Норма анализа крови на анф
[13-045]
Антинуклеарный фактор на HEp-2 клетках, IgG
1100 руб.
Метод исследования с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2, который позволяет обнаружить антинуклеарные антитела – один из маркеров системных заболеваний соединительной ткани.
Синонимы русские
АНФ, антиядерные антитела, антинуклеарные антитела (АНА).
Синонимы английские
Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Fluorescent AntiNuclear Antibody detection (FANA).
Метод исследования
Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Определение антинуклеарного фактора (АНФ) является “золотым стандартом” выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний.
Патогенез системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) тесно связан с нарушениями в иммунной системе и повышенной выработкой антител к структурам собственных клеток. Аутоантитела к компонентам ядра клеток – антинуклеарные антитела – взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и белками ядра, антигенами цитоплазмы, что проявляется воспалительными изменениями в тканях и органах, болями в суставах и мышцах, выраженным утомлением, потерей веса, кожными изменениями. АНА обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). АНА встречаются более чем у 90 % больных системными заболеваниями соединительной ткани, в настоящее время описано около 200 разновидностей, которые объединены единым названием – антинуклеарный фактор.
При определении АНФ методом непрямой флюоресценции чаще используется перевиваемая линия эпителиальных клеток аденокарциномы гортани человека НЕр-2. Клетки НЕр-2 являются очень удобным субстратом для лабораторного исследования, так как обладают крупными ядрами и на стеклах растут в один слой. АНА выявляются при связывании с внутриклеточными антигенами клеток НЕр-2.
При исследовании эпителиальные клетки НЕр-2 выращивают на стеклах, фиксируют и инкубируют с разведенной сывороткой крови пациента. После удаления избытка сыворотки клетки инкубируют с меченными флюоресцеином антителами, затем снова промывают и исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа. При этом определяется титр антител и тип свечения. Диагностически значимым считается титр более 1:160. При обострении ревматических заболеваний он превышает 1:640, а в период ремиссии снижается до 1:160-1:320. Чем больше антител, тем выше титр. По типу свечения можно установить мишени антинуклеарных антител, что имеет важное клиническое значение и определяет тактику дальнейшего обследования пациента. Основными являются периферический, гранулярный (мелко-/крупно-), ядрышковый, центромерный и цитоплазматический типы окрашивания ядра. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.
Гомогенное (диффузное) окрашивание связано с наличием антител к двуспиральной ДНК, гистонам и характерно для СКВ и лекарственной волчанки.
Периферическое свечение обусловлено периферическим распределением хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ. Данный тип свечения важно дифференцировать от окрашивания ядерной мембраны, которое происходит при аутоиммунных заболеваниях печени.
Гранулярное (крапчатое, сетчатое) окрашивание встречается наиболее часто и является наименее специфичным, выявляется при многих аутоиммунных заболеваниях. Аутоантигенами в данном случае выступают нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B антигены и PCNA).
Очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения часто указывают на смешанное заболевание соединительной ткани.
Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка (PHК-полимераза-1, NOR, U3RNP, PM/Scl), выявляется при склеродермии, болезни Шегрена. АНА иногда повышаются при эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 1-го типа, тиреоидите, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), кожных заболеваниях (псориазе, пузырчатке), при беременности, после трансплантации органов и тканей, у больных на гемодиализе.
Центромерное свечение появляется при наличии антител к центромерам хромосом и характерно для формы склеродермии – CREST-синдрома.
Цитоплазматический тип свечения связан с антителами к тРНК-синтетазе, в частности к Jo-1, что характерно для дерматомиозита и полимиозита. Данный тип окрашивания также определяется при наличии антител к другим компонентам цитоплазмы при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе.
Одновременное выявление различных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.
У здоровых людей может быть обнаружено мелкогранулярное свечение при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме крупнозернистые или гомогенные типы свечения не должны определяться.
В зависимости от результатов оценки типа свечения разрабатывается дальнейшая тактика лечения пациента и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики системных заболеваний соединительной ткани.
- Для дифференциальной диагностики ревматических болезней.
- Чтобы оценить эффективность терапии аутоиммунных заболеваний.
- Для наблюдения за течением системных заболеваний соединительной ткани.
Когда назначается исследование?
- При симптомах аутоиммунного заболевания (длительное повышение температуры, боли в суставах, усталость, потеря массы тела, изменение кожных покровов).
- При выявлении изменений, характерных для системных заболеваний соединительной ткани (повышение СОЭ, уровня С-реактивного белка, циркулирующих иммунных комплексов).
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательный.
Титр:
Причины повышения титра АНФ на HEp-2 клетках:
- cистемная красная волчанка (в 95 % случаев),
- дерматомиозит/полимиозит,
- системная склеродермия (в 60-90 % случаев),
- синдром Шегрена (в 40-70 % случаев)
- смешанное заболевание соединительной ткани (синдром Шарпа),
- синдром Рейно,
- дискоидная волчанка,
- лекарственная волчанка,
- ревматоидный артрит,
- некротизирующий васкулит,
- инфекционный мононуклеоз,
- лейкемия,
- злокачественные новообразования (преимущественно лимфома),
- тяжелая миастения,
- инфекционный эндокардит,
- хронический аутоиммунный гепатит,
- первичный билиарный цирроз печени,
- туберкулез,
- пневмокониоз,
- интерстициальный фиброз легких.
Типы свечения
Тип свечения | Для чего он характерен |
Гомогенный | Для СКВ, лекарственной волчанки, системной склеродермии, хронического активного гепатита |
Периферический | Для СКВ |
Гранулярный | Для СКВ, синдрома Шегрена, смешанной болезни соединительной ткани, ревматоидного артрита |
Ядрышковый | Для полимиозита/дерматомиозита, склеродермии, синдрома Шегрена, СКВ |
Центромерный | Для CREST-синдрома (кальциноза кожи, синдрома Рейно, эзофагеальной дисфункции, склеродактилии, телеангиоэктазии) |
Цитоплазматический | Для дерматомиозита/полимиозита, аутоиммунного заболевания печени, первичного билиарного цирроза |
Что может влиять на результат?
- Ложноположительному результату способствует:
- возраст старше 60-65 лет (в 10-37 % случаев);
- применение лекарственных препаратов, которые могут привести к лекарственной волчанке (ацетазоламид, карбидопа, хлоротиазид, хлорпромазин, клофибрат, этосуксимид, соли золота, гризеофульвин, гидралазин, изониазид, соли лития, метилдопа, пероральные контрацептивы, пенициллин, фенилбутазон, фенитоин, примидон, прокаинамид, пропилурацил, хинидин, резерпин, стрептомицин, сульфаниламид, тетрациклин, тиазидные диуретики).
- Прием глюкокортикостероидов (преднизолон, дексаметазон, метипред) иногда приводит к ложноотрицательному результату.
Важные замечания
- В 5 % случаев СКВ возможен отрицательный результат данного анализа (АНФ-отрицательная СКВ). В таких ситуациях для уточнения диагноза необходимо определить антитела к SS-антигенам (Ro).
- Положительный результат теста не является абсолютным доказательством наличия аутоиммунного заболевания. У здоровых людей в 3-13 % случаев титр АНФ повышен и достигает 1:320.
- Результаты теста необходимо оценивать в комплексе с клиническими данными и другими лабораторными показателями.
- При положительном результате исследования рекомендовано определить специфичность АНА иммуноблотом.
Также рекомендуется
- Антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA), скрининг
- Антитела к ядерным антигенам (ANA), скрининг
- Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)
- Антитела к кардиолипину, IgG и IgM
- Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
- Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
- Антистрептолизин О
- С-реактивный белок, количественно
- Ревматоидный фактор
- Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК)
- С3 компонент комплемента
- С4 компонент комплемента
Кто назначает исследование?
Ревматолог, иммунолог.
Литература
- Wilson D. McGraw-Hill Manual of Laboratory and Diagnostic Tests 1st Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 pp.
- Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Pattern on the antinuclear antibody-HEp-2 test is a critical parameter for discriminating antinuclear antibody-positive healthy individuals and patients with autoimmune rheumatic diseases. Arthritis Rheum. 2011 Jan;63(1):191-200.
- Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Antinuclear antibodies and their detection methods in diagnosis of connective tissue diseases: a journey revisited. Diagn Pathol. 2009 Jan 2;4:1. PMID: 19121207 [PubMed].
Существует ряд заболеваний, при которых защитная система принимает клетки собственного организма за чужеродные, после чего начинает ошибочно их атаковать. Большинство аутоиммунных патологий имеют хроническую форму и представляют серьезную угрозу для здоровья. Для того чтобы выявить данные недуги на самой ранней стадии их развития, врачи назначают анализ АНФ. Данная аббревиатура расшифровывается как «антинуклеарный фактор». В некоторых заключениях исследование помечается как АНА. Значение расшифровывается как «анализ на антинуклеарные антитела». АНФ – это клинически значимый показатель, помогающий врачу составить максимально эффективную схему лечения и не допустить развития осложнений.
Суть метода
Биологическим материалом для исследования является кровь. При проникновении в организм любого патогенного микроорганизма иммунная система начинает вырабатывать специфические антитела, задачей которых является уничтожение чужеродных антигенов. Суть метода и заключается в обнаружении и количественном определении этих веществ в жидкой соединительной ткани.
Врачи утверждают, что АНФ-анализ крови – это лабораторный вид исследования, имеющий высокую степень информативности. С его помощью возможно выявить любые аутоиммунные патологии даже на ранней стадии их развития.
Специфические антитела также нередко выявляются у людей, страдающих от тяжелой формы гепатита, онкологии и некоторых инфекционных заболеваний. Данные вещества могут быть обнаружены и у здоровых людей. Подобная ситуация требует комплексного подхода для выявления причины.
АНФ-анализ иногда подразумевает оценку количественного содержания иммуноглобулинов. Их наличие может свидетельствовать о развитии коллагенозов и заболеваний ревматического характера.
Показания
Важно знать, что АНФ-анализ крови – это исследование, которое назначается с целью подтверждения или исключения наличия аутоиммунных патологий, а также для оценки эффективности проведенного лечения.
Заподозрить недуг врач может по следующим симптомам:
- Длительно сохраняющееся состояние лихорадки без явных причин.
- Болезненные ощущения в суставах.
- Повышенная степень утомляемости.
- Ломота в мышцах и суставах.
- Кожные проявления без явных причин.
- Частые эпизоды мышечных судорог.
- Повышенная температура тела.
- Уменьшение массы тела.
- Регулярные эпизоды тошноты.
- Головная боль.
- Нарушение слуха.
- Диарея.
Кроме того, АНФ-анализ назначается при подозрении на наличие ревматического заболевания. Исследование проводится после получения результатов лабораторной диагностики, в которых увеличены показатели СОЭ, ЦИК и С-реактивного белка.
Что показывает
АНФ-анализ крови позволяет выявить патологии аутоиммунного характера. Исследование информативно в отношении следующих заболеваний:
- Системной красной волчанки.
- Острого рассеянного энцефаломиелита.
- Болезни Шегрена.
- Ревматоидного артрита.
- Очаговой алопеции.
- Болезни Аддисона.
- Анкилозирующего спондилита.
- Антифосфолипидного синдрома.
- Аутоиммунной гемолитической анемии.
- Буллезного пемфигоида.
- Аутоиммунного гепатита.
- Глютеновой болезни.
- Аутоиммунных патологий внутреннего уха.
- Болезни Чагаса.
- Синдрома Черджа-Стросса.
- Хронической обструктивной болезни легких.
- Дерматомиозита.
- Болезни Крона.
- Сахарного диабета I типа.
- Синдрома Гудпасчера.
- Тиреоидита Хашимото.
- Базедовой болезни.
- Синдрома Гийена-Барре.
- Болезни Кавасаки.
- Гнойного гидраденита.
- Первичной нефропатии.
- Идиопатической тромбоцитопенической пурпуры.
- Интерстициального цистита.
- Эритематозной волчанки.
- Синдрома Шарпа.
- Кольцевидной склеродермии.
- Рассеянного склероза.
- Нарколепсии.
- Нейромиотонии.
- Обыкновенной пузырчатки.
- Псориаза.
- Феномена Рейно.
- Васкулита.
- Гранулематоза Вегенера.
Это неполный список заболеваний. Важно, что анализ АНФ показывает развитие аутоиммунных патологий на самой ранней стадии их течения. Это позволяет врачу определиться с тактикой лечения, а в дальнейшем оценить его эффективность.
Подготовка
Забор биоматериала осуществляется в утренние часы. Сдавать кровь необходимо натощак. Последний прием пищи должен быть совершен минимум за 4 часа. При этом пить воду допустимо в любое время и в любых количествах. Под запретом употребление алкоголя.
За 1 день до исследования показан покой. Физические и психоэмоциональные нагрузки нередко приводят к ложному результату. За полчаса до сдачи крови запрещено курить.
Необходимо поставить в известность врача о принимаемых медикаментах во время назначения им анализа АНФ. Это обусловлено тем, что активные компоненты некоторых препаратов провоцируют выработку антител и также могут стать причиной лекарственной волчанки. Ложноотрицательные результаты нередко являются следствием приема глюкокортикостероидов.
Если пациенту были назначены физиопроцедуры или инструментальные обследования, их необходимо проводить только после сдачи крови.
Забор биоматериала
Он осуществляется в утренние часы. Биологическим материалом является венозная кровь. Ее забор проводится согласно стандартному алгоритму. Как правило, кровь берется из вены, расположенной на локтевом сгибе.
После того как жидкая соединительная ткань будет получена, из нее выделят сыворотку. Именно она необходима для проведения анализа.
Виды исследований и их описание
В настоящее время обнаружить антитела в биоматериале возможно несколькими способами:
- С помощью непрямой иммунофлуоресцентной микроскопии. Если специфические вещества присутствуют в крови, они начнут связываться с особыми ядерными антигенами. В лабораториях используются элементы, которые способны светиться в отдельном спектре. Затем биоматериал тщательно изучается под микроскопом. Заболевание можно заподозрить по типу свечения. Данный способ признан самым информативным в отношении определения значения антинуклеарных антител. Одной из разновидности методики является исследование с использованием клеток НЕр. Анализ АНФ в этом случае подразумевает забор биоматериала и с гортани. Процесс не сопряжен с возникновением болезненных и иных дискомфортных ощущений. Важно знать, что анализ крови АНФ НЕр-2 – это в настоящее время самое точное исследование. Эпителиальные клетки с гортани инкубируют с сывороткой, после чего их также соединяют с флуоресцентными веществами.
- С помощью иммуноферментного анализа. Его суть заключается в том, что когда происходит взаимосвязь антител и антигенов, цвет раствора меняется. Наличие того или иного оттенка позволяет заподозрить наличие определенной патологии.
Расшифровкой АНФ-анализа должен заниматься лечащий врач. При наличии положительных результатов исследований назначаются дополнительные тесты. Окончательный диагноз не ставится на основании заключения одного анализа.
Нормальные значения
Наилучшим результатом является тот, при котором антинуклеарные антитела отсутствуют. Однако стоит помнить о том, что они могут обнаружиться и у совершенно здоровых людей. В этом случае показано проведение повторного исследования.
Норма анализа АНФ – титр не более 1:160. При этом данный показатель актуален как для взрослых, так и для детей.
Во время расшифровки АНФ-анализа крови важно учитывать следующую информацию:
- Низкие титры не являются гарантией того, что патологии аутоиммунного характера нет. Согласно статистике, у 5% пациентов с системной красной волчанкой результаты исследования отрицательные.
- Если у человека налицо все симптомы аутоиммунного заболевания, а анализ при этом свидетельствует об обратном, врач не исключает наличие недуга. В подобных ситуациях дополнительно проводится иммуноферментное исследование.
Анализ АНФ, осуществленный с помощью клеток НЕр-2, считается нормальным, если титр не выше 1:160. Результат более 1:640 свидетельствует об обострении ревматических патологий. В период ремиссии заболевания титр снижается до 1:320. При этом только врач сможет выявить тот факт, о чем говорит такой низкий показатель, основываясь на данных анамнеза и индивидуальных особенностях здоровья пациента.
АНФ повышен
Антинуклеарные антитела, связываясь с антигенами, образуют иммунный комплекс. Последний, в свою очередь, является пусковым фактором развития воспалительного процесса в стенках сосудов. В результате у человека появляются первые тревожные симптомы системных заболеваний. Анализ же показывает высокие титры.
В этом случае патологию можно выявить, определив тип свечения. Интерпретация результатов:
- Гомогенное. Подобное свечение может свидетельствовать о наличии системной красной волчанки, хроническом гепатите и склеродермии.
- Периферическое. Всегда говорит о развитии системной красной волчанки.
- Гранулярное. Возможные заболевания: синдром Шегрена, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, смешанная патология соединительной ткани.
- Ядрышковое. Данный тип свечения характерен для системной красной волчанки, полимиозита, синдрома Шегрена и склеродермии.
- Центромерное. Возможные патологии: кальциноз кожи, эзофагеальная дисфункция, синдром Рейно, телеангиэктазия, склеродактилия.
- Цитоплазматическое. Подобное свечение говорит об аутоиммунных заболеваниях печени или о полимиозите.
АНФ понижен
Уменьшение уровня антинуклеарных антител имеет клинически важное значение исключительно при прогнозировании и мониторинге имеющихся и ранее выявленных системных заболеваний.
Показатель АНФ напрямую зависит от интенсивности патологического процесса. В связи с этим его уменьшение – это благоприятный признак, свидетельствующий о том, что лечение было проведено успешно, а болезнь перешла в стадию ремиссии.
Лечение
Каждая патология аутоиммунного характера требует определенного терапевтического подхода. Цель проведения исследования крови на АНФ – выявить в жидкой соединительной ткани антитела и оценить характер их взаимодействия со специфическими антигенами. На основании результатов диагностики врач может предварительно поставить диагноз. Для его подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований. И только после этого врачом составляется схема лечения. Выбор медикаментозных средств напрямую зависит от того, какая патология выявлена у человека.
Стоимость
Сдать анализ АНФ можно в независимой лаборатории, частной клинике или государственном медицинском учреждении. Важно знать о том, что не во всех бюджетных поликлиниках подобная услуга предоставляется. Относительно ее наличия необходимо уточнять в регистратуре.
Исследование является платным даже в государственных медицинских учреждениях. Стоимость анализа напрямую зависит от ценовой политики клиники, складывающейся из множества факторов. Минимальная цена составляет 1000 рублей, максимальная не превышает 1700 рублей. Кроме того, необходимо дополнительно оплатить забор крови. Стоимость данной услуги, как правило, не превышает 200 рублей.
В заключение
Аббревиатура АНФ расшифровывается как антинуклеарный фактор. В норме он не должен присутствовать в крови здорового человека или же его концентрация должна быть менее 1:160. Анализ на АНФ назначается для того, чтобы выявить у пациента патологии аутоиммунного характера на самой ранней стадии их развития.
Суть метода: при проникновении в организм провоцирующих агентов защитной системой начинают вырабатываться антитела. Их задача – атаковать антигены и уничтожить их. Для выявления данной реакции у пациента осуществляется забор венозной крови с последующим отделением сыворотки. В последнюю добавляют специфические антигены и оценивают дальнейшие реакции.