Подсчет гемоглобин в крови

Количество гемоглобина можно определить или спектроскопически, посредством определения количества железа, или путем измерения красящей способности крови (колориметрически).

Для клинических целей используется последний метод, который требует небольшого количества крови и дает возможность быстро определить количество гемоглобина. Наиболее распространенным является метод Говерса в видоизменении Сали.

Определение гемоглобина по Сали основано на том, что гемоглобин крови в растворе соляной кислоты переходит в солянокислый гематин, который и сравнивается с гематином определенной концентрации, взятом в качестве стандарта. Процент гемоглобина в этом случае определяется колориметрически.

Набор Сали состоит из запаянной стандартной пробирки, наполненной раствором солянокислого гематина. Ввиду того, что стандартная жидкость довольно быстро выцветает, в последнее время выпущены стандарты из цветного стекла, окрашенные под цвет солянокислого гематина металлическими окислами. Эти стандарты не выцветают даже под действием прямого солнечного света.

Между стандартными пробирками помещается пробирка, имеющая деления от 10 до 140 или от 10 до 170 такого же диаметра, как и первая. Пробирка с делением от 10 до 140 предназначена для определения гемоглобина в единицах Сали, а от 10 до 170—в процентах.

Подставка, в которой помещаются стандартные и градуированные пробирки, представляет собою деревянную колодку с вырезанными продольными отверстиями и углублениями для них. Сзади колодки прикреплено матовое стекло, которое дает рассеянный свет; на его фоне резко оттеняется окраска стандарта и испытуемой сыворотки.

Для взятия крови прилагается капиллярная пипетка с меткой 20 мм, которая определяет количество крови, взятой для исследования.

Кроме гемоглобинометра, для определения гемоглобина необходимо иметь N/10 раствор НС1 и дистиллированную воду.

Техника определения следующая. В градуированную пробирку до метки 20 набирается N/10 раствор НС1, затем в капилляр до метки 20 мм3 насасывается кровь и, осторожно очистив конец капилляра, переносят ее в пробирку

С соляной кислотой. Кровь осторожно выдувают в А710 раствор соляной кислоты, содержимое пробирки из верхнего прозрачного слоя набирается в капилляр и снова выдувается в пробирку.

Капилляр промывается 2 или 3 раза и осторожно удаляется из пробирки. Кровь гемолизируется, и при распаде образуется солянокислый гематин. Жидкость постепенно становится коричневой. Спустя 5—7 минут после выдувания крови, в пробирку начинают прибавлять дистиллированную воду. Вначале прибавляют по нескольку капель, а затем, по мере изменения цвета и приближения его к стандарту,—то одной капле. Кровь смешивается или стеклянной палочкой с утолщением на конце или же покачиванием прсбирочки. Необходимо следить за тем, чтобы жидкость при смешивании не терялась.

Уровень жидкости после разведения указывает на количество гемоглобина. Учет ведется по нижнему мениску жидкости. Допустимой ошибкой при вторичном исследовании той же самой крови считается расхождение в пределах пяти делений. Метка 80 на пробирке с делением до 140 и цифра 100 на пробирке с делением до 170 соответствует 16,0—17,0 гемоглобина в 100 мл крови. Чтобы получить абсолютную цифру, показывающую количество гемоглобина в граммах в 100 мл крови, необходимо показания гемометра в процентах Сали умножить на 0,17, а количество в единицах— на коэффициент 0,2125.

Количество гемоглобина у здоровых животных колеблется в следующие пределах (см. табл. на стр. 418).

Колебания гемоглобина зависят от возраста, пола, породы, характера кормления и некоторых других условий. При патологических процессах количество гемоглобина может быть увеличено и уменьшено по сравнению с нормальными показателями.

Увеличение количества гемоглобина носит название плейохромии. Она может возникнуть вследствие сгущения крови при потере жидкости организмом (понос, рвота, потливость), при образовании экссудатов и транссудатов, Плейохромию отмечают при кровепятнистой болезни лошадей, интоксикациях и отравлениях. Повышение количества гемоглобина отмечается при физическом напряжении лошади. При хорошей подготовке (тренировка) количество гемоглобина остается почти без изменений.

Уменьшение гемоглобина (олигохромемия) встречается довольно часто и особенно при заболеваниях, связанных с анемией. Олигохромемия является симптомом острых и хронических заболеваний, различных по своему происхождению.

Олигохромемия связана с уменьшением общего количества эритроцитов или обеднением эритроцитов гемоглобином. Следовательно, олигохромемия определяет не только степень, но и характер анемии. Необходимо, однако, учесть, что правильная оценка может быть сделана только при условии подсчета эритроцитов и определения величины цветного показателя.

Определение цветного показателя. Цветной показатель дает представление об отношении гемоглобина к красным кровяным тельцам. Метод определения цветного показателя основан на сравнении. Если в норме цветной показатель равен примерно единице, то изменение этой цифры в сторону увеличения или уменьшения рассматривается, как весьма важный показатель нарушения соотношения между эритроцитами и гемоглобином.

У животных определение цветного показателя проводится по формуле:

Гемоглобин 2 Эритроциты 2 Гемоглобин 2 х эритроциты 1

Гемоглобин 1 / эритроциты 1 = гемоглобин 1 x эритроциты 2

Где гемоглобин 1 и эритроциты 1 показывают среднее количество гемоглобина и эритроцитов у здорового животного и гемоглобин 2 и эритроциты 2—найденное количество гемоглобина и эритроцитов у исследуемых животных. Если у лошади взять за норму количество гемоглобина 75, а эритроцитов 7 500 000, то цветной показатель будет равен единице. Всякое отклонение в количестве гемоглобина и эритроцитов поведет к изменению цветного показателя. Необходимо учитывать только такие отклонения от нормы, которые превышают 15%. Небольшие отклонения учитывать не следует.

Определение цветного показателя имеет значение в дифференциации анемий. При постгеморрагических анемиях, когда имеется одновременно уменьшение как количества эритроцитов, так и гемоглобина, цветной показатель приближается к единице; ниже единицы цветной показатель бывает при вторичных анемиях, при которых снижается количество гемоглобина, при почти нормальном или слегка сниженном количестве эритроцитов; выше единицы цветной показатель отмечается при гемолитических анемиях, когда в ток крови выбрасывается значительное количество молодых клеток (повышенная регенерация).

Для суждения о средней насыщенности эритроцитов гемоглобином практически можно использовать определение кровяного числа. Оно получается делением найденного количества гемоглобина на число эритроцитов в миллионах, например:

75% / 7(000000) = 11 или 90% / 10(000000) =9

Величина кровяного числа неодинакова у различных животных и зависит от количества эритроцитов и гемоглобина в норме, но в среднем она приближается к 10.

Гемоглобин и его функциональное предназначение

Свободный гемоглобин (Hb) – это белок, входящий в состав эритроцитов. Содержание его в плазме крови в норме составляет 1-4 мг/100 мл, или 0,16-0,62 мкмоль/л. Белок отвечает за газообмен в организме и поддержания правильного обмена веществ. Для слаженной работы всех систем организма уровень Hb должен оставаться стабильным.

Если красных клеток крови становится мало, то и концентрация Hb уменьшается, начинается кислородное голодание, нарушаются функции органов и их систем.

Как измеряют уровень гемоглобина?

Уровень гемоглобина обычно измеряется после забора образца крови для общего анализа.

Существует несколько вариантов измерения гемоглобина, большинство из которых в настоящее время выполняются автоматическими машинами, предназначенными для проведения различных анализов крови. Внутри таких автоматических приборов красные кровяные клетки разделяются, чтобы выделить молекулы гемоглобина в специальный раствор. Свободный гемоглобин подвергается воздействию химического вещества, содержащего цианид, который связывается с молекулой гемоглобина с образованием цианметгемоглобина. Далее раствор просвечивают светом и измеряют, сколько света поглощается (особенно на длине волны в 540 нанометров), таким образом определяется количество гемоглобина.

Виды свободного гемоглобина

Гемоглобин существует в нескольких формах. Его норма, в зависимости от вида, всегда различна. Отклонения того или иного вида Hb говорят о разных заболеваниях.

Существуют следующие подвиды свободного гемоглобина:

• гликированый. Появляется при связывании его с глюкозой. Повышенный его уровень указывает на сахарный диабет. Норма составляет 4-6,5 %;
• фетальный. Наличие этого белка в крови характерно для новорожденных. Норма для новорожденных – 80%.

После первого года жизни фетальный полностью заменяется на нормальный. Для взрослого человека уровень этого гемоглобина не должен превышать 1%. Увеличение показателей белка может говорит о серьезных заболеваниях.

Преимущества гемоглобинометра

Гемоглобинометр имеет ряд преимуществ, среди которых: наличие функции автоматической настройки калибровки (первоначальные параметры автокалибровки задают производители, они сохраняются на протяжении всей работы приспособления); длительность использования (устройство может работать без замены комплектующих в течение 5-6 лет); удобство в эксплуатации (небольшой, имеет красивый дизайн); легко чистится; есть возможность использовать стеклянные или одноразовые кюветы.

Гемоглобинометр является средством для измерения концентрации гемоглобина, его работу проверяют производители. При соблюдении указаний в инструкции и своевременном уходе за приспособлением, прибор будет работать безотказно минимум 5 лет. Аппарат просто незаменим в салонах транспортных средств скорой помощи, а также экспресс-лабораториях, стационарных исследовательских центрах и обычных медицинских учреждениях. Он используется во время выезда на дом к больным людям. Его с собой берет медицинский работник с целью измерения уровня гемоглобина в крови пациента. Если показатель не будет в пределах нормы, человеку следует обратиться к семейному доктору или терапевту.

Норма для детей

У детей уровень Hb зависит от возраста. На первом году жизни происходит физиологическое снижение белка в крови, что является нормой для новорожденных.

Чтобы поддерживать уровень Hb в крови ребенка в норме, педиатр может назначать анализ крови 1-2 раза в год. А дети, имеющие в анамнезе заболевания крови, должны сдавать анализы более 3 раз в год.

Концентрация Hb в крови ребенка зависит от его возраста:

Внимание! Нехватка Hb в детском организме может привести к задержке умственного и физического развития. Именно поэтому очень важно регулярно следить за уровнем Hb в первые месяцы жизни.

В крови содержится в среднем 14 г % гемоглобина, у женщин — 12 — 15, у мужчин — 13 -16 г % (соответственно 120- 150 и 130- 160 г/л). Определение количества гемоглобина имеет большое значение и является обязательным компонентом анализа крови. Гемоглобин определяется колориметрическими методами. В настоящее время метод Сали в клинике применяется редко, так как существуют более точные методы с помощью фотоэлектроколориметров. Гемометр Сали используют в учебных целях.

Метод Сали основан на превращении гемоглобина в хлорид гематина коричневого цвета при добавлении к крови хлористоводородной кислоты. Определение гемоглобина производят колориметрическим способом, основанным на следующем принципе: если исследуемый раствор путём разбавления довести до окраски, одинаковой со стандартным раствором, то концентрация растворённых веществ в обоих растворах будет совпадать, а количества веществ будут соотноситься как их объёмы. Зная количество гемоглобина в стандартном растворе (16,7 г%, что принято за 100% гемоглобина), легко вычислить его содержание в исследуемом растворе в относительных процентах.

Гемометр Сали представляет собой штатив, задняя стенка которого сделана из матового стекла. В штатив вставлены три пробирки одинакового диаметра. Две крайние запаяны и содержат раствор солянокислого гематина, средняя градуирована и открыта. Она предназначена для исследуемой крови. К прибору приложены капилляр (с меткой 20 мм3), стеклянная палочка и пипетка.

Цель работы: определить содержание гемоглобина в крови по методу Сали.

Оснащение: гемометр Сали, стерильный скарификатор, 0,1% раствор HCI, фильтровальная бумага, вата, спирт, эфир, йод, дистиллированная вода. Объект исследования — человек.

Проведение работы. В среднюю пробирку гемометра наливают раствор HCI до нижней кольцевой метки. Затем из пальца обычным способом набирают кровь в капилляр до метки, удаляя излишек с помощью фильтровальной бумаги. Выдувают кровь на дно средней пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетки, ополаскивают её соляной кислотой из верхнего слоя.

После этого содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по её дну, и оставляют стоять на 8-10 минут. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к раствору добавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор пока цвет полученного раствора не будет одинаков с цветом стандартного (добавляя воду, раствор перемешивают стеклянной палочкой).

Цифра, стоящая на уровне нижнего мениска полученного раствора, показывает содержание гемоглобина в граммах на 100 г исследуемой крови (при переводе в единицы СИ полученную цифру умножают на 10, получая величину гемоглобина в граммах на 1 л крови). Можно вычислить также относительное содержание гемоглобина в исследуемой крови.

Оформление протокола. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой крови. Вычислите относительное процентное содержание гемоглобина следующим образом. Допустим, количество гемоглобина в крови соответствует 14 делениям гемометра. Тогда по пропорции вычисляем относительное содержание гемоглобина в процентах. Сравните полученное значение с нормой.

16,7 г % — 100 %

14,0 г % — х

х =(100-14,0)/16,7

Норма у женщин

Для женщин, не занимающих тяжёлой физической работой, норма гемоглобина составляет от 120 до 150 г/л. Данные показатели могут меняться в период менструации и снижаться до 110-115 г/л.

Концентрация гемоглобина во время беременности снижается. Это происходит, потому что кровь разжижается, увеличиваются ее объемы. Поэтому, колебания уровня железосодержащего белка во время беременности считается нормой.

Уровень Hb беременных зависит от триместра:

• в первом и третьем триместре нижняя граница нормы – 110 г/л;
• во втором триместре – 105 г/л.

Кроме того, в течение всей беременности уровень Hb не должен превышать 140 г/л.

Что такое талассемия?

Талассемия — это группа наследственных факторов, влияющих на количество гемоглобина. Неспособность организма вырабатывать необходимое количество молекул глобулина приводит к тому, что организм начинает компенсировать недостачу другими менее совместимыми молекулами глобулина. Различные виды талассемии определяются по типу недостающей молекулы глобулина. Серьезность этого заболевания зависит от типа недостающей глобулиновой цепи, количества дефицитных глобулинов и степени дефицита. В легкой форме это заболевание проявляется в виде легкой анемии, тогда как более тяжелое течение заболевания может быть несовместимо с жизнью.

Норма для мужчин

Показатели Hb у мужчин выше женских из-за действия гормона тестостерона и больших физических нагрузок. В норме у мужчин от 18 до 60 лет уровень Hb колеблется – 130-170 г/л.

После 60 лет содержание Hb – от 120 до 140 г/л. Это связано с тем, что в этом возрасте у мужчин снижается и уровень эритроцитов, ведь именно в них и содержится железосодержащих белок.

О чем говорит высокий уровень гемоглобина?

Высокий уровень гемоглобина чаще всего встречается у курящих людей и тех, кто живет на больших высотах .Обезвоживание может способствовать временному повышению гемоглобина, которое восстанавливается после восполнения запасов жидкости в организме.

Что повышает гемоглобин еще:

• тяжелые заболевания легких (к примеру, эмфизема);
• некоторые опухоли;
• патология костного мозга, известная как полицитемия красная истинная;
• злоупотребление спортсменами препаратом эритропоетином (Epogen) для улучшения состава крови (увеличивает количество кислорода в организме путем химической стимуляции чрезмерного производства красных кровяных телец).

Когда необходимо сдать анализ на гемоглобин

В современной медицинской практике анализ крови на гемоглобин считается базовым. Исследование назначается при постановке беременных на учет, для уточнения диагноза при подозрении на малокровие или развитие других патологий. Жизнь в условиях ухудшающейся экологии, постоянные психические и физические перегрузки требуют внимательного отношения к своему здоровью. Хроническая усталость, частые депрессии, потеря интереса к жизни – серьезный повод для визита к врачу и получения направления на прохождение исследования крови.

Показаниями к назначению анализа на гемоглобин являются:

• частые головные боли;
• появление сухости во рту;
• вялость, сонливость или мучительная бессонница;
• побледнение кожных покровов, длительно не сходящие синяки;
• сильная жажда и участившиеся позывы к мочеиспусканию;
• ухудшение зрения и памяти;
• плохая заживляемость порезов и ран;
• нестабильность психоэмоционального состояния.

Уточнение показателя уровня гемобелка в крови особенно важно для беременных женщин, вынашивающих ребенка, родителей, планирующих пополнение в семье, больных стойкой гипергликемией.

Сам анализ крови на гемоглобин проблемы не устраняет, но может подтолкнуть к кардинальным изменениям образа жизни. Отказ от вредных привычек, сбалансированное питание и полноценный отдых способны уберечь от необратимых изменений в эндокринной системе. Чтобы улучшить качество жизни, спокойно встречать каждый новый день, достаточно периодически выделять несколько минут, чтобы сдать биоматериал на исследование.

( 1 оценка, среднее 4 из 5 )