Группа крови норма реакции
[40-008]
Группа крови и резус-фактор
590 руб.
Комплексное исследование, позволяющее оценить принадлежность крови пациента к одной из групп по системе ABO и определить наличие/отсутствие Rh-антигена.
Синонимы русские
Группа крови по системе ABO, Rh-фактор.
Синонимы английские
Blood typing, ABO group, Rh type.
Метод исследования
Реакция агглютинации.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
Общая информация об исследовании
Каждый человек обладает уникальным сочетанием антигенов на поверхности своих клеток, в том числе и эритроцитов. На сегодняшний день известно более 250 антигенов эритроцитов, образующих около 30 антигенных систем. В клиническом плане наиболее важными из них являются система АВО и система резус.
Система АВO – основная система совместимости крови. Она представлена агглютиногенами A и B, являющимися гликопротеинами и расположенными на поверхности эритроцитов, и агглютининами альфа и бета, относящимися к классу иммуноглобулинов IgM и циркулирующих в плазме крови. В зависимости от комбинации этих агглютиногенов и агглютининов, выделяют 4 группы крови по системе АВО.
Первая (I) группа крови (самая распространенная в европейской популяции, 42 % населения) также называется O-группа, при ней на поверхности эритроцитов агглютиногены A или B отсутствуют, в плазме выявляются агглютинины альфа и бета.
Вторая (II) группа крови (37 %) также называется A-группа, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген A, в плазме выявляется агглютинин бета.
Третья (III) группа крови (13 % населения) также называется B-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген B, в плазме выявляется агглютинин альфа.
Четвертая (IV) группа крови (самая редкая, всего 8 % населения) также называется AB-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствуют агглютиногены обоих типов A и B, в плазме агглютинины альфа и бета отсутствуют.
Система резус также состоит из нескольких антигенов, главный из которых называется антиген D, или резус-фактор. Примерно у 85 % людей на поверхности эритроцитов можно выявить резус-фактор (резус-положительная кровь).
Принадлежность крови человека к определенной группе по системе АВО и системе резус является генетически обусловленной и не меняется в течение всей жизни.
Определение группы и резус-фактора крови имеет наибольшее значение при подготовке к переливанию крови. Такая необходимость может возникнуть при тяжелой кровопотере, тяжелых формах гемолитических анемий, заболеваниях костного мозга с нарушением нормальной продукции эритроцитов, а также при проведении объемных хирургических операций. Группу крови по системе ABO и системе резус учитывают не только при переливании эритроцитарной массы, но также и при переливании других компонентов крови (тромбоцитарная масса, лейкоцитарная взвесь и др.). Определение группы крови является обязательным тестом при беременности. В этом случае данные о группе крови пациентки и в некоторых случаях о группе крови отца ребенка учитываются для своевременной диагностики и лечения иммунологического конфликта (обусловленного несовместимостью крови плода и матери) и возникающего при этом гемолиза эритроцитов плода. Обязательному обследованию на группу крови и резус-фактор также подлежат военнослужащие, бойцы МЧС и других силовых структур.
Следует отметить, что в клинической практике используют несколько приемов для подтверждения совместимости крови донора и реципиента, в том числе раздельное лабораторное определение группы крови донора и реципиента, проба на индивидуальную совместимость эритроцитов донора и сыворотки реципиента, биологическая проба. Эти мероприятия выполняются потому, что вероятность ошибки при лабораторном определении группы крови небольшая, но все же существует.
Так как в основе лабораторного метода определения групп крови лежит реакция агглютинации, то наличие в сыворотке больного специфических белков (М-протеина, холодовых антител) или некоторых бактерий, препятствующих этой реакции, может приводить к получению ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Также прием некоторых лекарственных препаратов может отражаться на результатах определения резус-фактора. Поэтому особое внимание следует уделить подготовке к тесту.
Для чего используется исследование?
- Для определения принадлежности группы крови человека к одной из групп по системе АВО и системе резус.
Когда назначается исследование?
- При переливании компонентов крови реципиенту;
- при сдаче крови донором;
- при подготовке к хирургическим операциям;
- при планировании беременности или во время беременности;
- при подозрении на фетальный эритробластоз;
- при подготовке к трансплантации костного мозга, почки, печени и других органов и тканей;
- при поступлении на военную службу, в ряды МЧС и другие силовые структуры.
Что означают результаты?
Результаты определения группы крови по системе АВО | |||
Агглютиногены на поверхности эритроцитов | Агглютинины в сыворотке крови | Группа крови, обозначение римскими цифрами | Группа крови, обозначение латинскими буквами |
Отсутствуют | Альфа и бета | I | O |
A | Бета | II | A |
В | Альфа | III | B |
AB | Отсутствуют | IV | AB |
Результаты определения резус-фактора | |
Резус-фактор на поверхности эритроцитов | |
Найден | Резус-положительная кровь, Rh+ |
Не найден | Резус-отрицательная кровь, Rh- |
Что может влиять на результат?
- Прием некоторых лекарственных средств (леводопы, метилдопы) может приводить к получению ложноположительных результатов анализа резус-фактора.
Важные замечания
- Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту.
- Принадлежность крови человека к определенной группе по системе АВО и системе резус является генетически обусловленной и не меняется в течение всей жизни.
Также рекомендуется
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
- Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
- 4 обязательных анализа
- Скрининг миеломной болезни и парапротеинемий (иммунофиксация сыворотки крови с пентавалентной сывороткой)
Кто назначает исследование?
Хирург, терапевт, гематолог, врач общей практики, трансфузиолог.
Литература
- Hosoi E. Biological and clinical aspects of ABO blood group system. J Med Invest. 2008 Aug;55(3-4):174-82.
- Agre P, Cartron JP. Molecular biology of the Rh antigens. Blood. 1991 Aug 1;78(3):551-63.
- Chernecky C. C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / С.С. Chernecky, В.J. Berger; 5th ed. – Saunder Elsevier, 2008.
Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:
- первичное определение группы крови и резус фактора (цоликлоны Анти-А, Анти-B и Анти-D)
- вторичная диагностика группы крови и резус-фактора (стандартные сыворотки и перекрестный способ, определение фенотипа, т.е. антигенов C, c, E, e, Cw, K, k)
Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.
Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.
Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D по системе AB0 и системе Резус
Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.
Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?
– цоликлон анти-А;
– цоликлон анти-В;
– цоликлон анти-D;
– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.
Алгоритм и порядок определения группы крови
Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.
Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.
Расшифровка результатов определения группы крови
- если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
- если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
- если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
- если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.
AB (IV)
Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D
На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.
- если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
- если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)
AB (IV)Rh-
Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).
Определение групп крови стандартными сыворотками
Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:
- Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
- Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
- NaCl 0,9%
- Стеклянные палочки
Методика определение группы крови стандартными сыворотками
Методика определение группы крови стандартными сыворотками
- Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
- Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
- Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.
Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.
Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками
Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать. Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин. При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV). Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).
Определение группы крови перекрёстным способом
Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.
Методика определения группы крови перекрестным способом
Реакция со стандартными эритроцитами
Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).
Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами
- Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
- На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
- Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.
Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами
Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.
Каждый человек должен знать свою группу крови – это необходимо не только для того, чтобы оказавшись реципиентом, получить при переливании кровь, совместимую с собственной, но и для того, чтобы самому при необходимости стать донором для нуждающегося. Непосредственно перед переливанием выполняется определение резус-фактора и обязательно делается проба на совместимость.
В медицинской практике групповая принадлежность крови у людей в основном определяется в системе АВО, открытой Ландштейнером.
Именно точность и простота определения групповой принадлежности крови в лабораторных условиях и понятность для всех сделали эту систему основной.
Основные группы крови и антигены
Рассматриваемая ниже система определения группы крови человека получила название АВО от антигенов, находящихся в эритроцитах. Антигены условно обозначаются буквами А и В.
В эритроцитах данные антигены могут встречаться отдельно, вместе или полностью отсутствовать, что дает возможность разделить всех жителей планеты на 4 основные группы.
Таблица «Классификация групп крови людей в системе АВО»:
Группа крови | Антигены | |
Цифровое | Буквенное | |
1 | — | |
II | А | А |
III | В | В |
IV | АВ | А, В |
В крови около 85 % населения содержится специфический антиген, связанный с эритроцитами, который называется резус-фактором (Rh) по имени обезьяны макаки-резус, эритроциты которой были использованы в опытах по выявлению этого фактора.
Лица, эритроциты которых содержат Rh-фактор, обозначаются как резус-положительные, а при отсутствии Rh-фактора — как резус-отрицательные.
При переливании крови всегда учитывается не только групповая совместимость, но и совместимость по резус-фактору. Переливанию подлежит кровь донора той же группы, что и у больного.
Непосредственно перед переливанием проводят:
- Повторное определение группы крови донора и больного
- Определение резус-фактора
- Пробу на совместимость
- 3-кратную биологическую пробу
Наряду с основной системой АВО, определяющей совместимость и несовместимость переливаемой крови, существует ряд определений групп крови, предложенных другими авторами.
Как видно в обиходе группы крови обозначаются:
- I группа, или 0 (нулевая)
- II группа, или А
- III группа, или В
- IV группа, или АВ
Эритроцитам группы крови О (I) соответствует Н-антиген. Поэтому в медицинской литературе можно встретить обозначение системы АВО как системы АВО (Н).
Комбинация антигенов А и В не произвольна, а строго закономерна. Поэтому принадлежность к определенной группе крови является также строго индивидуальным свойством, которое сохраняется с момента рождения в течение всей жизни человека.
Современная наука говорит о том, что в крови человека (в его эритроцитах) имеются различные вещества — носители чужеродной информации. Эти вещества называются антигенами. Располагаются антигены на мембране (оболочке) эритроцитов.
В процессе развития иммунологии и генетики выяснилось, что многообразное различие свойственно не только красным кровяным тельцам (эритроцитам), но и другим клеточным элементам крови: лейкоцитам, тромбоцитам, а также плазменным белкам.
Уже выявлено более 500 антигенов крови человека, которые в свою очередь включают более 40 антигенных систем. Каждая из этих систем включает в себя десятки антигенов.
Кроме основной, широко распространенной системы определения группы крови АВО, в настоящее время различают эритроцитарные, лейкоцитарные, тромбоцитарные и сывороточные группы крови, число которых необычайно велико.
Для более четкого понимания достаточно привести следующий пример. Только в антигенной системе Rh (резус-фактор) в настоящее время выделено более 27 групп крови, а по лейкоцитарной антигенной системе HLA выделено более 16 миллионов групп.
В настоящее время не только открыты, но и хорошо изучены антигены следующих систем групп крови: Rh (резус-фактор), MNSs, Kell, Duffy, Kidd и др.
Наряду с широко распространенными описаны довольно редко встречающиеся антигены. Например, антиген Виа найден Андерсоном с сотрудниками в 1963 г. Встречается лишь у 1 человека на 1000 обследованных. Антиген Вх, встречается еще реже: лишь у одного на 3000 обследованных. В литературе описаны и еще более редко встречающиеся у человека антигены.
Можно предположить, что число вариантов сочетаний антигенов в крови человека настолько велико у разных людей, что каждый человек в итоге имеет свою индивидуальную, присущую только ему группу крови.
Сведения о группе крови обычно содержатся в медицинских документах. Определение группы крови практически производится в любой клинико-диагностической лаборатории. Для этой цели используется набор стандартных сывороток.
Определение основано на реакции агглютинации, если в сыворотке одной смешиваемой крови содержится агглютинин, а в эритроцитах другой крови — агглютиноген.
В сыворотке крови могут присутствовать агглютинины А и В, а в эритроцитах (на их мембранах) присутствуют агглютиногены А и В. Реакция агглютинации происходит в том случае, если агглютиноген А совпадает с агглютинином А, если агглютинин в совпадает с агглютиногеном В.
В крови одного и того же человека не могут находиться одновременно одинаковые агглютинины и агглютиногены, иначе произошла бы агглютинация собственных эритроцитов, приводящая к смерти.
По наличию или отсутствию в эритроцитах агглютиногенов, а в сыворотке — агглютининов всех людей разделили на четыре группы. Эти группы были разобраны выше.
Стандартные сыворотки I, II и III групп обладают реакцией изоагглютинации, т. е. способностью склеивать эритроциты. Сыворотка IV группы крови изоагглютинацией не обладает, так как не содержит агглютининов.
Стандартные сыворотки выпускаются в запаянных ампулах и сохраняются в прохладном месте.
Техника определения группы крови
Техника определения группы крови довольно проста, но требует внимательности от лаборанта.
На чистом предметном стекле или на фаянсовой тарелке делают восковым карандашом пометки соответственно наименованиям сывороток О, А, В.
Вблизи пометок разными пипетками наносят по капле различных стандартных сывороток. Рядом с каждой каплей помещают по капле исследуемой крови, которую берут из пальца. Кровь быстро смешивают с каплей сыворотки при помощи трех разных чистых стеклянных палочек.
Затем предметное стекло или тарелочку слегка покачивают, наблюдая в течение 4—5 мин, где произошла агглютинация. Потом добавляют к каждой капле по капле физиологического раствора и смесь перемешивают.
Если агглютинации не произошло, то кровь с сывороткой остается равномерно мутной:
- О (I) — реакция агглютинации отсутствует во всех трех каплях
- А (II) — реакция агглютинации наступила с сыворотками I и III групп
- В (III) — реакция агглютинации наступила с сыворотками I и II групп
- АВ (IV) — реакция агглютинации наступила с сыворотками всех трех групп
По статистическим данным, распространимость людей с разными группами крови следующая (%):
- О (I) группа — 40
- А (II) группа — 39
- В (III) группа — 15
- АВ (IV) группа — 6
При стандартном методе определения группы крови по простому алгоритму возможны ошибки за счет образования монетных столбиков (ложной агглютинации) при сгущении крови. В этих случаях сыворотку разводят физиологическим раствором в 2 раза, и монетные столбики исчезают.
Также при определении группы крови может наблюдаться неспецифическое склеивание эритроцитов под влиянием сывороток всех групп (феномен Томсона). В таких случаях группу крови определяют не только прямым, но и обратным методами.
Обратный метод (перекрестный способ) состоит в следующем: на предметное стекло наносят по капле стандартных эритроцитов из группы А и В и прибавляют по капле сыворотки исследуемого лица.
Появление агглютинации в обеих каплях говорит о принадлежности крови к О (I) группе, а при отсутствии агглютинации — к АВ (IV) группе.
Агглютинация эритроцитов А (II) группы указывает на В (III) группу. Если произошла агглютинация эритроцитов группы В (III), то, следовательно, это кровь А (II) группы.
В сущности, группа крови должна определяться у каждого новорожденного, фиксироваться в медицинской документации и сопровождать человека в течение всей его жизни, чего, к сожалению, не делается.
В то же время имеется определенная категория лиц, у которых в обязательном порядке определяют группу крови и резус-фактор: беременные, призывники в военкомате, доноры, больные перед плановой операцией и др.
Данные группы крови заносятся в паспорт или военный билет, а у доноров — в удостоверение донора.