Осмотическая резистентность эритроцитов анемия

Красные кровяные тельца (или эритроциты) — наиболее многочисленные клетки крови. Особое устройство мембраны позволяет им захватывать молекулы кислорода в капиллярах легких и транспортировать его к тканям и органам. Однако при определенных патологиях структура оболочки эритроцитов становится менее устойчивой и легко разрушается. Такие изменения приводят к значительному уменьшению количества красных телец в крови и последующему нарушению кислородного обмена в тканях организма.

Способность мембран красных клеток крови противостоять разрушению под воздействием неблагоприятных факторов получила название резистентность. Особое значение при диагностике заболеваний имеет осмотическая резистентность (ОРЭ) — сохранение устойчивости оболочки клетки в условиях изменения концентрации растворенных солей в окружающей ее среде.

Методика измерения осмотической резистентности

Клетки крови способны нормально функционировать в изотоническом растворе (содержание ионов NaCl не превышает 0,85%). Такая концентрация NaCl соответствует количеству ионов соли в сыворотке крови. Те растворы, которые содержат большее количество солей, называются гипертоническими, а меньшее — гипотонические. Мембраны клеток, помещенных в такие растворы, быстро разрушаются.

Эритроциты здорового человека способны выдерживать изменения осмотического давления, то есть обладать прочной оболочкой. Для определения стойкости мембран клеток крови используют следующую методику:

1. В пробирки помещается раствор NaCl c разной степенью концентрации (начиная от самой большой — 0,7%, до наименьшей — 0,22%);
2. В каждую пробирку добавляется небольшое количество крови (не более 0,02 мл);
3. В течение следующего часа пробирки держат при температуре в 22-23°C;
4. Полученные растворы центрифугируют и по цвету содержимого высчитывают примерное время начала разрушения клеток крови и момент их полного гемолиза;

Чуть розовый раствор свидетельствует о том, что эритроциты только начали разрушаться, тогда как ярко-красный цвет — знак того, что произошел полный распад клеток.

При помощи этого анализа определяют минимальную и максимальную осмотическую резистентность кровяных телец. Максимальная соответствует тому значению содержания NaCl, при котором происходит полное разрушение клеток крови. Минимальная же определяется тем количеством, при котором клетки разрушаются меньше всего.

Подготовка к процедуре. Нормальные значения резистентности.

Расчет значений осмотической резистентности позволит определить причину нехватки эритроцитов в крови пациента. Для проведения анализа кровь берется из вены и сразу же помещается в пробирку с антикоагулянтом, чтобы избежать ее свертывания. В каких-либо особых приготовлениях перед сдачей анализа нет необходимости — пациент может не менять привычный ему режим питания.

Для взрослого человека нормальными показателями являются следующие значения:

• минимальная резистентность — не выше 0,48%;
• максимальная — не ниже 0,32%

Следует помнить, что у маленьких детей показатели устойчивости значительно выше, чем у взрослых пациентов, в то время как у пожилых — немного ниже нормы.

Существует несколько факторов, которые могут повлиять на достоверность данных анализа:

• недавнее переливание крови;
• присутствие во взятом образце патогенных микроорганизмов, которые вызывают гемолиз клеток;
• некоторые заболевания, при которых количество зрелых эритроцитов в крови минимально (тяжелые формы анемии);
• наконец, человеческий фактор — неосторожное обращение с наполненными пробирками может привезти к преждевременному гемолизу;

Если вышеперечисленные причины отсутствовали, а результат анализа выходит за пределы нормы, то можно говорить о серьезном заболевании, за которым последуют значительные нарушения обмена веществ в организме.

Отклонения от стандартных показателей

ОРЭ менее 0,33% развивается в следующих ситуациях:

• значительные кровопотери;
• при талассемии (наследуемое заболевание, при котором нарушен синтез белков, входящих в состав гемоглобина);
• при спленэктомии (удалении части селезенки — органа, активно участвующем в процессах кроветворения);
• при полицитемии (нарушение функций кроветворных клеток костного мозга);

Резистентность более 0,48% связана с такими заболеваниями как:

• наследственная гемолитическая анемия (передающаяся по наследству патология, при которой организм активно разрушает свои же клетки крови);
• гемолитическая анемия новорожденных (диагностируется в течение первых дней жизни младенца. Может быть как наследственной, так и приобретенной);
• отравление солями тяжелых металлов;

Как правило, отклонения от нормальных показателей резистентности сигнализируют о сбоях в работе организма, причем чаще всего диагностируемые патологии носят наследственный характер.

Предотвращение снижения ОРЭ

Как правило, причиной снижения резистентности клеток становятся наследственные заболевания. Пациенты, столкнувшиеся с такой проблемой, могут обратиться к генетику, чтобы рассчитать возможность появления такого же заболевания у их детей. В остальных случаях профилактика снижения плотности мембраны клеток крови сводится к ведению здорового образа жизни, отсутствию вредных привычек, созданию наиболее благоприятных условий для процесса кроветворения.

Признаки снижения резистентности клеток крови

Еще до проведения анализа, пациент может найти у себя признаки снижения устойчивости мембран кровяных телец. Вот основные проявления подобного отклонения:

• Сонливость;
• Угнетенное состояние;
• Значительное снижение массы тела;
• Анемичность слизистых оболочек;
• Повышенная температура тела;
• Отсутствие интереса к еде;

Перечисленные симптомы должны стать серьезным поводом для беспокойства. При их обнаружении следует немедленно записаться на прием к врачу и пройти полное обследование. Чем раньше будет поставлен диагноз, тем быстрее можно будет начать лечение и тем меньший вред будет нанесен организму.

Зависимость устойчивости мембраны от формы кровяных телец и их возрастных изменений

Плотность мембраны зависит не только от возраста клеток, но и от их формы. Сформировавшийся эритроцит приобретает вид двояковогнутого диска, однако также могут встречаться и дегенеративные формы эритроцитов: сферические, звездчатые, полулунные, серповидные и т.д. Для разных заболеваний характерны свои изменения клеток крови. К примеру, при серповидно-клеточной анемии развиваются серповидные эритроциты, талассемия характеризуется появлением овальных клеток, большинство видов анемий проявляют себя появлением сфероцитов — эритроцитов сферической формы.

Нормальную устойчивость мембраны имеют лишь эритроциты в форме двояковогнутого диска. Красные клетки крови другой конфигурации менее жизнеспособны — их резистентность составляет 0,4-0,6% при обычных показателях в 0,32-0,48%. Кроме того, такие клетки, как правило, не способны качественно выполнять свои функции. Из патологических форм чаще всего встречаются овальные эритроциты. Такие клетки можно наблюдать не только при болезнях крови, но и у полностью здоровых людей, поскольку, чем старше становятся эритроциты, тем более округлыми они становятся.

Таким образом, наиболее устойчивыми клетками являются молодые, недавно сформировавшиеся эритроциты, отличающиеся наиболее выраженной дисковидной формой.

Методика расчета осмотической устойчивости нередко применяется при обнаружении гемоглобинопатии и прочих заболеваний крови и отличается эффективностью и простотой. Наиболее часто его применяют для обнаружения гемолитической анемии и онкогематологии (в том числе и у новорожденных).

Что это такое?

Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует их устойчивость относительно деструктивных факторов: химических, температурных, механических. При лабораторных опытах особое внимание уделяется их стойкости к гипотоническим р-рам NaCl, а именно, какая концентрация вызывает гемолиз. Нормально функционирующие клетки сопротивляются осмосу и сохранят прочность. Такая способность характеризует осмотическую устойчивость, или резистентность эритроцитов.
Если они становятся слабыми, то маркируются иммунной системой, после чего удаляются из организма.

Определение

Определение осмотической резистентности эритроцитов осуществляется следующим образом:

• используется несколько стеклянных пробирок, в которые заливается раствор натрий хлорида разной концентрации — чаще всего от 0,7 до 22 %;
• в пробирки с раствором добавляют образцы крови, но только в одинаковом количестве;
• образцы помещают в условия комнатной температуры на 60 минут;
• по истечении срока пробирки с образцами центрифугируют;
• полученный после этого окрас жидкости будет указывать на показатели осмотической стойкости эритроцитов.

Если окрас жидкости розовый, это говорит о минимальной концентрации, а вот ярко-красный цвет будет говорить о максимальной. Норма для сферической резистентности эритроцита составляет 0,32–0,44 процента раствора натрия хлорида.

Метод исследования

Основной лабораторный метод определения стойкости эритроцитов к разрушению – это реакция гипотонического солевого раствора и крови, смешанного в одинаковых объемах. Анализ позволяет выявить стабильность мембраны клетки. Альтернативный метод определения ОРЭ – фотоколориметрический, при котором измерения производят специальным аппаратом – фотоколориметром.

Физраствор представляет собой смесь дистиллированной воды и хлорида натрия. В растворе с концентрацией 0,85% эритроциты не разрушаются, его называют изотоническим. При более высокой концентрации получится гипертонический, а ниже – гипотонический раствор.

В них эритроциты погибают, сжимаясь в гипертоническом, и набухая в гипотоническом р-ре.

Как проводится процедура?

Определение ОРЭ проводится добавлением равного количества крови (обычно 0,22 мл) в гипотонический раствор NaCl различных концентраций (0,7-0,22%). После часа выдержки смесь центрифугируют. В зависимости от цвета устанавливают начало распада и полный гемолиз. В начале процесса раствор имеет слегка розовый цвет, а ярко красный свидетельствует о полном распаде эритроцитов. Результат выражается в двух характеристиках резистентности, имеющих процентное выражение – минимальной и максимальной.

Как проводят анализ

Метод определения осмотической резистентности эритроцитов связан с использованием гипотонических растворов концентрацией от 0,22 до 0,7%. В них помещают одинаковое количество крови. Эту смесь держат около часа при комнатной температуре, а затем подвергают обработке в центрифуге. При этом наблюдают за цветом жидкости. В начале процесса распада эритроцитов смесь становится слегка розовой, а при полном разрушении кровяных клеток – красной.

Таким образом, при определении осмотической резистентности эритроцитов получают 2 показателя: минимальный и максимальный.

Этот анализ помогает определить причину анемии. Кровь у пациента берут из вены. Специальной подготовки или соблюдения диеты перед анализом не требуется.

Показатели нормы

Норма резистентности для взрослого человека независимо от пола является следующей (%):

1. Максимальная – 0,34-0,32.
2. Минимальная – 0,48-0,46.

В детском возрасте до 2 лет осмотическая устойчивость несколько выше нормального показателя, а норма ОРЭ у пожилых людей, как правило, ниже от стандартного минимального показателя.

Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>

Отклонения от нормы

Резистентность и прочность мембран эритроцитов находятся в зависимости от наследственных заболеваний или особенностей патологии.

Причинами роста или падения ОРЭ выступают следующие факторы:

1. Повышение стойкости эритроцитов наблюдается при механической желтухе, когда на них оседают холестериновые отложения, приобретенном или наследственном сфероцитозе, стомацитодозе, различных формах гемоглобиноза.
2. Значительная кровопотеря способствует перенасыщению крови незрелыми эритроцитами и истончению их мембран. Эти же признаки характерны при наличии онкогематологии, железодефицитной анемии, иммуносекретирующих опухолей и гемоглобинопатий.

Отдельные сердечно-сосудистые болезни вызывают насыщение крови уплощенными эритроцитами, имеющими небольшой индекс сферичности, а некоторые наследственные заболевания – клетками, имеющими чрезмерно шарообразную форму. Клетки с подобными аномалиями характерны плохой резистентностью.

Причины снижения ОРЭ:

1. Сердечная недостаточность, вызывающая набухание до приобретения клетками сферической формы.
2. Генетически обусловленная аномалия, когда в крови находятся шарообразные эритроциты.
3. При старении эритроцитов и на последних этапах их жизненного цикла. В этот период клетки становятся округлыми, а проницаемость стенок заметно возрастает.

Причины отклонения от нормы

Норма показателей может нарушаться вследствие определенных заболеваний как острого, так и хронического типа. Максимальные показатели резистентности могут наблюдаться в следующих случаях:

• атеросклероз;
• злокачественные новообразования в желудочно-кишечном тракте;
• талассемия;
• полицитемия, но только в некоторых случаях;
• спленэктомия;
• гемоглобинопатия;
• гемоглобиноз;
• застойная желтуха;
• врожденные заболевания крови;
• системные и аутоиммунные патологии.

Минимальная осмотическая резистентность может быть следствием таких патологических процессов:

• железодефицитная анемия;
• гемолитическая анемия у новорожденных;
• отравление тяжелыми металлами;
• обширная интоксикация организма;
• наследственная форма гемолитической анемии.

Небольшое отклонение от нормы может быть обусловлено такими заболеваниями:

Предрасполагающие факторы для снижения устойчивости ККТ:

• выработка шарообразных эритроцитов — генетическое отклонение;
• завершение жизненного цикла ККТ, что приводит к шарообразной форме;
• сердечно-сосудистые заболевания.

Определить, что именно привело к такому нарушению, можно только путем диагностических мероприятий. Поводом для начала обследования будет соответствующая клиническая картина.

Профилактика

Наследственный сфероцитоз нельзя предупредить, но пациенты, страдающие данной патологией, могут обратиться к генетику, чтобы провести анализ по обнаружению дефектного гена, способного передать болезнь их детям. Профилактика наследственной формы болезни сводится к терапевтическим мерам при наступлении криза. В остальных случаях профилактические меры заключаются в обеспечении оптимальных условий для нормального кроветворения при помощи правильного питания, витаминотерапии и здорового образа жизни.

Симптоматика

Клиническая картина будет носить общий характер. Специфических симптомов, которые будут характерны только отклонению от нормы резистентности ККТ, нет.

Может присутствовать симптоматика такого характера:

• бледность кожных покровов;
• снижение веса без видимой причины;
• повышенная утомляемость и нарастающая слабость, что будет больше похоже на синдром хронической усталости;
• плохой аппетит;
• сонливость;
• обострение хронических заболеваний.

Зависимость резистентности от формы и зрелости эритроцита

Показатель осмотической резистентности находится в прямой зависимости от зрелости, формы, а также и состава кровяной плазмы.

Форму эритроцитов определяют сопоставлением размеров: диаметра и толщины, что выражают индексом сферичности. Для нормальных клеток он находится в пределах 0,27-0,28, а значительные отличия от нормы наблюдаются при отклонениях, обусловленных наследственностью, когда эритроциты имеют шарообразную форму, что значительно снижает их резистентность.

Что касается возраста красных кровяных клеток, то самыми резистентными являются эритроциты, только вышедшие из кроветворных органов, а самую высокую стойкость имеют молодые клетки плоской формы, имеющие незначительный индекс сферичности. Красные клетки, завершающие жизненный цикл, приобретают округлую форму, и имеют устойчивость 0,4-0,6% с нормой 0,32-0,44%.

Влияющие на точность лабораторных исследований факторы

На безошибочность лабораторных анализов влияют:

• наличие патологий, характеризующихся пониженным количеством красных кровяных телец;
• неосторожное обращение с пробой крови, которое может повлечь её ускоренный гемолиз;
• неправильный выбор антикоагулянта, нарушение его дозировки или плохого смешивания такого консерванта с забранной кровью;
• переливание крови, которое было сделано накануне анализа;
• нарушение стерильности – присутствие в пробирке гемолизирующих микроорганизмов.

Результаты исследования не зависят от режима питания, а также не требуют каких-либо продуктовых ограничений.

Границы резистентности

Принято отмечать верхнюю и нижнюю границу резистентности. Нижняя соответствует такой концентрации гипотонического р-ра, когда распадаются самые неустойчивые эритроциты, а верхняя – концентрации, при которой за 3 часа подвергаются гемолизу все клетки. В процентном выражении верхняя норма равна 0,34-0,32%, а нижняя 0,48-0,46%.

Падение показателя менее 0,32% происходит из-за больших кровопотерь, при застойной желтухе, талассемии, гемоглобинопатии, после удаления селезенки, отдельных заболеваниях полицитемией, гемоглобинозе С. Повышение значения более 0,48% возможно при гемолитической анемии младенцев, семейной гемолитической анемии, а также при интоксикации свинцом. Расширение границы ОРЭ происходит при обострении пернициозной анемии и при остром начинающемся гемолитическом кризе.

Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует стойкость оболочки красных кровяных клеток к деструктивным факторам. Здоровые эритроциты имеют максимальную устойчивость после выхода из органов кроветворения, а минимальную по окончании цикла жизни, после чего маркируются иммунной системой и утилизируются в селезенке. Главный метод определения ОРЭ – взаимодействие гипотонических растворов NaCl с кровью.
Анализ позволяет определить стабильность мембраны эритроцита и границы резистентности.

Признаки нарушения осмотической устойчивости

Симптомы такого отклонения бывают следующими:

• повышение температуры тела, иногда до высоких значений;
• быстрая утомляемость;
• плохой аппетит;
• общая слабость;
• бледность слизистых оболочек;
• снижение веса;
• сонливость.

Сфероциты (шарообразные эритроциты) менее устойчивы к осмотическому давлению

Нарушение ОРЭ

1. Упадком сил.
2. Отсутствием аппетита.
3. Быстрой общей усталостью.
4. Падением веса тела.
5. Постоянной сонливостью.
6. Бледностью слизистых.
7. Значительным повышением температуры.

При падении устойчивости, эритроциты помечаются системой иммунитета (маркерами), и выводятся из организма селезенкой. При этом печень не успевает нейтрализовать выделившийся при разрушении клеток билирубин, в результате развивается гемолиз. При развитии такого процесса анализ крови показывает недостаток красных клеток, а организм испытывает дефицит кислорода.

Нарушение ОРЭ

( 2 оценки, среднее 4.5 из 5 )