Кровь на ифа норма
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
Где можно сдать анализ?
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Узнать больше…
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Как подготовиться?
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).
Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.
Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Это интересно
Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА.
Преимущества метода
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
Недостатки метода
К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Показания к назначению и выявляемые заболевания
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Анализируемый биоматериал и особенности его забора
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
Сроки готовности результатов ИФА
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
Расшифровка иммуноферментного анализа
Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).
Анализируемые показатели
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
Возможные результаты ИФА
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Еще недавно только врачам было известно, как перевести показатели анализов на антитела в общедоступные категории – «заболел», «переболел», «не встречался с инфекцией Sars-CoV-2». Теперь эта задача под силу каждому пациенту, и остается лишь разъяснить, как правильно расшифровать полученные результаты.
2 вида анализов
Тесты на антитела к коронавирусу проводят в двух вариантах – качественном и количественном. Ускоренные экспресс-анализы бывают только качественными, то есть они показывают сам факт наличия глобулинов в крови, без определения их концентрации.
Количественное значение получают посредством иммуноферментной методики исследования, на специальном оборудовании. Такие анализы обозначаются как ИФА.
Быстрые, или ранние антитела
Это иммуноглобулины lgM, которые начинают вырабатываться иммунными клетками почти сразу после попадания инфекции в организм. Они представляют первую линию защиты и активизируются в течение 3-4 дней. В дальнейшем их сменяют поздние, или медленные антитела.
Число lgM достаточно быстро растет и достигает максимума в острой стадии Covid-19, которая приходится чаще всего на 2-3 неделю после заражения. В крови глобулины данного типа сохраняются сравнительно недолго, до месяца или немногим дольше.
Подробнее об антителах lgM читайте здесь.
Внимание!
Обнаруженные lgM у человека свидетельствуют об инфицировании. Если симптомов нет, то болезнь либо протекает в бессимптомной форме, либо ее признаки появятся в ближайшие дни.
Антитела lgA
Антитела lgA также вырабатываются в начале болезни и могут присутствовать в крови до 3-х недель после выздоровления. Это более специфичный признак текущего или недавно перенесенного Covid-19, по сравнению с lgM.
Если есть подозрение на инфекцию, протекающую в данный момент или перенесенную в течение предшествующих 60 дней, целесообразно сдать комплексный анализ на lgA и lgM.
Антитела типа А находятся преимущественно на слизистых дыхательных путей, органов пищеварительной и мочеполовой системы. То есть в местах, где патогенным микробам и вирусам проще всего попасть в организм.
Антитела типа А – это элемент барьерной защиты. Самый широко известный случай их срабатывания представлен обеспечением специфического иммунитета новорожденных, получаемого с материнским молоком
В задачу данного класса антител входит связывание между собой враждебных частиц с целью предотвращения их прикрепления к поверхности слизистых. Доля lgA составляет до 20% от всех имеющихся глобулинов у взрослых.
Медленные, или поздние антитела
Иммуноглобулины lgG синтезируются спустя примерно 2 недели после встречи с вирусом, но остаются в крови намного дольше, чем lgM. Именно они формируют долгосрочный иммунитет и говорят о перенесенном заболевании.
Сколько времени сохраняются антитела в крови, и от чего это зависит, мы написали тут.
Интерпретация результатов
| ПЦР-тест | lgM | lgG | Расшифровка |
| – | – | – | Вирус отсутствует |
| – | + | – | Начальная стадия заражения, возможно бессимптомное течение |
| + | + | – | |
| + | + | + | Острая фаза, пик болезни;стадия выздоровления;прошло 2-3 недели после инфицирования |
| – | + | + | |
| – | – | + | Фаза выздоровления;Перенесенная недавно инфекция, в течение последних 3-х недель |
Тест на антитела lgA целесообразно сдавать, если есть подозрение на бессимптомное течение болезни в настоящий момент или недавно перенесенную инфекцию. В последнем случае со времени выздоровления должно пройти хотя бы 2 недели.
Обнаружение антител типа А может быть признаком как текущего, так и недавно перенесенного заболевания. Для подтверждения текущей инфекции следует сдать мазок на коронавирус.
При сдаче комплексного анализа на антитела lgA и lgG результаты могут быть 2-х видов:
- Выявление только антител А при отсутствии иммуноглобулинов G говорит в пользу того, что человек болеет сейчас.
- Наличие антител обоих типов означает, что инфекция уже покинула организм, и пациент здоров.
Если проводился количественный анализ, то положительным является результат lgA>1.1. Пограничные цифры – lgA=0.8-1.1 – требуют повторного исследования, поскольку, если это ранняя стадия, антитела могли еще не выработаться в достаточном количестве.
В подтверждение заболевания имеются характерные симптомы, и нужно подтвердить диагноз, сдав мазок из носоглотки. При положительном результате уровень антител А поднимется спустя 2 недели.
Внимание!
lgA – это самый ранний показатель, который считается более точным, чем lgM, что объясняется его большей специфичностью.
Антитела – это крупные специфические белки, которые выделяют плазматические клетки иммунитета для борьбы с патогенами, белковыми токсинами и различными чужеродными агентами
Анализ на антитела lgA может давать отрицательный результат, когда коэффициент меньше 0.8. Значит, антител данного типа нет, потому что контакта с вирусом не было, или идет самое начало болезни, и иммунный ответ появится позже. При наличии симптомов коронавируса необходимо сдать ПЦР-тест.
Полуколичественные тесты: референсные значения
- lgM
- lgM=1-2, lgG
- lgM≥2, lgG
- lgM
- lgM≥1, lgM≥10. Результат сомнительный: коронавирус может оставаться в крови или уже покинуть организм. Лучшее решение – повторить тест через неделю.
Внимание!
Расшифровка антител к коронавирусу в соответствии с указанными значениями рекомендована московским Департаментом здравоохранения.
Сколько должно быть антител у людей: нормы
| Антитела, lg | Доля от общего числа глобулинов, % | Концентрация в сыворотке крови, мг/мл | Период жизни, дней | Скорость выработки, мг/кг в день | Функции |
| A | 15 | 3.5 | 6-7 | 24 | Отвечает за местный иммунитет, препятствует распространению инфекционных агентов |
| M | 5-10 | 1.5 | 5 | 6.6 | Первичная иммунная реакция, защита на начальных стадиях заражения |
| G | 80 | 13-14 | 21-24 | 33 | Формирование гуморального иммунитета, нейтрализация патогенов, стимуляция фагоцитоза, |
| D | 0.25 | 0.03 | 3 | 0.4 | Участие в активизации иммунного ответа |
| E | 0.002 | 2 | 0.016 | Защита от паразитов и аллергии |
Какое количество антител считать достаточным
Ответ здесь очень простой – lgG больше референсного значения свидетельствует о перенесенном заболевании и наличии иммунитета к коронавирусной инфекции. Это значение при Sars-CoV-2 составляет 10.0.
На сегодняшний день используется несколько методов тестирования для определения антител в крови – это, в первую очередь, экспресс-исследования и иммуноферментный анализ ИФА. Быстрые тесты можно сравнить с домашними тест-полосками на выявление беременности
Присутствие в крови антител типа G означает, что иммунные клетки распознали вирус, и запущен процесс реагирования. Цифровой параметр показывает, насколько выражен иммунный ответ. Референсные значения получают путем массового тестирования здорового населения.
В подавляющем большинстве российских тест-систем, использующих методику ИФА и ИХЛА – иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа – референсные значения lgG составляют 10.00. Но есть и такие, где они равны 2.5.
Внимание!
При сдаче теста лучше уточнить, каково референтное значение, чтобы не ошибиться в расшифровке.
Таким образом, количество антител считается хорошим, если оно выше или равно референтным показателям.
Интерпретация количественных тестов lgG:
| Содержание, ОЕ/мл | 0-12 | 12-15 | ≥15 |
| Результат | Отрицательно | Сомнительно | Положительно |
| Расшифровка | Антител нет или их уровень ниже определимого. Такой результат может быть у больного человека, когда вирус находится в периоде инкубации, или идет ранняя стадия болезни | Низкий уровень антител, рекомендован повторный анализ через 1-2 недели | Высокая концентрация защитных антител |
Максимальное значение уровня антител типа G – это показатель высокой стойкости иммунитета. Если он больше 15, можно говорить о некоторой защищенности от повторного заражения. Однако связь между данными параметрами достоверно еще не установлена, и как долго продлится эта защита, сказать нельзя.
При lgG больше 100 можно даже стать донором плазмы и отдать свою кровь тяжелобольным ковидным пациентам. В некоторых лабораториях этот порог еще ниже и составляет lgG=40.
Где сдать тест
Провериться на наличие антител можно в частных медицинских лабораториях Гемотест, Диалайн, Инвитро, Хеликс, CMD, Медси и пр. Нужно просто позвонить по многоканальному телефону, указанному на сайте и узнать, где расположен ближайший офис.
Внимание!
Об особенностях исследования крови на антитела в Центре Молекулярной Диагностики CMD мы подробно написали здесь.
В ближайшее время планируется запустить массовое тестирование с помощью тест-систем от Государственного научного вирусологического центра Вектор. Цена анализов – от 600 до 1900 руб.
Массовое тестирование уже запущено в Москве и Санкт-Петербурге, теперь очередь за регионами
При желании можно сделать экспресс-тест по ускоренной методике. Результат будет менее точным, но более быстрым. Его получают через несколько часов или несколько минут, в зависимости от типа прибора.
Если используется пластиковая панель, то в ее окошко капают каплю крови, и рядом высвечивается 1,2 или 3 полоски:
- 1 – антител нет;
- 2 – активная стадия болезни;
- 3 – выздоровление.
Такие экспресс-тесты могут проводиться вне лабораторных условий – на дому, в кабинете врача, в аэропорту и других местах. Более фундаментальные исследования требуют забора крови из вены и анализа иммуноферментным методом ИФА – к образцу добавляются окрашенные антигены, которые при соединении с антителами меняют его цвет.
Для выполнения количественного анализа и установления скорости выработки антител кровь разбавляется физраствором, часть смеси выливают в пробирку с реактивом. Затем осуществляют подбор концентрации с помощью постепенного разведения смеси до тех пор, пока не будет видна реакция.
Советы, как правильно подготовиться к исследованию
Совет №1
За 2-3 часа до сдачи крови исключается прием пищи, но можно пить негазированную воду.
Совет №2
За полчаса до процедуры желательно не курить.
Совет №3
Даже при выявлении антител lgG «расслабляться» не стоит, так как связь между их наличием и формированием стойкого иммунитета к коронавирусу не установлена до конца. Нужно продолжать носить маску и соблюдать общепринятые меры предосторожности.
Совет №4
Нельзя идти сдавать анализ при простуде, так как признаки ОРВИ являются противопоказанием к исследованию.
Совет №5
Иммуноглобулины типа M могут обнаруживаться раньше, чем инфекция размножится в достаточном количестве, чтобы ее выявил ПЦР-тест. А также до того, как появятся антитела lgG. То есть по данному показателю можно поставить предварительный диагноз в периоды, когда диагностика затруднена.
Совет №6
Оценка результатов исследования крови на антитела возможна только с учетом показателей мазка ПЦР.
Совет №7
Если результат пограничный и вызывает сомнения, то анализ рекомендуется пересдать примерно через неделю.
Часто задаваемые вопросы
Может ли не быть антител, если переболел коронавирусом?
Здесь нет и не может быть точного ответа, так как коронавирусная инфекция еще изучена недостаточно, и статистических данных мало, а те, что есть, порой противоречивы и непостоянны.
Алгоритм противостояния вирусам стандартный, основная роль в нем принадлежит антителам
Тем не менее, отсутствие антител после Covid-19 вполне допускается в силу нескольких причин, к которым относятся:
- ошибочный диагноз «коронавирус» изначально. Подобная ситуация не редкость;
- ошибка самого теста на антитела, который просто не сработал;
- низкий иммунный статус пациента, например, при СПИДе: человек справился с инфекцией, но слабый иммунитет не «запомнил» возбудителя и не выработал достаточно антител;
- иммунитет к Covid-19 сформировался, но только на время болезни. После победы над ней синтез защитных глобулинов прекратился за ненадобностью.
Что может повлиять на результат анализа?
Исследование может показать отсутствие lgM при его наличии в период так называемого «серологического окна» – между 5-7 и 10-14 днем при вялотекущем заболевании. При этом тест ПЦР также даст отрицательный ответ, поскольку вирус еще не размножился до выявляемого уровня.
Бывает и наоборот, когда анализы показывают присутствие lgM, а на самом деле в крови Ковида нет. Такой результат возможен у пациентов, страдающих системной красной волчанкой, тиреоидитом и другими аутоиммунными патологиями, а также ВИЧ-инфекцией.