Норма малонового диальдегида в крови

Малоновый диальдегид (MDA) – эндогенный альдегид, являющийся клинико-лабораторным маркером оксидативного стресса и используемый для прогноза и контроля лечения ишемической болезни сердца, а также широкого спектра других заболеваний.

Синонимы русские

Малондиальдегид.

Синонимы английские

MDA, Blood.

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография.

Единицы измерения

Нмоль/мл (наномоль на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до анализа, можно пить чистую негазированную воду.
• Не курить в течение 30 минут до анализа.

Общая информация об исследовании

Малоновый диальдегид (MDA) – это эндогенный альдегид, образующийся в результате метаболизма арахидоновой и других полиненасыщенных жирных кислот. Вследствие дальнейших биохимических превращений он окисляется до диоксида углерода или вступает во взаимодействие с фосфолипидами, аминокислотами и нуклеиновыми кислотами. В настоящее время малоновый диальдегид рассматривается в качестве маркера оксидативного стресса.

Уровень MDA важен для диагностики широкого спектра заболеваний. Наиболее убедительные данные получены при изучении роли MDA в прогнозе и контроля лечения ишемической болезни сердца (ИБС). Так, было показано, что концентрация MDAсоотносится с некоторыми клиническими признаками ИБС (функциональный класс заболевания, данные ЭКГ). Она может быть использована для прогноза инфаркта миокарда без зубца q и нестабильной стенокардии как в раннем, так и в отдаленном периоде заболевания. Уровень малонового диальдегида выше 100 нмоль/мл является неблагоприятным прогностическим маркером. Медикаментозное лечение ИБС сопровождается значительным (более 20 %) снижением MDAвне зависимости от клинической формы заболевания.

Высокие уровни MDA отмечены при тяжелом течении псориаза, рассеянного склероза, инсульта, хронических патологий почек, а также некоторых инфекций (сифилис, стрептококковая инфекция) и онкологий (рак желудка, рак легкого). На этом основании MDA может быть использован в качестве вспомогательного прогностического маркера при обследовании пациентов с указанными заболеваниями. В последнее время возросло значение определения уровня MDA, а также некоторых других эндогенных альдегидов в клинике антивозрастной медицины.

Концентрация малонового диальдегида в крови связана с некоторыми клинико-лабораторными показателями липидограммы. Наиболее значимая связь выявлена между MDA и концентрацией липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП), а также триглицеридов и общего холестерина.

При интерпретации уровня MDA и оценке оксидативного стресса у конкретного больного целесообразно проводить дополнительные исследования, в первую очередь на маркеры антиоксидантной системы крови (глутатион, ретинол, альфа-токоферол, аскорбиновую кислоту и некоторые другие микроэлементы).

Для чего используется исследование?

• Для оценки оксидативного стресса;
• для прогноза и контроля лечения ишемической болезни сердца, а также некоторых других заболеваний (псориаза, рассеянного склероза, инсульта, хронических заболеваний почек, сифилиса, стрепткокковой инфекции, рака желудка, рака легкого).

Когда назначается исследование?

• При обследовании пациента с ишемической болезнью сердца, а также некоторыми другими заболеваниями (см. выше).

Что означают результаты?

Референсные значения: 0,45 — 1,7 нмоль/мл.

Причины повышения уровня малонового диальдегида:

• ишемическая болезнь сердца;
• псориаз;
• рассеянный склероз;
• инсульт;
• хронические заболевания почек;
• инфекционные заболевания (сифилис, рожа);
• онкологические заболевания (рак желудка, рак легкого).

Причины понижения уровня малонового диальдегида:

• снижение интенсивности перекисного окисления липидов на фоне лечения.

Что может влиять на результат?

• Тяжелое течение заболеваний связано с наиболее высокими показателями малонового диальдегида.

Важные замечания

• Результат исследования следует оценивать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

• Глутатион восстановленный
• Витамин С (аскорбиновая кислота)
• Витамин Е (токоферол)
• Витамин А (ретинол)
• Селен в крови
• Цинк в крови
• Медь в крови
• Холестерол общий
• Триглицериды

Кто назначает исследование?

Кардиолог, врач общей практики, специалист антивозрастной медицины.

Литература

• Klychnikova EV, Matveev SB, Riabinin VA, Godkov MA, Golikov AP, Akhmetov VV, Mikhailov IP. The oxidation stress, lipid metabolism and their relationship in patients with severe course of hypertension disease in aggregate with carotid stenosis. Klin Lab Diagn. 2012 May;(5):20-2.
• Smirnova LP, Krotenko NV, Grishko EV, Krotenko NM, Alifirova VM, Ivanova SA. [State of antioxidant system in patients with multiple sclerosis during therapy]. Biomed Khim. 2011 Nov-Dec;57(6):661-70.
• Azizova OA, Sergienko VI, Syrkin AL, Ivanov GG, Aseichev AV, Lopukhin IuM. Clinical and prognostic significance of free radical processes in patients with coronary heart disease. Vestn Ross Akad Med Nauk. 2009;(10):32-40.
• Dmitriev LF, Titov VN. Lipid peroxidation in relation to ageing and the role of endogenous aldehydes in diabetes and other age-related diseases. Ageing Res Rev. 2010 Apr;9(2):200-10. doi: 10.1016/j.arr.2009.09.004. Epub 2009 Oct 1.
• Nagoev BS, Tlupova MV. Prooxidative characteristics of plasma from the psoriatic patients based on malonic dialdehyde level. Klin Lab Diagn. 2008 Aug;(8):15-7.
• Chursina TV, Molchanov AV, Mikhin VP. Lipid peroxidation and antioxidant defense in patients with ischemic heart disease: correction with free-load bicycle exercise]. Ter Arkh. 2007;79(1):48-52.

    Известно, что в нормальных условиях жизнедеятельности клетки постоянно присутствует определенный уровень перекисного окисления липидов, индуцированный образованием активных форм кислорода [2]. Перекисное окисление липидов в клетке поддерживается на постоянном уровне благодаря многоуровневой антиоксидантной системе защиты.

    Окислительным стрессом (оксидативным стрессом, от англ. oxidative stress) называют процесс повреждения клетки в результате окисления [7].

    Термином оксидативного стресса (ОС) пользуются обычно клиницисты. Исследователи, занимающиеся фундаментальной медициной, чаще используют термин «перекисное окисление липидов» (ПОЛ).

    Оксидативный стресс заключается в перекисном окислении липидов, приводящем к повреждению клеток за счет действия свободных радикалов. Свободные радикалы являются нестабильными молекулами и обладают повышенной реакционной способностью вступать в различные химические взаимодействия благодаря наличию неспаренных электронов [13, 17].

    В последние десятилетия получены убедительные данные, указывающие на ключевую роль ОС в развитии атеросклероза, гипертонии, сахарного диабета, инсульта, инфаркта. Однако в некоторых случаях ОС используется организмом как защитный механизм. В последнем случае иммунная система человека использует его для борьбы с патогенами, а некоторые реактивные формы кислорода даже могут служить посредниками в передаче сигнала [2].

    Участие оксидативного стресса в развитии близорукости подтверждено в ряде работ как по изучению миопии, так и других заболеваний глаза, сочетанных с миопией [18, 22, 28, 29]. В экспериментальных исследованиях на животных выявлена роль оксидативного стресса в дегенерации фоторецепторов и других клеток сетчатки [20].

    Следует отметить, что ОС, предшествует клиническим проявлениям заболевания, поэтому маркеры ОС могут быть использованы как для оценки риска развития, так и прогноза заболевания.

    В качестве маркера оксидативного стресса и перекисного окисления липидов в настоящее время рассматривается малоновый диальдегид (MDA), образующийся в результате метаболизма арахидоновой и других полиненасыщенных жирных кислот. Вследствие дальнейших биохимических превращений он окисляется до диоксида углерода или вступает во взаимодействие с фосфолипидами, аминокислотами и нуклеиновыми кислотами.

    В литературе имеются единичные сведения об увеличении малонового диальдегида (МДА) и снижении общей антиоксидантной активности при близорукости [6].

    Мощными антиоксидантными свойствами обладает витамин А в низких концентрациях [12, 15], что говорит о его способностях нейтрализации свободных радикалов, которые повреждают клеточную мембрану.

    Все вышесказанное послужило причиной исследования уровня МДА и ретинола в крови у детей с приобретенной близорукостью в условиях полиморбидности.

    Цель.

    Определить уровень малонового диальдегида и ретинола в периферической крови у детей с приобретенной средней близорукостью в условиях полиморбидности.

    Материал и методы.

    В исследовании участвовало 96 детей в возрасте 12-17 лет, из них 34 мальчика (35,4%), 62 девочки (64,5%). Средний возраст составил 14±1,3 года.

    Все дети были разделены на две группы. В первую группу вошли дети с заболеваниями ЛОР-органов и органов дыхания. Во вторую группу – дети без сопутствующих хронических заболеваний. Каждая группа детей была разделена на 2 подгруппы: в «а» подгруппу вошли дети с приобретенной средней близорукостью, подгруппу «б» составили дети с эмметропией.

    Стандартное офтальмологическое обследование включало визометрию (проектор знаков ОАП-250, «Carl Zeiss», Германия), биомикроскопию (щелевая лампа, SL 120, «Carl Zeiss», Германия), авторефрактометрию (авторефрактометр KR-8900, «Topcon», Япония), офтальмоскопию (офтальмоскоп BETA 200, «Heine», Германия), эхобиометрию (эхобиометр HiScan, «OPTICON», США).

    Определение ретинола проводили по методу Bessey в модификации Л.А. Анисимовой.

    Забор крови осуществляли в стерильных условиях в утренние часы натощак. Взятую из вены кровь (около 1 мл) вносили в центрифужную пробирку и ставили на 20-30 мин в стеклянный стаканчик с теплой водой (температура 45° С). После чего сгусток крови отделяли от сыворотки с помощью стеклянной палочки и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин.

    Отбирали 0,12 мл сыворотки и переносили в пробирку, затем добавляли 1 М спиртового раствора KOH в объеме 0,12 мл. Затем пробирки тщательно встряхивали.

    Водяную баню доводили до температуры 60° С и помещали в нее пробирки на 20 минут.

    Пробирки с содержимым охлаждали и к ним добавляли по 0,12 мл ксилол-октановой смеси, интенсивно встряхивали в течение 10-15 с. Вновь охлаждали и центрифугировали.

    Аккуратно забирали верхний слой и переносили в кюветы и спектрофотометрировали фотометр «КФК-3», «ЗОМЗ», Россия) при длине волны 328 нм. Кюветы ставили на расстоянии 20 см от ультрафиолетовой лампы на 60 мин, после чего опять спектрофотометрировали.

    Количество витамина А рассчитывали по формуле:

    Количество витамина А=637 х (оптическая плотность до облучения – оптическая плотность после облучения).

    Определение малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови проводили с участием тиобарбитуровой кислоты метод спектрофотометрии.

    Забор крови осуществляли в стерильных условиях в утренние часы натощак. Кровь вносили в центрифужную пробирку в объеме 2.5 мл и добавляли такое же количество трихлоруксусной кислоты, затем тщательно перемешивали и центрифугировали при скорости 3000 оборотов в минуту в течение 15 минут. Пробирки с содержимым помещали на 15 минут в холодное место, пока не образовывались хлопья.

    Надосадочную жидкость в объеме 3 мл вносили в чистую пробирку и добавляли 1,5 мл тиобарбитуровой кислоты, после чего полученный раствор перемешивали.

    Пробирку с полученный раствором помещали в кипящую водяную баню на 15 минут, после чего пробирки охлаждали под струей холодной проточной воды и центрифугировали 5 минут с ускорением 3000 оборотов в минуту.

    Надосадочную жидкость помещали в кюветы и спектрофотометрировали (фотометр «КФК-3», «ЗОМЗ», Россия) при длине волны 532 нм.

    Содержание МДА расчитывали по формуле: МДА=(оптическая плотность раствора х 106)/ 3 х 1,56 х 105.

    Результаты и обсуждение

    В результате проведенных исследований установлено, что у детей с эмметропией без сопутствующих хронических заболеваний уровень МДА составил 1,48±0,09 мкмоль/л. У детей с близорукостью без сопутствующих хронических заболеваний уровень МДА составил 2,96±0,12 мкмоль/л, что достоверно (р<0,05) выше, чем у детей с эмметропией без сопутствующих хронических заболеваний.

    При наличии у детей с эмметропией сопутствующих хронических заболеваний ЛОР-органов и органов дыхания уровень МДА в крови составил 2,15±0,04 мкмоль/л. У детей с близорукостью в условиях полиморбидности уровень МДА в крови составил 3,46±0,1 мкмоль/л, что было достоверно (р<0,05) выше, чем у детей с эмметропией.

    Следовательно, у детей с близорукостью в условиях как полиморбидности, так и без сопутствующих хронических заболеваний уровень МДА был достоверно выше, чем в группах детей с эмметропией как с сопутствующими хроническими заболеваниями, так и без них.

    Исследование уровня ретинола у детей с близорукостью без сопутствующих хронических заболеваний показало, что он был достоверно (р<0,05) ниже, чем у детей с эмметропией без сопутствующих хронических заболеваний (0,95±0,04 мкмоль/л и 1,43±0,06 мкмоль/л соответственно).

    У детей с миопией в условиях полиморбидности уровень ретинола в крови составил 0,85±0,03 мкмоль/л, что достоверно (р>0,05) не отличалось от данных исследования детей с эмметропией и сопутствующими хроническими заболеваниями (0,91±0,08 мкмоль/л).

    Уровень ретинола в крови у здоровых детей (1,43±0,06 мкмоль/л) и у детей, имеющих эмметропию и сопутствующие хронические заболевания (0,91±0,08 мкмоль/л), достоверно отличался друг от друга (р<0,05).

    Таким образом, у детей со средней близорукостью без сопутствующих заболеваний и у детей с эмметропией и сопутствующими хроническими заболеваниями наблюдаются низкие уровни ретинола и высокие концентрации МДА в крови. Наибольшее увеличение уровня МДА и снижение уровня ретинола наблюдается при средней близорукости с сопутствующими хроническими заболеваниями.

    Анализируя полученные данные, можно отметить, что при наличии в организме хронической патологии увеличивается концентрация малонового диальдегида, который, как известно, является маркером перекисного окисления липидов [19]. В ходе ОС активные формы кислорода и продукты перекисного окисления липидов приводят к повреждению сосудистой стенки [3, 4, 8], что способно вызвать как нарушение транспорта метаболитов, так и нарушение микроциркуляции в тканях.

    Нами было выявлено, что при наличии у исследуемых детей двух и более хронических заболеваний снижается уровень ретинола в крови, что подтверждает данные других авторов [24]. Вышесказанное может расцениваться как истощение антиоксидантных систем, поскольку витамин А обладает антиоксидантными свойствами [5, 16].

    Согласно нашим ранее проведенным исследованиям у детей со средней близорукостью в условиях полиморбидности были выявлены признаки клеточного и гуморального иммунодефицита [11]. Данные факты могут объясняться тем, что продукты оксидативного стресса способны вызывать апоптоз лимфоцитов [1, 21], кроме того, дефицит витамина А также способен привести к иммуносупрессии [10, 23].

    Известно, что в основе акте зрения лежит обновление фоторецепторных дисков в ходе биохимического превращения 11-цис ретиналя под действием света в all-trans ретиналь и дальнейшее превращение в all-trans ретинол [30]. Сетчатка являясь самым мощным потребителем кислорода в организме, подвержена фотоокислению из-за длительного воздействия света [26]. Вышесказанное создает благоприятные условия для генерации активных форм кислорода, вызывающих повреждение биологических мембран. Обмен между фоторецептором и пигментным эпителием сетчатки нарушается, что может приводить к нарушению образования ретинола и окисление ретиналя до полностью-транс-ретиноевой кислоты. Последняя, как показали ранее проведенные нами исследования, принимает активное участие в ремоделировании склеры [9, 14]. Кроме вышеизложенного, нарушение обмена между пигментоцитом и палочками может быть связано с действием продуктов ПОЛ или ретиналя, который способен запустить свободнорадикальное повреждение [25]. К тому же образующаяся в ходе окисления ретиналя полностью-трансретиноевая кислота также способна быть генератором свободных радикалов. На наш взгляд, сопутствующая хроническая патология при близорукости отягощает течение миопии за счет усиления окислительных процессов и действия продуктов ПОЛ. За счет нарушения микроциркуляции хроническая патология способна привести к гипоксии тканей, а следовательно, и к усилению процессов ПОЛ.

    Сведения об авторах

    Хамнагдаева Надежда Вениаминовна – ассистент кафедры патофизиологии и клинической патофизиологии лечебного факультета ГБОУ ВПО ««РНИМУ им. Н.И. Пирогова»» Минздрава России.

    Обрубов Сергей Анатольевич – док. мед. наук, профессор кафедры офтальмологии педиатрического факультета ГБОУ ВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России.

    Семенова Людмила Юрьевна – док. мед. наук, профессор кафедры патофизиологии и клинической патофизиологии лечебного факультета ГБОУ ВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России.

    Казимирский Александр Николаевич – док. мед. наук, профессор кафедры патофизиологии и клинической патофизиологии лечебного факультета Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова Минздрава России.

    Салмаси Жеан Мустафаевич – док. мед. наук, профессор кафедры патофизиологии и клинической патофизиологии лечебного факультета Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова Минздрава России

    Порядин Геннадий Васильевич – док. мед. наук, чл.-корр. РАН, зав. кафедрой патофизиологии и клинической патофизиологии лечебного факультета Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова Минздрава России.

    Чиненов Игорь Михайлович – кандидат медицинских наук, зав. отделением микрохирургии глаза ФГБУ «Российская детская клиническая больница» Минздрава России.

    Асташева Ирина Борисовна – канд. мед. наук, доцент кафедры офтальмологии педиатрического факультета ГБОУ ВПО Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова.