Подсчет гемоглобина в ручную
26 февраля 2019 г.
Гемоглобин (Hb) – молекула, с помощью которой переносится кислород. Она расположена внутри зрелых эритроцитов, лишенных ядер. Клетки получают кислород из альвеол легких, переносят его органам к клеткам-мишеням. От них получают углекислый газ, и переносят его обратно в легочную систему. Без этого действия невозможна жизнь человека. Существуют различные состояния, при которых гемоглобин может повышаться или снижаться. Для диагностики используют различные лабораторные методы определения функции соединения гемоглобина. Их подбирает врач индивидуально для каждого пациента.
Клиническое значение определения гемоглобина
У взрослого человека норма концентрации Hb зависит от пола:
- женщины 11-14г/% или 110-140 г/л;
- мужчины 12-16 г/% или 120-160 г/л.
Для мужчин норма более завышена, так как они имеют большую мышечную массу, по сравнению с женщинами.
Снижение концентрации гемоглобина наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:
- сниженная концентрация эритроцитов в следствии железодефицитной, серповидно-клеточной анемии;
- недостаточное количество веществ, которые влияют на продукцию эритроцитов (фолиевая кислота, витамин B12);
- заболевание красного костного мозга.
Повышенная концентрация Hb наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:
- повышенная продукция эритроцитов при заболевании красного костного мозга, злокачественных новообразованиях;
- компенсаторное повышение количества эритроцитов вследствие сердечно-сосудистых и легочных заболеваний;
- снижение количества плазмы крови вследствие чего число форменных элементов повышается в 1 л биологической жидкости.
Гемоглобин появляется в эритроцитах после утраты ядра и приобретении зрелости клетки. Местом утилизации красных кровяных клеток и Hb является селезенка. Жизненный цикл 1 клетки совместно составляет 120 дней. После гибели в кровь выделяется железо, которое поставляется в красный костный мозг. С помощью этого элемента продуцируются новые красные кровяные тельца.
Методы измерения гемоглобина в крови
Существуют следующие методы анализа гемоглобина в биологической жидкости:
- гемиглобинцианидный;
- гемихромный;
- Сали;
- аммиачный;
После использования соответствующей методики чаще всего применяют полуавтоматический анализатор, который измеряет спектр длины волны молекулы Hb.
Подсчет показателей осуществляется не только в крови, но и в моче, так как в мочевыделительной системе возможны небольшие или значительные кровотечения.
Полуавтоматический гематологический анализатор полностью исключают реставрации врачебные ошибки в отчете необходимого значения. Но прибор не сможет увидеть и распознать нарушение различных параметров.
Ручной подсчет основывается на применении реактива и биологической жидкости. Метод не подсчитывает число клеток, а определяется их присутствие или отсутствие. Подходит для мочи
Унифицированные методы определения гемоглобина
Унифицированная методика – способы измерения показателей, применяемые в большинстве лаборатории. Являются точными, быстрыми, практичными. Для Hb это гемицианидный метод с фотоколориметрическим подсчетом. Позволяет выявить точное количество показателя с помощью подсчета длины волны на специализированном полуавтоматическом приборе.
Второй унифицированной методикой является гимехромный способ. Его принцип тот же, но используются более качественные реактивы, которые не приносят вреда здоровью врачей.
Гемиглобинцианидный метод определения гемоглобина в крови
У гемоглобина имеется множество форм, поэтому рассчитать длину его волны очень сложно. Для упрощения подсчета применяют специализированные химические вещества, которые переводит его в метгемоглобин.
Для получения точных результатов необходимо использовать трансформирующий раствор, специализированные измерительные пробирки, фотоэлектроколориметр. Hb имеет длину волны 540 м. Именно в таком пределе прибор подсчитывает заданный показатель.
Полученные данные подставляют в формулу, которая переводит общее количество показатели в граммы на литры (г/л).
Важно! На данный момент метод определения концентрации гемоглобина в крови используется редко, так как применяемые реактивы опасны для жизни и здоровья в врачей-лаборантов. При нарушении правил приготовления могут возникнуть ожоги кожных покровов и слизистых оболочек.
Читай подробно о гемиглобинцианидном методе в отдельной статье!
Гемихромный метод определения гемоглобина в крови
С помощью методики Hb переводится в циангемоглобин с помощью реактивов, которые полностью безопасны для человека. Для этого используют цианистые соединения (натрий додецилсульфат, лаурилсульфат).
Образуется гемихром, который подсчитывается при длине волны 540 нм. Полученные данные подставляют в формулу для перевода показателя в г/л.
Подробная статья о гемихромном методе определения гемоглобина.
Цианидный метод исследования гемоглобина в крови
Для проведения анализа используют капиллярную и венозную кровь. В биологическую жидкость человека добавляют трансформирующий раствор. С помощью него происходит преобразование всех форм Hb в метгемоглобин.
В пробирку наливают 5 мл реагента и 20 мкл биологической жидкости. Выжидают 10 минут, пока произойдет реакция. Полученную жидкость заливают в специальную кювету, фотоэлектроколориметр пропускает через нее лучи, подсчитывает элементы в области длины волны, равной 543 нм. Содержание Hb рассчитывается по формуле с помощью полученных показателей.
Метод Сали для определения гемоглобина в крови
Определение количества гемоглобина по методу Сали редко применяется в клинических учреждениях, так как существуют более совершенные способы.
Получают биологическую жидкость человека, в которую добавляют хлористоводородная кислоту. Раствор тщательно перемешивают. Это позволяет Hb перейти в другую форму – солянокислый гематин. Добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока окрашивание не будет идентичным с контрольной пробиркой (коричневый цвет).
На нижнем мениске пробирки будет стоять цифра, которая указывает на содержание показателя в 100 г крови. Для вычисления концентрации в 1 литре, показатели умножают на 10. Процентное содержание Hb вычисляется с помощью пропорции:
16,7%=100
- А%=Х
- Х=А×100/16,7
- Х – определяемый показатель,
- А – полученное число гемоглобина с помощью гемометра,
- 16,7 – процентное количество гемоглобина в контрольной пробе.
Метод спектрального анализа для измерения гемоглобина
Наиболее точным методом определения гемоглобина является использование спектрофотометра. Он определяет только 1 из форм гемоглобина, улавливая длину его волны. В крови человека существуют различные формы Hb:
- Оксигемоглобин;
- Дезоксигемоглобин;
- Карбоксигемоглобин;
- Метгемоглобин.
Для исследования с помощью спектрофотометра необходим перевод показателей только в 1 из форм. Для этого применяют различные реактивы. Показатель окрашивается определенным цветом (красный, зеленый). Его длину волны улавливает прибор, подсчитывает все элементы в заданной траектории.
Аммиачный метод определения гемоглобина
Аммиачный метод количественного определения гемоглобина соответствует предыдущим способам. Разницу составляет использование аммиака в концентрации 0,04%. Проба должна настояться, чтобы произошла реакция перехода всех форм Hb в одну. Ее рассчитывают с помощью полуавтоматического анализатора в виде спектрофотометра. Раствор помещают в кювету, устанавливают в прибор. Рассчитывают показатель на длине волны 543 нанометров.
Методы определения гемоглобина в моче
Существует 4 разновидности исследования мочи. Каждая из них отличается применяемыми реактивами. Для исследования собирают только свежую порцию урины. Если она настоится, Hb превратиться в медгемоглобин, Поэтому реакция будет невозможна. Урину подготавливают. Для этого к ней добавляет 2 мл уксусной кислоты и 5 мл диэтилового эфира.
- Реакция с гваяковой кислотой. Разводят щепотку кислоты, добавляют 3 мл этанола 96%. Добавляют 8-10 капель получившейся жидкости к 8-10 каплям разведенной урины. Если Hb присутствует в образце, он окрашивается в синий цвет.
- Реакция с амидопирином. К 2-3 мл разведенной урины добавляют 10 капель раствора амидопирина и 10 капель 3% перекиси водорода. Если Hb присутствует, урина окрашивается в фиолетовый цвет.
- Реакция с бензидином. В пробирку добавляют 6 капель бензидина, 6 капель 3% перекиси водорода,4 капли чистой урины. Если Hb присутствует, получившаяся жидкость окрашивается в зеленый цвет.
- Использование тест-полосок, таблеток. Они содержат специализированные реактивы в готовом виде. Полоски опускают в мочу, достают, оценивают цветовую шкалу. Таблетки полностью растворяют в биологической жидкости человека. Индикаторная шкала подписана на упаковке.
Какой метод определения гемоглобина наиболее точный?
Наиболее точным методом определения показателя считается фотоколориметрический с использованием гемихромного разведения. С помощью него снижается риск врачебной ошибки. Прибор автоматически подсчитывает показатель. Здесь важно правильно подготовить приборы, пробирки, кюветы, настроить аппарат. Методика безопасна для лаборанта.
В определении Hb в моче наиболее информативным является использование тест-полосок. Здесь полностью исключается риск неправильного разведения реактивов.
Определение гемоглобина является важным информативным тестом. Можно определить кровотечение в мочевыводящих путях, состояние сердечно-сосудистой и легочной системы. С помощью методов вовремя выявляются различные виды анемии при низких концентрациях гемоглобина. После получения данных рекомендуется обратиться к лечащему врачу. Он расшифрует полученный результат, выявит нормы и отклонения, назначит лечение.
Узнай о методах определения гликозилированного гемоглобина в крови!
Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro
Полезное видео
Подсчет лимфоцитов: разновидности метода
Подсчет количества тромбоцитов в крови – подробно о методиках
Откуда лучше брать общий анализ крови – пальца или вены?
Подсчет количества эритроцитов: выбор лучшей методики
Чтобы проверить гемоглобин в домашних условиях, нужен прибор гемоглобинометр МиниГем 540 (цена 47 тысяч рублей) или похожий. Для исследования берут каплю крови из пальца, смешивают с реактивом, помещают внутрь прибора. Через раствор пропускают свет и фиксируют непоглощенный поток. Метод точный, он подходит для пациентов с необходимостью длительного контроля. Второй способ – это универсальный биохимический анализатор, например, Изи-тач, стоимостью 6000 рублей.
Он дополнительно определяет холестерин и глюкозу, но для каждого анализа нужны специальные полоски (1700 рублей за 25 штук для гемоглобина). Каплю крови наносят на полоску и через 6 секунд на табло есть результат. Этот прибор нужен для контроля лечения анемии (низкий гемоглобин) или эритроцитоза (высокий показатель). По симптомам цвета кожи лица, склер глаз, слизистой, рук можно только заподозрить отклонение от нормы – при снижении есть бледность, при повышении краснота, это повод для обращения к врачу, но не для самолечения.
Как проверить гемоглобин в домашних условиях
Проверить гемоглобин в домашних условиях можно при помощи прибора гемоглобинометра (например, МиниГем 540) или тест-полосок к биохимическому анализатору (Изи-тач). В первом случае прибор рассчитан только на контроль гемоглобина, в него помещается капля крови и смешивается с реагентом, через 20 минут можно получить результат.
Более простым и универсальном методом является использование тест-полосок и домашнего биохимического анализатора Изи-тач. Он измеряет несколько показателей (глюкоза, холестерин, гемоглобин), но недостаток заключается в необходимости приобретения тест-полосок на каждый вид исследования.
Аппарат для измерения гемоглобина в домашних условиях
МиниГем 540
Аппарат для измерения только одного показателя гемоглобина в домашних условиях называется гемоглобинометром. Наиболее популярная модель МиниГем 540 определяет уровень белка эритроцитов по оптической плотности раствора, то есть степени прозрачности. Для этого внутри находится источник света и датчик, улавливающий непоглощенную часть. Этот прибор имеет высокую точность измерений, ним оснащают мини-лаборатории в машинах скорой помощи, полевые медицинские пункты.
Для работы с ним не нужно медицинское образование, так как техника измерения предельно простая. Рассчитан на проведение 100 000 замеров, гарантийный срок эксплуатации не менее 4 лет при условии непрерывной работы 4 часа в сутки. Стоимость МиниГем 540 – 47 000 рублей. Имеет смысл приобрести его только при необходимости постоянного контроля гемоглобина пациентам с врожденными заболеваниями или требующими очень длительного лечения.
Универсальный прибор
Анализатор крови EasyTouch
При помощи прибора Изи-тач определение гемоглобина в домашних условиях можно комбинировать с контролем за уровнем холестерина и глюкозы. Такой биохимический анализатор имеет также преимущества в цене самого устройства (6000 рублей), но набор тест-полосок из 25 штук нужно приобретать отдельно (1700 рублей).
Замеры проходят очень быстро, не требуется добавления растворов, в комплекте есть ручка для безболезненного прокола пальца. Такой вариант можно считать оптимальным для пациентов с самыми распространенными формами снижения или повышения гемоглобина в крови.
Пациентам обычно нужно проводить анализ не чаще двух раз в неделю, поэтому одной упаковки хватает на 2 месяца, именно столько может храниться вскрытая упаковка. Такого времени в большинстве случаев достаточно для нормализации показателя в домашних условиях. Прибор также может сохранить в памяти результаты последних 50 измерений гемоглобина.
Как сделать тест на гемоглобин с помощью аппарата
Тест на гемоглобин при помощи аппарата гемоглобинометр проводят по такой схеме:
- Вымыть, просушить руки.
- Наполнить пробирку 5 мл реактива (чаще в комплекте есть хлористоводородная кислота).
- Протереть безымянный палец спиртом и проколоть сбоку концевую фалангу стерильным ланцетом.
- Поместить каплю крови в раствор и тщательно перемешать (встряхивать пробирку до получения однородной смеси).
- Точно выдержать нужное время, оно указано в инструкции (для МиниГем 540 требуется 20 минут для взаимодействия).
- Перелить смесь в оптическую кювету (емкость, которая вставляется в аппарат).
- Установить кювету в ячейку гемоглобинометра.
После этого прибор начинает измерение, оно сопровождается звуковым сигналом, потом на экране появляется показатель.
Смотрите видео о том, как сделать тест на определение уровня гемоглобина в домашних условиях:
При использовании универсального биохимического анализатора с тест-полосками нужно:
- Вымыть и высушить руки.
- Вставить в прибор чип (он находится в каждой упаковке тест-полосок).
- Извлечь полоску для определения гемоглобина и вставить ее в ячейку.
- Проверить включение прибора (происходит автоматически).
- Собрать ручку для прокола пальца.
- Протереть концевую фалангу спиртом и провести прокол.
- Поднести каплю к полю тест-полоски, равномерно ее распределить.
- Через 6 секунд на экране будет виден результат.
Показатели в норме
Норма показателя гемоглобина:
- новорожденные – 145-225 г/л;
- дети до 12 лет – 110-160 г/л;
- мужчины – 130-165 г/л;
- женщины вне беременности – 120-150 г/л;
- беременные – 110-140 г/л.
Этот диапазон может немного отличаться (на 2-3 единицы) в зависимости от метода измерении, поэтому обычно в инструкции есть индивидуальная шкала. Именно на нее нужно ориентироваться при измерениях.
Насколько точна проверка
Проверка гемоглобина при помощи гемоглобинометра имеет погрешность не выше 2%, что вполне сопоставимо с лабораторной диагностикой. Важно учитывать, что прибор не реже одного раза в год должен проходить поверку, то есть его нужно сдавать в сервисный центр для тестирования. Только в этом случае можно быть уверенным в соответствии показателей истинным.
Для универсальных биохимических анализаторов точность исследования находится в пределах 92-95%. Поэтому они не подходит для постановки диагноза, но вполне применимы для контроля за уровнем гемоглобина в крови. Пациентам с уже назначенным лечением такие аппараты помогают оценить его эффективность, что и является основной задачей анализов.
Не нужно рассчитывать на домашние приборы при выявлении причины снижения или повышения показателей. Они покажут только текущий уровень гемоглобина в крови, а подходы к терапии будут полностью зависеть от заболевания, которое привело к такому изменению. Пациентам с отклонениями от нормы нужно пройти полное обследование: биохимический анализ крови с показателями обмена железа, УЗИ, иногда томография, пункция костного мозга.
Как определить гемоглобин в домашних условиях быстро: признаки по глазам, цвету крови
Быстро определить гемоглобин в домашних условиях без прибора невозможно, ничем не поможет оценка цвета крови. Но есть признаки, помогающие заподозрить отклонения:
- по глазам – при снижении склеры имеют голубой оттенок, слизистая оболочка на нижнем веке бледно-розового цвета или белесоватая, при повышении они имеют красный оттенок;
- по цвету лица – при высоком есть яркий румянец, при низком бледность кожи;
- по рукам – при низком гемоглобине холодные, бледные, при повышенном вишнево-красные.
Такие симптомы появляются только при уже существенном падении или повышении уровня гемоглобина, они представляют серьезную опасность, поэтому не стоит на них рассчитывать. Нужно сразу обратиться к врачу при появлении слабости, одышки и сердцебиения при физической нагрузке. Они могут быть проявлением анемии.
При повышенных показателях ранними проявлениями бывает упорная головная боль, тяжесть и шум в голове, ухудшение зрения.
Если даже провести экспресс-тест на гемоглобин в крови и получить нормальный результат, то это не будет означать, что исключается, например, дефицит железа. Для его выявления требуется дополнительно знать содержание ферритина. Также симптомы, похожие на анемию или эритроцитоз (низкие и высокие показатели), не считаются специфичными, их появление бывает не только при изменении состава крови.
Как проверить гемоглобин в крови в лаборатории
Чтобы проверить гемоглобин в крови, необходимо сдать в лаборатории кровь из вены или пальца на общий (общеклинический) анализ крови. Он выполняется в сокращенном или расширенном варианте (с лейкоцитарной формулой), для исследования содержания эритроцитов и гемоглобинового белка подходят оба.
Есть особенность исследования при подозрении на наличие аномальных форм гемоглобина (гемоглобинопатии, талассемия, отравление медикаментами, гемолитическая анемия). В таких случаях врач назначает особый анализ – электрофорез гемоглобиновых фракций. Он основан на разделении нормального и аномального белка при помощи электрического тока.
Нужна ли подготовка перед измерением гемоглобина
При любом способе измерения гемоглобина в крови нужно:
- за 5-7 дней прекратить прием препаратов с железом (требуется при постановке диагноза, а при контроле лечения врач может рекомендовать не прерывать курс);
- за сутки отказаться от алкоголя, переедания, так как меняется прозрачность сыворотки крови, важно избегать стрессовых и тяжелых физических нагрузок;
- сделать перерыв в приемах пищи – от 4 до 12 часов, лучше всего выбрать одно и то же время суток при повторных исследованиях;
- исключить за полчаса курение, активные движения.
Проверить уровень гемоглобина в домашних условиях можно только при помощи прибора – гемоглобинометром или универсальным анализатором. Они подходят для контроля за лечением, но для выбора метода терапии одного показателя недостаточно, так как нужно найти и устранить причину снижения или повышения, то есть следует обратиться к врачу.