Норма биохимии крови крыс
- Авторы
- Резюме
- Файлы
- Ключевые слова
- Литература
Ажикова А.К.
1
Журавлева Г.Ф.
2
1 ГБОУ ВПО «Астраханский Государственный медицинский университет»
2 ФГОУ ВПО «Астраханский государственный университет»
Впервые изучено влияние лекарственных форм различной консистенции на количественные изменения периферической крови крыс в условиях искусственной ожоговой травмы. Любой патологический процесс может отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови в условиях гипертермии и выявления закономерностей изменений различных показателей. Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения. Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов. Полученные данные расширяют и углубляют представления о характере интоксикации организма в условиях стрессового воздействия различных факторов.
показатели периферической крови
кроветворные органы
ожоговые поражения кожи
термическое воздействие
гипертермия
1. Ажикова А. К. Использование пуповинной крови для восстановления кожи после термической травмы / А. К. Ажикова, М. В. Лазько // Естественные науки: Журнал фундаментальных и прикладных исследований. – 2008. – №.4. – С. 53-57.
2. Грушко М. П. Состояние периферической крови у карповых рыб в нерестовый период / М. П. Грушко, Н. Н. Федорова // Актуальные проблемы современной науки. – Технические науки: Труды 2-го Международного форума. – Самара, 2006. – С.23-25.
3. Земков Г. В. Характер и степень патологических изменений в крови и внутренних органах судака / Г. В. Земков, Г. Ф. Журавлева // Материалы VIII конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. – Петрозаводск, 1992. – С. 40.
4. Лазько А. Е. Состояние мембран эритроцитов при воздействии серосодержащего газа / А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров, А. А. Резаев // Актуальные вопросы медицинской фармакологии. – 1993. – С.41-47.
5. Мамонтова Е. В. Влияние ALPHA-токоферола на степень перекисного гемолиза белых мышей в норме и при иммобилизационном стрессе / Е. В. Мамонтова // Современные проблемы науки и образования. – 2006. – № 3. – С. 27-28.
6. Островский В. К. Показатели крови и лейкоцитарного индекса интоксикации в оценке тяжести и определении прогноза при воспалительных, гнойных и гнойно-деструктивных заболеваниях / В. К. Островский, А. В. Мащенко, Д. В. Янголенко, С. В. Макаров // Клин. лаб. диагностика. – 2006. – № 6. – С. 50-53.
7. Покровский А. А. Методика определения перекисного гемолиза эритроцитов / А. А. Покровский, А. А. Абразцов // Вопросы питания. – М.: Наука, 1964. – № 6. – С.44.
8. Рожкова И. С. Влияние хронической интоксикации на свободнорадикальные процессы плазмы крови крыс / И. С. Рожкова, Д. Л. Теплый, Б. В. Фельдман // Научный руководитель. – 2015. – № 3(10). – С. 1-7.
9. Теплый Д. Л. Особенности морфологической картины сыворотки крови мышей разных возрастных групп при экспериментальном стрессе / Д. Л. Теплый, Н. А. Аюпова // Естественные науки: Журнал фундаментальных и прикладных исследований. – 2005. – №.10. – С. 47-50.
10. Ясенявская А. Л. Влияние антиоксидантов на уровень перекисного гемолиза эритроцитов старых крыс в норме и при иммобилизационном стрессе / А. Л. Ясенявская, Н. В. Кобзева // Современные наукоемкие технологии. – 2006. – № 2. – С. 69-70.
В медицинской биотехнологии постановка экспериментов при помощи моделирования патологических состояний, например ожогового повреждения кожи, имеет огромное значение для глубокого исследования крови и кроветворных органов [3]. Исходя из этого, необходимо тщательное и всестороннее изучение всех изменений, которые происходят в организме при этих воздействиях. Главным образом это относится к системам поддержания гомеостаза [2].
Ожоговые поражения кожи стали в современном мире одним из наиболее социально значимых и распространенных типов травматических повреждений у человека. Изучению вопроса реакции клеток крови на ожоги посвящен ряд исследований [1, 8].
Любое заболевание, патологический процесс, а также ряд физиологических сдвигов могут в той или иной степени отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови [5]. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на альтерирующие воздействия.
Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения [1].
Свой вклад в общее состояние системы организма вносят компоненты крови. Наиболее уязвимым объектом для действия продуктов свободнорадикального окисления липидов является стенка кровеносных сосудов, что обусловлено высоким уровнем кислорода в крови и низким уровнем его утилизации [9]. В условиях патологического процесса происходит поражение неклеточного компонента сосудистой стенки.
Цель исследования – изучение показателей периферической крови половозрелых крыс в норме и в условиях термического воздействия.
Материалы и методы. Объектом исследования явились 50 беспородных крыс-самцов 4-месячного возраста. Во время эксперимента регистрировали общее состояние и поведение животных. Самцы крыс были разделены на пять групп по типу воздействия:
I группа – животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию (контрольная, 10 шт.);
II группа – животные, получившие ожоговое воздействие и не подвергшиеся терапии (10 шт.). Раны регенерировали естественным путем;
III группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии спреем «Д-Пантенол» (10 шт.);
IV группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии бальзамом мазевой формы «Спасатель» (10 шт.);
V группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии аппликациями настойки календулы (10 шт.).
Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов.
Уровень гемоглобина в образцах крови крыс определяли электрофотометрическим способом на гемоглобинометре APEL Hemoglobinmeter HG-202. Мазки фиксировали и окрашивали по Романовскому – Гимзе. Идентификация форменных элементов крови проводилась согласно методике Н. Т. Ивановой [4]. Количество эритроцитов крови подсчитывали по стандартной методике в камере Горяева. Количество лейкоцитов считали по мазкам крови крыс.
Для оценки уровня свободнорадикального окисления и выраженности в связи с этим липолитических процессов в крови проводили измерение перекисной резистентности эритроцитов. Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про– и антиоксидантный баланс организма [6].
Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А. А. Покровского и А. А. Абразцова [7], которую предложили А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров и А. А. Резаев [4].
Результаты исследования и их обсуждение. Анализ гематологических исследований экспериментальных животных показал, что наиболее высокий уровень гемоглобина периферической крови наблюдался у крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол», что наглядно отображено в таблице 1. В группе крыс, лечившихся настойкой календулы, данный показатель незначительно отличался от значений у обожженных животных, не получавших лечения.
Таблица 1
Гематологические показатели через 3 суток после ожоговой травмы
Тип воздействия | Эритроциты (шт./мкл.) | Гемоглобин (г/л) |
1 -Контроль | 7,8х106 | 27,7 |
2-Ожог | 6,5 х106* | 25,6* |
3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол» | 8,2х106 * | 29,2 * |
4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель» | 8,3х106* | 28,3* |
5-Ожог+аппликации настойкой календулы | 6,8х106* | 25,7* |
Примечание: * – Р<0,05 по сравнению с контролем.
Изменение уровня гемоглобина в результате опыта отмечено в таблице 1. Высокий уровень гемоглобина наблюдался у крыс, лечившихся Д-пантенолом. Средний показатель уровня гемоглобина отмечен у крыс, леченных бальзамом «Спасатель». В экспериментальной группе с настойкой календулы он незначительно и статистически недостоверно отличался от значений у животных 3 группы.
Выявлено, что термический ожог кожи вызвал уменьшение количества эритроцитов периферической крови крыс. Установлено, что при лечении ожогов этот показатель несколько увеличивался, например, при терапии бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол».
Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про- и антиоксидантный баланс организма [10].
По данным табл. 2 показано, что не леченный термический ожог межлопаточной области спины крыс способствует наиболее полному перекисному гемолизу эритроцитов крови крыс (степень гемолиза, в среднем, 7 %, p<0,001). Лечение ожогов кожи бальзамом «Спасатель» вызывает средний гемолиз (степень гемолиза в среднем 3,94 %, р<0,05), при терапии ожоговых травм межлопаточной области спины крыс спреем Д-пантенолом наблюдался частичный гемолиз (степень гемолиза в среднем и 3,62 %, Р<0,05).
Таблица 2
Перекисная резистентность эритроцитов самцов крыс (% гемолизированных эритроцитов)
Группа | Количество животных | М+m |
1 -Контроль | 10 | 3,82+0,121* |
2 -Ожог | 10 | 6,83+0,469 *** ### |
3 -Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол» | 10 | 3,62+0,174*** ### |
4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель» | 10 | 3,94+0,081* |
5-Ожог+аппликации настойкой календулы | 10 | 4,94+0,081* |
Примечание: в сравнении с контрольными животными: *р<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; в сравнении с группой 2-Ожог: #р<0,05; ##p<0,01; ###p<0,001.
Анализ данных по определению перекисного гемолиза эритроцитов самцов белых крыс показал, что устойчивость эритроцитов к перекисной провокации значительно повышалась в условиях лечения ожогов кожи крыс аппликациями бальзамом «Спасатель». Воздействие аппликациями мазью «Д-пантенол» привели к повышению устойчивости эритроцитов к перекисной провокации и приблизили показатели перекисного гемолиза эритроцитов к контролю. Термический ожог без лечения резко снизил устойчивость эритроцитов к перекисной провокации. Аппликации настойкой календулы незначительно повысил устойчивость эритроцитов к гемолизу (см. табл. 2).
Установлено, что термические ожоги существенно влияют и на общее число лейкоцитов, что проявлялось выраженной лейкопенией во все сроки наблюдения. В табл. 3 представлена некоторая волнообразность лейкопении. Так, на 3-и сутки количество лейкоцитов составляло 1,8±1,4 × 109, на 7-е – 2,5±1,4 × 109, на 14-е – 0,85±1,4 × 109, на 30-е – 2,4±1,4 × 109. Учитывая, что в контрольной серии уровень лейкоцитов составлял 10,2±1,4 × 109, что соответствует и литературным данным [9], отмечено значительное снижение числа защитных клеток крови.
Таблица 3
Содержание лейкоцитов в периферической крови крыс
Экспериментальные группы | Количество животных, n | Количество лейкоцитов × 109 на 3 сутки эксперимента | Количество лейкоцитов × 109 на 7 сутки эксперимента | Количество лейкоцитов × 109 на 10 сутки эксперимента |
1-Контроль | 10 | 3,4 ± 0,1 | 3,2 ± 0,1 | 3,0 ± 0,1 |
2-Ожог | 10 | 3,8 ± 0,2 * | 3,3 ± 0,3 * | 2,9 ± 0,2 * |
3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол» | 10 | 3,2 ± 0,3 * | 3,1 ± 0,3 * | 2,9 ± 0,3 * |
4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель» | 10 | 3,1 ± 0,3* | 3,1 ± 0,3* | 3,2 ± 0,4* |
5-Ожог+аппликации настойкой календулы | 10 | 2,8 ± 0,2 * | 3,1 ± 0,3 * | 2,9 ± 0,2 * |
Примечание: * – p<0,05 – достоверность различий между группами животных по сравнению с контролем.
Наблюдалось изменение общего количества лейкоцитов после термического воздействия между экспериментальными группами и контролем (см. табл. 3). В ходе экспериментов было выявлено, что у животных, получавших терапию Д-пантенолом, происходило незначительное уменьшение общего количества лейкоцитов в сравнении с контролем. У животных, получавших лечение настойкой календулы, количество лейкоцитов достоверно уменьшилось в сравнении с контрольной группой на 22 % (р<0,05).
Изучение лейкоцитарной формулы дало не менее интересные результаты. В табл. 4 отражены результаты исследования влияния ожоговой травмы на показатели лейкоцитарной формулы периферической крови подопытных крыс. В контрольной серии в формуле преобладали лимфоциты до 55–60 %, нейтрофилы составляли 40 %. При исследовании получено, что термический ожог приводил к достоверному и выраженному увеличению процентного числа лимфоцитов и нейтрофилов. Так, на 3-и сутки лимфоциты составляли 67,4 %.
Таблица 4
Изменение показателей лейкоцитарной формулы на 3-и сутки эксперимента
Экспериментальные группы | Нейтрофилы, M±m, % | Лимфоциты, M±m, % | Эозинофилы M±m, % | Моноциты M±m, % |
1-Контроль | 40,1±3,52 | 55,6±3,18 | 2,1±0,71 | 6,2±2,00 |
2-Ожог | 27,1± 2,97* | 67,4±2,61* | 3,1± 0,80* | 2,4± 0,34* |
3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол» | 37,2± 2,91# | 60,2±2,94# | 2,7± 0,49# | 5,9± 0,61# |
4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель» | 41,0± 2,99# | 58,6±5,22 # | 2,9± 0,31# | 6,4± 2,32# |
5-Ожог+аппликации настойкой календулы | 41,0± 2,99 # | 64,6±5,22 # | 2,7± 0,31# | 2,9± 2,32# |
Примечание: р<0,05, * – в сравнении с контролем,
# – в сравнении с группой получивших ожог без лечения.
Данные эксперимента моделирования термического ожога межлопаточной области спины белых крыс свидетельствовали о достоверном колебании количества нейтрофилов у животных, получавших лечение аппликациями спрея, в сравнении с контрольной группой и группой, не получавших лечение (рис. 1).
Рис. 1. Количество нейтрофилов (M±m, %) в разных опытных группах
Отмечено, что показатели количества нейтрофилов, по сравнению с контролем, чуть ниже в группе, лечившихся спреем «Д-пантенол», и незначительно выше в группе, лечившихся бальзамом «Спасатель». На рис. 2 видно, что отсутствие терапии ожога у 2 группы крыс отразилось на большем количественном содержании лимфоцитов крови.
Рис. 2. Количество лимфоцитов (M±m, %) в разных опытных группах
У группы крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель», количество лимфоцитов увеличилось. При сравнении крыс, лечившихся спреем «Д-пантенол», с контрольной группой наблюдалось снижение количества лимфоцитов, а у крыс, лечившихся настойкой календулы, количество лимфоцитов практически не отличалось от 2 группы.
При ожоге наблюдалось изменение показателей эозинофилов: увеличение этого показателя в группе 2 (ожог без терапии), в сравнении с группами крыс, получавших лечение (р<0,05). У животных, лечившихся спреем, количество эозинофилов повысилось на 22 %, по сравнению с контролем, при терапии настойкой календулы оно понизилось, что не достоверно (рис. 3).
Рис. 3. Количество эозинофилов (M±m, %) в разных опытных группах
Как видно из круговой диаграммы на рис. 4, термическое воздействие без лечения приводило к снижению количества моноцитов, терапия аппликациями бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол» стимулировало незначительное увеличение количества моноцитов в крови, по сравнению с контрольной группой подопытных животных (рис. 4).
Рис. 4. Количество моноцитов (M±m, %) в разных опытных группах
Заключение
Исследование таких гематологических показателей, как количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина и состояние перекисной резистентности эритроцитов, свидетельствует о значительном поражении системы крови под воздействием местного воздействия термического фактора. Наиболее результативными оказались эксперименты терапии ожогов крыс аппликациями спрея «Д-пантенол» и бальзама «Спасатель».
Таким образом, применение в эксперименте лекарственных средств для лечения ожогов (спрей Д-пантенол, бальзам «Спасатель») способствует существенному ингибированию свободнорадикального окисления, к повышению прочности клеточных мембран компонентов крови.
Библиографическая ссылка
Ажикова А.К., Журавлева Г.Ф. ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРЫС В НОРМЕ И В УСЛОВИЯХ ТЕРМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 2.;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=24350 (дата обращения: 08.09.2020).
Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)
Л.Д. Полякова, М.С. Чокинэ
ВЛИЯНИЕ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ НА НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ КРЫС С РАЗЛИЧНЫМИ РАЦИОНАМИ ПИТАНИЯ
Институт физиологии и санокреатологии г. Кишинев, Молдова
  In the article data are presented about influence of rations with different maintenance of nutrients in combination with physical activity on some biochemical indexes of rats. It is discovered that rations with different maintenance of nutrients in combination with physical activity did not educe deviations from a norm, all studied indexes were within the limits of physiological vibrations characteristic for this type of animals.
  В литературе известны неблагоприятные последствия влияния на здоровье человека недостатка или избытка отдельных питательных веществ в рационе [3]. Что касается недостатка или избытка тех или иных компонентов в рационе в зависимости от физических нагрузок, известно мало [1, 2]. Согласно санокреатологической теории [5] только те системы питания, которые учитывают физиологические, метаболические и саногенные потребности организма будут успешными.
  Цель исследования – определение влияния физической нагрузки на некоторые биохимические показатели сыворотки крови крыс с различными рационами кормления.
  Материал и методы исследования. Эксперимент проводили на 15 белых лабораторных крысах-самцах (возраст 5–6 месяцев). Были сформированы три группы по 5 животных: I группа (контрольная) – стандартный рацион питания (15 % – белка, 60 % – углеводов, 25 % – жиров); II группа – рацион с высоким содержанием белка (25 % – белка, 55 % – углеводов, 20 % – жиров); III группа – рацион с высоким содержанием углеводов (10 % – белка, 70 % – углеводов, 20 % – жиров). Все животные в течение месяца подвергались ежедневной максимальной физической нагрузке – плавание (t воды +27C°). Биохимические исследования сыворотки крови включали определение содержания общего белка, альбумина, триглицеридов, мочевины, креатинина, глюкозы, холестерина, а также определение активности γ-глутамилтрансферазы, щелочной фосфатазы (ЩФ), АЛТ и АСТ. Отбор крови проводился через 24 часа после завершения физической нагрузки. Исследования выполнены с использованием автоматического биохимического анализатора „JEOL BioMajesty”. Данные были статистически обработаны с использованием критерия Стьюдента.
  Результаты и их обсуждение. Анализ результатов проведенных биохимических исследований сыворотки крови, выполненный с учетом референcных значений показателей у крыс [4], не выявил отклонений от нормы. Тем не менее, при статистической обработке данных отмечены различия между группами: содержание АЛТ и АСТ в сыворотке крови крыс с рационом высокого содержания белка было соответственно на 19 и 22 % выше (р<0,05), чем у крыс со стандартным рационом. В сыворотке крови крыс, рацион которых отличался высоким содержанием углеводов, содержание АСТ, ЩФ и альбумина было соответственно на 38, 22 и 7 % выше чем в сыворотке крыс со стандартным рационом.
  Что касается влияния максимальной динамической физической нагрузки в зависимости от различного содержания нутриентов в рационе, то увеличение времени плавания крыс в контрольной группе, по сравнению с исходным, наблюдалось: на 7-й день – в 4,5 раза, на 14-й день – в 6,9 раза, на 21-й день – в 8,6 раза, на 28-й день – в 15,4 раза, на 31-й день – в 18,3 раза.
  В группе с рационом высокого содержания белка, время плавания на протяжении всех дней, увеличилось (на 7-й день – в 2,1 раза (p<0,05), на 14-й день – в 3,9 раза (p<0,01), на 21-й день – в 6,9 раза, на 28-й день – в 9,8 раза, на 31-й день – в 13,8 раза). В группе крыс с углеводной диетой, время плавания по сравнению с исходным, увеличивалось на протяжении всех дней эксперимента. На 7-й день, время плавания увеличилось в 3,2 раза, на 14-й день – в 4,5 раза, на 21-й день – в 4,4 раза, на 28-й день – в 6 раз, на 31-й день – в 9 раз.
  Выводы:
  Физическая нагрузка, независимо от рациона питания, оказывает благоприятное влияние на выносливость животного. Максимальная время плавания отмечалось при использовании стандартного рациона и рациона с высоким содержанием углеводов. Рацион с высоким содержанием белка приводит к увеличению содержание АЛТ и АСТ в сыворотке крови, a рацион с высоким содержанием углеводов – к увеличению содержание АСТ, ЩФ и альбумина, что свидетельствует о нарушении биохимических процессах в печени, и в меньшей степени в почках, скелетных мышцах а также в других жизненно важных органах крыс.
  Литература
  1. Jensen T., Richter E. Regulation of glucose and glycogen metabolism during and after exercise. In: J. Physiol., 2012, vol. 590 (5), p. 1069–1076. 2. Ortenblad N. et al. Muscle glycogen stores and fatigue. In: J. Physiol., 2013, vol. 591 (18), p. 4405–4413.
  3. Poleacova L. Impactul excesului şi insuficienţei componentelor principale ale raţiei alimentare asupra stării organismului prin prisma sanocreatologiei (reviul literaturii). În: Buletinul Academiei de Ştiinţe a Moldovei. Ştiinţele vieţii, 2017, nr. 1 (331), p. 24–32. 4. Suckow A. et al. The Laboratory Rat. Burlington: Elsevier Academic Press, 2006, 912 p. 5. Фурдуй Ф.И. и др. Трактат о научных и практических основах санокреатологии. Том 1. Проблема здоровья. Санокреатология. Потребность общества в ее развитии. Кишинэу: AŞM, 2016. 228 с.
doclvs.ru
Внимание! информация на сайте не является медицинским диагнозом, или руководством к действию и предназначена только для ознакомления.