый комплекс, который затем разрушается в клетках ретикулоэндотелиальной системы — в основном в печени, костном мозге, селезенке. С мочой этот высокомолекулярный комплекс не выделяется. Другие белки плазмы также связывают как гемоглобин, так и его гемосодержащие метаболиты. Это плазменные белки: гемопексин, являющийся гемсвязывающим бета1-глобулином с высоким содержанием углеводов (в плазме ок. 100 мг%), и альбумин, образующий с гематином метгемальбумин.
Методика и техника выявления
Выраженная Г. может быть определена визуально по интенсивности красной окраски плазмы исследуемой крови. Количественное определение свободного гемоглобина плазмы проводят на фотоколориметре по Бингу в модификации Г. В. Дервиза и Н. К. Бялко (1966). Методика позволяет выявить даже незначительный гемолиз.
Метод основан на выявлении пероксидазных свойств гемоглобина с помощью бензидиновой реакции. Реактивы: ацетатный буфер, перекись водорода и солянокислый бензидин. Кровь для анализа берут из вены сухой иглой и обязательно в силиконированную пробирку с антикоагулянтом. Центрифугируют не более 10 мин. при 1500 об/мин (чтобы не повредить эритроциты). Плазму (после отделения) вновь центрифугируют 10 мин. при 8000 об/мин. В пробирку наливают ацетатный буфер, перекись водорода, раствор бензидина и испытуемую плазму. Смешивают и оставляют стоять на 3 мин. Одновременно готовят контрольный раствор. Фотометрируют при красном светофильтре. Интенсивность голубой окраски нарастает в течение 4—5 мин., поэтому .величину оптической плотности измеряют 3—5 раз и регистрируют максимальные показания. Через 5—6 мин. окраска приобретает лилово-буроватый оттенок и оптическая плотность начинает уменьшаться. Результат берут средний из определения оптической плотности двух параллельных проб.
Количество растворенного гемоглобина в миллиграмм-процентах определяют на калибровочной кривой по оптической плотности.
Определение гемоглобина презентация к уроку
Слайд 1
Методы определения концентрации гемоглобина
Слайд 2
Оценка содержания гемоглобина: клиническое значение: ↓ Снижение концентрации гемоглобина: анемии (нарушение синтеза Hb , кровопотеря, гемолиз, недостаток выработки эритроцитов и т.п.)
Слайд 3
↑ Повышение концентрации гемоглобина: полицитемия, гемоконцентрация при дегитратации, ожогах, упорной рвоте; пребывание на больших высотах, чрезмерная физическая нагрузка или возбуждение;
Слайд 4
заболевания легких, приводящие к снижению легочной перфузии, плохой аэрации легких; хроническое химическое воздействие нитритов, сульфонамидов, вызывающих образование мет- и сульфогемоглобина. ↑ Повышение концентрации гемоглобина:
Слайд 5
Термин « общий гемоглобин » распространяется на совокупность форм гемоглобина , которые присутствуют в крови у здоровых людей или же появляются при патологии:
Слайд 6
окси гемоглобин ( HbO 2 ) ; восстановленный гемоглобин ( Hb) (синонимы: гемоглобин (Н Hb ++ ), феррогемоглобин ( Hb 4 ) ); карбо гемоглобин ( HbCO 2 ) (СО 2 – углекислый газ) Нормальные формы гемоглобина
Слайд 7
карбо кси гемоглобин ( HbCO) (син.: карбонмоноксигемоглобин ( HbCO) 4 ; мет гемоглобин ( MetHb), синонимы: гемИ глобин (Hb +++ ), ферригемоглобин ( Hb 4 +3 ); сульф гемоглобин ( SHb), синоним – вердоглобин S; гемИглобинцианид ( HiCN) (син.: цианметгемоглобин ( CNMetHb) ) ; и др. Патологические формы гемоглобина
Слайд 8
МЕТОДЫ АНАЛИЗА Больше всего в крови представлены: оксигемоглобин, дезоксигемоглобин, карбоксигемоглобин, метгемоглобин. Спектры поглощения оксигемоглобина (HbO 2 ), дезоксигемоглобина (Hb Н ) метгемоглобина (HbMet), карбоксигемоглобина (HbCO)
Слайд 9
Для определения гемоглобина чаще всего анализируют производные гемоглобина , образовавшиеся в процессе его окисления и присоединения к гему различных химических групп, приводящих к изменению валентности железа и окраски раствора .
Слайд 10
При количественном определении гемоглобина колориметрическими методами возникает проблема в выборе реагента , который превращал бы все производные гемоглобина только в одну форму перед фотометрическим анализом.
Слайд 11
Лучшими методами, количественно превращающими гемоглобин в его производные, оказались: гемиглобинцианидный (HbCN), гемихромный (HbChr) и гемиглобиназидный (HbN3), которые при фотометрировании дают наименьшую ошибку определения среди других методов анализа.
Слайд 12
ГемИглобинцианидный метод (метод Драбкина) (1936) Спектр поглощения цианметгемоглобина ( CNmetHb ) Принцип метода : все формы гемоглобина преобразуются в гемиглобинцианид (с помощью трансформирующего реагента (содержащего железосинеродистый калий, цианид калия и гидрокарбонат натрия) при длине волны 540 нм
Слайд 13
ГемИглобинцианидный метод (метод Драбкина) (1932) А 540 HiCN x 16114,5 x 10 -3 x P Hb (г/л)= =367,7 x А 540 HiCN 11,0 х L А 540 HiCN — абсорбция раствора гемоглобина при длине волны 540 нм, 16114,5 — молекулярная масса мономера гемоглобина, 11,0 — коэффициент миллимолярной экстинкции цианметгемоглобина, L — длина оптического пути, равная в большинстве фотометров 10 мм, 10 -3 — перевод молярной массы гемоглобина в миллимолярную массу Р – разведение крови (1 : 251, соотношение 20 мкл крови и 5,0 мл трансформирующего раствора)
Слайд 14
Перевод гемоглобина в гемиглобинцианид осуществляется при его взаимодействии с трансформирующим раствором , содержащим феррицианид калия, цианид калия, дигидрофосфат калия и неионный детергент: Детергент усиливает гемолиз эритроцитов и предотвращает мутность, связанную с белками плазмы. Дигидрофосфат калия поддерживает уровень рН, при котором реакция проходит за 3-5 минут.
Слайд 15
Феррицианид калия окисляет все формы гемоглобина в метгемоглобин , который образует с цианистым калием гемИглобинцианид, имеющий красноватый цвет, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе. Окси гемоглобин Дезокси гемоглобин Карбокси гемоглобин Мет гемоглобин
Слайд 16
Характеристика метода Гемиглобинцианидный метод, разработанный в 1936 г. Драбкиным, был одобрен Международным Комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH) в 1963 г. Основным достоинством гемиглобинцианидного метода являетс?