Измерение гемоглобина в моче
При наличии в моче большого количества крови говорят о макрогематурии, небольшая примесь крови — микрогематурия, определяется микроскопическим исследованием — в осадке обнаруживаются эритроциты — или с помощью химических методов.
Гемоглобин выявляют при помощи реакций:
- с гваяковой кислотой;
- с амидопирином;
- с бензидином;
- для экспресс-анализа используют реактивные таблетки или тест-полоски, выпускаемые различными фирмами.
Принцип метода: гемоглобин в кислой среде катализирует реакции взаимодействия перекиси водорода с некоторыми соединениями (гваяковая кислота, амидопирин, бензидин), в результате которых получаются окрашенные соединения: с гваяковой кислотой — синее, с амидопирином — фиолетовое, с бензидином — синее.
Подготовка проб мочи: 1) исследуют свежесобранную и хорошо взболтанную мочу в абсолютно чистой посуде: в постоявшей моче гемоглобин превращается в метгемоглобин, не обладающий способностью переносить кислород, что может послужить причиной ложноотрицательных результатов; 2) концентрируют гемоглобин и освобождают мочу от некоторых сопутствующих веществ (миоглобин, хром, медь, йодид и бромид калия), дающих аналогичный результат реакции, для этого в пробирку наливают 8–10 мл нефильтрованной мочи, приливают 2 мл ледяной уксусной кислоты и 4-5 мл диэтилового эфира; содержимое пробирки встряхивают и оставляют в штативе на несколько минут для отделения уксусно-эфирной вытяжки, в которую переходит гемоглобин; верхний слой (уксусно-эфирный экстракт) используют для проведения реакций.
Проба с гваяковой кислотой
Реактивы: 1) Свежеприготовленный насыщенный раствор гваяковой кислоты: в пробирку вносят щепотку гваяковой кислоты, приливают 2–4 мл 96% этанола и растворяют до цвета крепкого чая; в реакции используют раствор без осадка; 2) 3% раствор перекиси водорода: к 3 частям свежего пергидроля прибавляют 27 частей дистиллированной воды; раствор готовят непосредственно перед использованием.
Ход определения. В пробирку вносят 2–3 мл уксусно-эфирного экстракта, прибавляют 8–10 капель раствора гваяковой кислоты и 8–10 капель раствора перекиси водорода.
Оценка результатов. Наличие в моче гемоглобина приводит к синему окрашиванию проб. При незначительном содержании гемоглобина окрашивание может появиться через несколько минут после начала реакции.
Проба с амидопирином
Реактивы. 1) 5% раствор амидопирина: 0,5 г амидопирина помещают в мерный цилиндр и до объема 10 мл приливают 96% этиловый спирт; 2) 3% раствор перекиси водорода: к 3 частям свежего пергидроля прибавляют 27 частей дистиллированной воды; раствор готовят непосредственно перед использованием.
Ход определения. В пробирку вносят 2–3 мл уксусно-эфирной вытяжки, прибавляют 8–10 капель 5% спиртового раствора амидопирина и 8–10 капель 3% раствора перекиси водорода.
Оценка результата. При наличии в моче гемоглобина развивается фиолетовое окрашивание.
Проба с бензидином
Реактивы: 1) 0,5% раствор бензидина (C12H12N2) в 50% растворе уксусной кислоты (СН3СООН). Годен в течение нескольких дней при хранении в посуде из темного стекла (нужен ежедневный контроль); 2) 3% раствор перекиси водорода (Н2O2).
Ход определения. В пробирку вносят 5–6 капель раствора бензидина, добавляют столько же 3% раствора перекиси водорода и 3–4 капли мочи.
Оценка результата. При наличии в моче гемоглобина смесь в пробирке окрашивается в зеленый или синий цвет.
Примечание. Более концентрированный раствор бензидина может дать положительную реакцию уже при том количестве эритроцитов, которое встречается в нормальной моче.
Модификация постановки реакции.
- На предметное стекло наносят 1 крупинку бензидина, затем 2 капли ледяной уксусной кислоты, 1 каплю мочи и 2 капли 3% раствора перекиси водорода.
- Смесь раствора бензидина и перекиси водорода в равных частях (несколько капель) наносят на обеззоленный фильтр, через который предварительно профильтровано некоторое количество мочи (10—20 мл), и наблюдают за развитием окраски.
- Перекись водорода можно заменить перекисью бария (ВаO2), для чего 0,25 г основного бензидина и 0,1 г перекиси бария растворяют в 5 мл 50% раствора уксусной кислоты. Реактив готовят непосредственно перед использованием.
Отрицательный результат не исключает наличия крови в моче, так как гемоглобин быстро превращается в метгемоглобин, который не обладает каталитическими свойствами.
Источник
Категория:
Химическое исследование мочи
Единица измерения:
мкг/л
Краткое описание
В норме гемоглобин в моче отсутствует. Гемоглобинурия (появление гемоглобина в моче) — это признак внутрисосудистого гемолиза эритроцитов. При гемоглобинурии моча темно-бурого цвета. Гемоглобинурии предшествует гемоглобинемия.
У здорового человека в кровяном русле разрушается около 10% эритроцитов, поэтому в плазме содержится свободный гемоглобин в концентрации, не превышающей 4 мг%. Свободный гемоглобин крови связывается гаптоглобином. Соединение гаптоглобин-гемоглобин не проходит почечный фильтр, так как его ММ составляет 160-320 кДа. Комплекс поступает в ретикулогистиоцитарную систему печени и селезенки, где подвергается расщеплению с образованием конечных продуктов пигментного обмена.
Гемоглобинурия возникает только в тех случаях, когда уровень свободного гемоглобина плазмы превышает резервную способность гаптоглобина связывать гемоглобин. При нормальной концентрации гаптоглобина крови она составляет 100 мг%.
Интенсивность гемоглобинурии зависит от степени гемоглобинемии, концентрации гаптоглобина в крови и резорбционной способности канальцев почек.
При низком уровне гаптоглобина плазмы гемоглобинурия появляется и без значительной гемоглобинемии.
Гемоглобинемия выше 100-120 мг% вызывает повышенную реабсорбцию гемоглобина клетками почечных канальцев. Реабсорбированный гемоглобин окисляется в эпителии проксимальных канальцев в гемосидерин, ферритин. Нагруженные гемосидерином клетки слущиваются и выявляются в моче. При большом количестве гемосидерина в осадке мочи обнаруживается свободно лежащий гемосидерин. Гемоглобинемия свыше 125 мг% сопровождается гемосидеринурией и гемоглобинурией.
Таким образом, лабораторными признаками внутрисосудистого гемолиза являются гемоглобинемия, гемоглобинурия, гемосидеринурия.
Подробное описание
Выделяют следующие формы гемоглобинурий:
1. Ночная гемоглобинурия Маркиафавы-Микели (пароксизмальная ночная гемоглобинурия) – это форма приобретенной анемии, которая встречается крайне редко. Этот гемолитический симптом характерен постоянным гемолизом эритроцитов, который проявляется приступообразно (пароксизмально), сопровождается тромбозом и приводит к гипоплазии костного мозга. Гемоглобинурия такого типа диагностируется у молодых людей обоих полов в возрасте от 20-ти до 40 лет, реже у пожилых пациентов. Характерной особенностью синдрома является распад эритроцитов именно в ночное время, когда pH крови несколько снижен. Пароксизмы гемолиза могут быть связаны с чрезмерной интенсивной физической нагрузкой, тяжелой инфекцией, неправильным переливанием крови, хирургической операцией. Также одной из причин может стать введение железосодержащих препаратов, в таком случае пароксизмальная гемоглобинурия считается временным, преходящим симптомом.
2. Токсические гемоглобинурии . Вследствие воздействия некоторых химических и биологических ядов, лекарственных веществ обладающих гемолитическим действием.
3. Маршевая гемоглобинурия (редкое заболевание). Маршевая гемоглобинурия всегда диагностируется у практически здоровых, физически крепких людей, подверженных длительным ходовым нагрузкам – у спортсменов, солдат, путешественников. Синдром так и остается не изученным до конца, поскольку не существует вразумительного объяснения, почему именно нагрузка на стопы провоцирует эритроцитовый гемолиз, в то время, как нагрузке подвергаются практически все мышцы тела. По одной из версий интенсивная механическая агрессия на кожу стопы вызывает разрушение эритроцитов именно в капиллярной сетке подошвы ног, затем этот процесс распространяется на всю кроветворную систему. Особого клинического значения эта форма не имеет. Ее надо прежде всего дифференцировать от гематурии, при которой все пробы на гемолиз выпадают отрицательно. Важно поставить точный диагноз и отграничить состояние от более тяжелых заболеваний, так как больной, понятно, в большинстве случаев очень обеспокоен.
4. Холодовая гемоглобинурия: при пароксизмальной холодовой гемоглобинурии, в большинстве случаев после длительного воздействия холода (купание в холодной воде, реже только холодный наружный воздух), наблюдается гемоглобинурия. Часто, но не всегда, как это думали раньше, речь идет о больных сифилисом. Вместе с тем реакция Вассермана у больных сифилисом сразу после приступа может быть отрицательной (вследствие связывания амбоцептора). Поэтому при отрицательном результате реакции Вассермана ее надо через несколько дней повторить.При этой форме чаще анемии не обнаруживаются, так как распад эритроцитов происходит только эпизодически. Картина крови без изменений. Осмотическая резистентность в норме. Диагноз решается пробои Донат — Ландштейнера, которая основана на том, что при холодовой гемоглобинурии имеется гемолизин, амбоцептор которого связывается с эритроцитами только на холоду (в отличие от анемии Маркиафава, при которой амбоцептор связывается с эритроцитами также и в тепле).
5. Гемоглобинурия как результат действия холодовых агглютининов и при других аутоиммунных анемиях появляется только в очень тяжелых случаях. Обычно же указанные формы анемии не ведут к гемоглобинурии.
6. При подозрении на гемоглобинурию далее надо иметь в виду порфирию или миоглобинурию, если при темном цвете мочи, как при гемоглобинурии, бензидиновая реакция отрицательна.
7. Переливание крови несовместимой по антигенной структуре с последующим внутрисосудистым гемолизом – главная причина!
8. Когда эритроциты попадают в мочу по иным причинам и гемолизируются – например дефект забора пробы или гематурия. Обнаружение в моче гемоглобина параллельно с эритроцитами при этих состояниях – явление довольно обычное. Так как эритроциты достаточно быстро разрушаются (выщелачиваются)в моче из-за высокого рН или низкой осмоляльности мочи гемоглобинурия может иметь место.
9. При некоторых видах анемий (пернициозная и гемолитическая анемия) и иногда при беременности.
10. При целом ряде инфекционных заболеваний (главным образом при малярии, в меньшей степени при сепсисе, роже, дифтерии, брюшном тифе, скарлатине и др.); 11. При обширных ожогах кожи
12. При обильных кровоизлияниях (редко)
Референтные значения
Факторы повышения и понижения
| Другие | |
| Ожоги (тяжелые) | Повышение |
| Сепсис | Повышение |
| Интенсивная физическая нагрузка | Повышение |
Источники и литература
Другие сервисы медицинского портала MedElement
Медицинский портал MedElement – это облачные сервисы, мобильные
приложения и электронные справочники для врачей и пациентов.
Наши проекты могут помочь вам!
Источник
Автор Роман Григорьев На чтение 5 мин. Просмотров 2k. Опубликовано 15.04.2020
Гемоглобин в моче у здорового человека не присутствует. Специфика обменных процессов такова, что максимальное его количество в урине – 1-2 ядра в поле зрения. Обнаружив в моче у пациента гемоглобин, медики подозревают тяжёлые обменные нарушения, которые спровоцировали интоксикацию продуктами распада. Для точной постановки диагноза важно правильно сдать анализ и дополнительные обследования.
Механизм и причины попадания гемоглобина в мочу
В норме этот белок в мочу не попадает. Гемоглобин – вещество в красных кровяных тельцах, которое служит для транспортировки кислорода. После разрушения гемоглобина в дело вступают вещества, которые его связывают. Это два белка – гепатоглобин и гемопексин. Они осуществляют транспортировку гемоглобина из разрушенных эритроцитов в печень и селезёнку. Далее происходит повторное использование гемоглобина или его обезвреживание.
В мочу гемоглобин попадает, когда разрушается очень много красных кровяных телец. Такое бывает при:
- питании с повышенным содержанием железа, злоупотреблении витаминными комплексами, содержащими это вещество;
- заболеваниях желудочно-кишечного тракта;
- любых инфекционных болезнях, сопровождающихся лихорадкой – ОРВИ, туберкулёзе, скарлатине;
- интоксикации продуктами распада при ожогах и травмах;
- отравлениях ядами растительной и химической природы, а также укусах насекомых;
- почечных патологиях;
- заболеваниях кровеносной системы.
Гемоглобинурия свидетельствует о патологических изменениях в организме, но для установления самой болезни требуются дополнительные обследования.
Виды гемоглобинурии
Свободный гемоглобин в моче обнаруживается по разным причинам. В зависимости от заболевания, спровоцировавшего гемоглобинурию, различают несколько ее форм. У них разные не только причины, но и симптомы протекания.
Пароксизмальная
Эту форму гемоглобинурии называют ночной. При этой форме нельзя установить, почему гемоглобин в сосудах начинает разрушаться. Исходной причиной разрушения гемоглобина является дефект клеточной мембраны эритроцитов. Этот же дефект встречается у других кровяных клеток – лейкоцитов, тромбоцитов.
Токсическая
Положительный анализ на гемоглобин в моче может сочетаться с маркерами токсических веществ. Это могут быть растительные яды, тяжёлые металлы и лекарственные вещества. В этом случае речь идёт о токсической гемоглобинурии. Гемоглобин в моче перестанет обнаруживаться только после выведения ядов и лечения последствий отравления.
Маршевая
Этот вид гемоглобинурии у мужчин встречается чаще, чем у женщин. Причиной служит высокая нагрузка на ноги, с которой сталкиваются солдаты, путешественники и спортсмены.
Причины этого феномена неизвестны. Ясно только одно: эритроциты разрушаются сначала в сосудах стопы, а потом – в других участках кровеносной системы.
Холодовая
Этот вид гемоглобинурии бывает у взрослых и детей. Провоцирующим фактором является переохлаждение, а также недавно перенесённые вирусные инфекции.
Другие формы
Существуют редкие формы гемоглобинурии, которые возникают при определенных обстоятельствах или наследственных патологиях. К первым относят травматическую гемоглобинурию, которая появляется при длительном сдавливании участков тела во время ЧП. Примером наследственных гемоглобинурий может служить гаффская болезнь, также известная как алиментарно-токсическая миоглобинурия. Ее причиной считают дефект сердечно-сосудистой системы.
Также встречается преходящая гемоглобинурия. Ее провоцирует повышенный уровень гемоглобина, вызванный приёмом железосодержащих препаратов.
Сопутствующие симптомы
Следы гемоглобина в моче являются основным признаком гемоглобинурии. В зависимости от ее формы и степени выраженности у пациента:
- Меняется цвет урины с жёлтого на бурый. Этот симптом возникает при массовой гибели эритроцитов и большом количестве гемоглобина в моче.
- Появляются признаки железодефицитной анемии – слабость, вялость, апатия. Такие симптомы характерны для всех видов гемоглобинурий.
- Может болеть область мочевыводящих путей. Этот признак сопровождает холодовую гемоглобинурию, спровоцированную инфекцией почек.
- Возникают симптомы интоксикации гемоглобином – лихорадка, тошнота, головная боль.
На начальных стадиях гемоглобинурия протекает бессимптомно. При регулярной диспансеризации неполадки в организме можно заметить до появления признаков болезни.
Как диагностируют и как подготовиться к анализам
Самой первой диагностической мерой является анализ крови и мочи. К исследованиям нужно подготовиться:
- Не есть накануне забора биоматериала мясо и другие железосодержащие продукты.
- Перед сбором мочи тщательно подмыться и вытереть насухо половые органы полотенцем. Запрещено использовать какие-либо присыпки, тальк и крема до забора мочи.
- Собрать среднюю порцию утренней мочи, сдать ее в лабораторию не позднее 2 часов после сбора.
Если результат показал гемоглобин в анализе мочи у ребёнка или взрослого, врачи назначают УЗИ почек и мочевого пузыря. Эта мера позволяет определить, вызвано ли появление крови в моче травмой органов малого таза.
При отсутствии болезней мочеполовой системы проводятся дополнительные биохимические исследования крови и мочи.
Нормы количества у взрослых и детей
При отсутствии патологий гемоглобин в моче у ребёнка или взрослого не обнаруживается. Могут присутствовать единичные кровяные клетки, но их не должно быть более 10 в поле зрения. Если фрагментов кровяного белка в моче больше указанного числа, врачи подозревают гемоглобинурию. Точный диагноз ставится на основании лабораторных исследований и сбора анамнеза.
Как избавиться от проблемы
Чтобы снизить количество гемового белка в моче, потребуется остановить распад эритроцитов в сосудах, а также снизить негативные последствия этого процесса. Врачи назначают:
- анаболические стероиды для корректировки гормонального фона;
- железосодержащие препараты, которые препятствуют анемии;
- антикоагулянты, препятствующие разрушению эритроцитов и образованию тромбов.
Если выделение гема в мочу было спровоцировано длительной инфекцией, показан приём антибиотиков. Лекарства подбираются индивидуально в зависимости от того, какими микроорганизмами поражены системы и органы.
До выздоровления назначается специальная диета. Поскольку появление в моче кровяного белка – свидетельство неполадок с почками, рекомендуется отказаться от солёной и жирной пищи, а также ограничить потребление жидкости до физиологической нормы в 1,5-2 л за день. Обязателен отказ от вредных привычек на время лечения.
Чем опасна и как предупредить гемоглобинурию
Наличие в моче гемоглобина – тревожный симптом. Проходя через почки, это вещество травмирует их, а также вызывает интоксикацию других органов и систем. Массовая гибель эритроцитов приводит к снижению транспортировочной функции крови, органы и системы начинают испытывать дефицит питательных веществ.
Риск нарушения обменных процессов в крови снижается, если отказаться от вредных привычек, избегать переохлаждения, не злоупотреблять антибиотиками. Действенная мера профилактики – регулярная диспансеризация. Сдача анализов мочи раз в полгода выявляет неполадки со здоровьем на ранних стадиях.
Источник