Тест полоски на гемоглобин в кале
ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для иммунохроматографического определения скрытой крови в кале человека «ИммуноХром-ГЕМ-Экспресс»
Только для in vitro диагностики
Тест на скрытую кровь в кале человека.
Набор ИммуноХром-ГЕМ-Экспресс предназначен для одноэтапного быстрого качественного in vitro определения наличия гемоглобина человека (скрытой крови) в кале методом иммунохроматографического анализа. Ряд заболеваний ЖКТ, таких как рак, язвенная болезнь, полипы и др., могут сопровождаться появлением скрытой крови в кале при отсутствии других симптомов. Результат, полученный с использованием набора ИммуноХром-ГЕМЭкспресс, не должен рассматриваться как единственный критерий в диагностике, а должен быть интерпретирован в совокупности с клиническими симптомами и результатами других лабораторных исследований.
Появление скрытой крови в фекалиях может быть обусловлено многими заболеваниями. На ранних этапах развития такие поражения желудочно-кишечного тракта как рак толстой кишки, язвы, полипы, колит, дивертикулит, геморрой и трещины прямой кишки могут протекать без каких-либо видимых симптомов, но обусловливать наличие скрытой крови в кале (фекалиях). Традиционные тесты, основанные на гваяковой пробе, не обладают высокой чувствительностью и необходимой специфичностью, а также требуют существенного ограничения питания пациентов перед проведением тестирования (исключение из пищи мясных продуктов, свежих овощей и фруктов, высоких доз аскорбиновой кислоты и др.). «ИммуноХРОМ-ГЕМ-Экспресс» пред-ставляет собой мембранный иммунотест для селективного выявления гемоглобина человека (скрытой фекальной крови) в количестве 0,88 мг гемоглобина и более на 1 г фекалий. Важное преимущество: в отличие от гваяковых проб, точность теста не зависит от характера питания пациентов, следовательно, специальной диеты не требуется.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ:
Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Во время проведения теста испытуемый образец (фекальная взвесь) реагирует с частицами, покрытыми антителами к гемоглобину человека. Образец всасывается поглощающим участком рабочей зоны планшета и мигрирует вверх по мембране под действием капиллярных сил. При наличии в образце человеческого гемоглобина последний вступает в реакцию со специфичными к нему моноклональными антителами, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген-антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и вступает в реакцию с другими антителами, иммобилизованными на мембране в тестовой зоне планшета. В том случае, если концентрация гемоглобина в анализируемом образце превышает пороговый уровень (0,88 мг/г), то в тестовой зоне на уровне маркировок С (контроль) и Т (тест) выявляется по одной линии розово-фиолетового цвета.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ:
Чувствительноть ИммуноХром-ГЕМ-Экспресс составляет 0,88 мг гемоглобина на 1 г фекалий.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
•Не пользуйтесь набором после окончания срока годности.
•Не ешьте, не пейте и не курите в месте, где находятся пробы и наборы для анализа.
•Не используйте набор реагентов, если индивидуальная упаковка повреждена.
•Обращайтесь со всеми пробами как с инфицированными материалами. Во время проведения анализа соблюдайте установленные меры предосторожности при риске заражения и следуйте стандартным инструкциям по надлежащему уничтожению проб. При проведении анализа проб надевайте защитную одежду, например, лабораторный халат, а также одноразовые перчатки, и используйте защиту для глаз. Влажность и температура могут неблагоприятно влиять на результаты анализа.
Необходимые, но не поставляемые принадлежности
•Контейнер для сбора проб
•Таймер
ВЗЯТИЕ ПРОБ ДЛЯ АНАЛИЗА:
•Взятие проб недопустимо во время или в течение трех дней после менструального периода, или если пациент страдает от видимого геморроидаль ного кровотечения, а также при наличии крови в моче пациента.
•Алкоголь и нестероидные противовоспалительные препараты (аспирин, диклофенак, найз и др.), принятые в избытке, могут стать причиной раздражения и изъязвления слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, что приведет к возникновению скрытого кровотечения. Необходимо прервать прием этих веществ, покрайней мере, за 48 часов до тестирования.
•Нет необходимости вводить какие-либо ограничения питания перед проведением анализа с помощью набора для одноэтапного определения скрытой крови в кале человека.
Экспресс тест на скрытую кровь в кале позволяет выявить наличие скрытого кровотечения, с чувствительностью 2 мг гемоглобина на 100 мл воды. Это позволяет в домашних условиях определить наличие кровоточивости в просвет кишечника, не определимой глазом.
Виды тестов
Самый эффективный и достоверный тест выпускает американская компания “Biomerica” – “EZ Detect”. На тест-полоску наносится хромофильный краситель тетраметилбензидин, при попадании на который гемоглобина происходит изменение его цвета. При этом в крестообразном окошке происходит изменение цвета на голубой или зеленый. Такой тест можно заказать только через интернет-магазины.
Есть отечественный бюджетный аналог, не такой точный, но зато его можно приобрести практически во всех аптечных пунктах. Выпускает этот тест компания «Мед-экспресс диагностика» под названием «Будьте уверены».
Также на отечественных рынках можно приобрести Cito Test FOB для выявления скрытой крови в кале. Компания специализируется на экспресс диагностики онкологической патологии, поэтому тесту можно доверять.
Таблица 1. Список экспресс-тестов на наличие скрытой крови в кали
| Тест | Фирма-производитель | Реализация |
|---|---|---|
| EZ Detect | «Biomerica» | Интернет-магазин |
| Будьте уверены | «Мед-экспресс диагностика» | Аптека, интернет-магазин |
| Cito Test FOB | «Фармаско» | Аптека, интернет-магазин |
Какие заболевания позволяет выявить?
- рак толстого кишечника – наиболее частая причина появления скрытой крови;
- полипоз – доброкачественное заболевание, которое также может давать скрытые кровотечения при микротравматизации полипа химусом;
- неспецифический язвенный колит – кровотечение чаще явное;
- болезнь Крона – чаще клинически проявляется наличием прожилок крови в кале.
Тест определяет лишь факт наличия крови, конкретное заболевание можно выявить только с помощью обследования – колоноскопии и прочих.
Кому рекомендуется пройти тест?
Тест рекомендован к проведению людям:
- старше 40 лет, в особенности обладающими вредными привычками (алкоголизм, курение);
- с отягощенным семейным анамнезом по раку кишечника;
- с метаболическим синдромом (абдоминальный тип ожирения);
- с «сидячим» образом жизни (офисные работники, водители транспортных средств и т.д.);
- с нарушением стула со склонностью к запорам;
- с предраковыми заболеваниями кишечника (полипоз, аутоиммунные воспалительные заболевания и так далее).
Подготовка и проведения теста
Перед проведением теста необходимо помнить следующие аспекты:
- окончание менструации для женщин должно быть за 3-5 дней до процедуры поверки;
- за сутки до проведения диагностики исключить из рациона продукты, содержащие железо, а также витаминизированные препараты и лекарственные средства с железом.
Тест проводится следующим образом:
- Отвинтить крышечку сборника.
- Извлечь аппликатор.
- Проследить, что бы реагент, находящийся внутри сборника, не пролился.
- Погрузить аппликатор в 3-5 участков анализируемого кала.
- Излишки кала удалить сухой салфеткой с поверхности аппликатора.
- Опустить аппликатор в сборник с реагентом.
- Интенсивно встряхнуть сборник для равномерного перемешивания кала с реагентом.
- Вскрыть планшет вдоль прорези.
- Положить на плоскую ровную сухую поверхность тестовой зоной вверх.
- Перевернуть сборник.
- Отвинтить крышку (шпенек-пробку).
- Капнуть 2 капли реагента на окошко тест-пластины.
- Выждать 5 минут перед оценкой результата.
Расшифровка
Тест положительный
Появление двух окрашенных полосок в окошке тест-ситемы. Любая интенсивность окраски свидетельствует о том, что в кале есть скрытая кровь, интенсивность цвета зависит от количества гемоглобина.
После получения положительного результата необходимо в срочном порядке обратиться к врачу для дальнейшего обследования: анализы крови, ирригография, колоноскопия и другие исследования по усмотрению врача. Чем раньше будет проведено обследование и начато лечение рака, тем больше вероятность успешного исхода и увеличения выживаемости.
Тест отрицательный
Окрашена только одна линия в контрольной области С, тестовая полоска Т – остается чистой.
Если тест проводился в качестве скрининговой диагностики при наличии клинических проявлений, лучше все же обратиться к специалисту и пройти более точные исследования (см. здесь) для определения причин появления жалоб. Если тест проводился как ежегодная скрининговая диспансеризация (как флюорография) после 40 лет, то можно повторить тест через год.
Выводы
Мировая практика утверждает, что эффективность данного теста неоспорима. Могут встречаться погрешности, более точным исследованием для диагностики рака кишечника на начальных этапах является колоноскопия.
При наличие клинических проявлений и жалоб, необходимо обратится к врачу. Специалист сам может в качестве скрининга порекомендовать экспресс-тест на скрытую кровь. Чем раньше будет поставлен диагноз, тем более вероятно своевременное и эффективное лечение.
Информация об исследовании
Присутствие крови в кале является маркером различных заболеваний. Многие желудочно-кишечные заболевания на начальной стадии редко сопровождаются внешними признаками – за исключением присутствия следовых количеств крови в кале.
В случае присутствия человеческого гемоглобина в образце будет получен положительный результат, что потребует дальнейшего обследования для уточнения причин, так как источником незначительной кровопотери может служить доброкачественный полип, дивертикул, геморрой или воспалительные заболевания кишечника. Не все кишечные кровотечения являются результатом доброкачественных или злокачественных полипов. Информация, полученная в ходе анализа, должна использоваться совместно с результатами других клинических обследований и методов тестирования. Рекомендуется провести анализ различных образцов кала ( например, полученных в течение трех разных дней), т.к. карциномы и полипы могут кровоточить с различной интенсивностью.
На результаты данного теста не влияют вещества, присутствующие в пище, или состояние пациента в момент сбора образца. Следовательно, пациентам не требуется соблюдать какую-либо диету, или отказываться от используемых лекарственных препаратов перед сдачей анализа. Однако, медицинские препараты, разжижающие кровь (например, ацетилсалициловая кислота или кумарин), а также препараты железа могут привести к возникновению кровотечения, не вызванного новообразованиями. Данные препараты должны быть отменены за 48 часов до начала исследования.
В результате нормальных физиологических процессов ежедневно приблизительно 2 мл крови попадает кишечник. Чтобы избежать обусловленных этим ложноположительных результатов, чувствительность теста специальным образом подобрана так, чтобы выявлять только количества гемоглобина, превышающие физиологические.
Моча и чрезмерное разбавление образцов водой из унитаза могут привести к неверным результатам анализа. Следовательно, рекомендуется использовать бумагу для сбора образцов кала.
Образцы кала не должны собираться в период менструации или в течении 3 дней до или после нее, в случае возникновения кровотечения, вызванного констипацией, кровоточащим геморроем или в случае ректального применения каких-либо лекарственных средств. Это может привести к получению ложноположительных результатов.
Показания к назначению анализа:
- Подозрение на скрытую кровь в кале.
- Болезнь Крона, язвенный колит, др. воспалительные заболевания кишечника.
- Предполагаемый рак толстого кишечника.
- Полипы в кишечнике.
- Возраст после 45 лет + – ежегодно в качестве профилактики Наличие кровных родственников с колоректальным раком.
Правила подготовки пациента к исследованию:
Пациентам не требуется соблюдать какую-либо диету, или отказываться от используемых лекарственных препаратов перед сдачей анализа.
Исключение составляют медицинские препараты, разжижающие кровь (например, ацетилсалициловая кислота или кумарин), а также препараты железа могут привести к возникновению кровотечения, не вызванного новообразованиями. Данные препараты должны быть отменены за 48 часов до начала исследования.
Кал должен быть получен без применения клизм и слабительных средств. Биоматериал собирается при условии самостоятельного опорожнения кишечника.
Избегать примеси мочи, отделяемого половых органов, предметов личной гигиены и воды.
Образцы кала не должны собираться в период менструации или в течении 3 дней до или после нее, в случае возникновения кровотечения, вызванного констипацией, кровоточащим геморроем или в случае ректального применения каких-либо лекарственных средств.
Биоматериал собирают с чистой и не впитывающей влагу поверхности. Это может быть чистый пакет из полиэтилена, клеенка. Не рекомендуется собирать с пеленки, подгузника (памперса).
Допускается использование судна или горшка. Емкость хорошо промывают с мылом, многократно ополаскивают водой, а затем обдают кипятком и остужают.
Назначение
Тест «РЭД скрытая кровь» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления гемоглобина (скрытой крови) в кале.
Краткая информация
Анализ кала на скрытую кровь используют для выявления различных видов патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, характеризующихся кровотечениями (полипы толстого кишечника, колоректальный рак, болезнь Крона, язвенный колит). Сосуды на поверхности колоректального полипа или злокачественного новообразования часто бывают хрупкими и легко повреждаются при прохождении каловых масс. При этом в фекалии выделяется небольшое количество крови, которое редко заметно на глаз.
Тест «РЭД скрытая кровь» проявляет высокую чувствительность и специфичность в выявлении кровотечений на уровне ободочной и прямой кишки, в то же время нечувствителен к скрытым кровотечениям в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, где белковая часть гемоглобина подвергается перевариванию.
Принцип метода
Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце гемоглобина он вступает в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против гемоглобина, меченными окрашенными частицами, и продолжает движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса.
В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале гемоглобина.
В том случае, если в анализируемом образце присутствует гемоглобин, на тест-полоске образуются две параллельные окрашенные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце гемоглобина на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.
Состав
Один комплект тестов «РЭД скрытая кровь» включает:
- тест-полоски иммунохроматографические «РЭД скрытая кровь» в кассетах из пластика белого цвета – 5, 10 или 20 шт.;
- пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
- этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
- инструкцию по применению теста «РЭД скрытая кровь» – 1 шт.
Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.
Комплект тестов «РЭД скрытая кровь» упакован в картонную коробку.
Необходимые оборудование и материалы, не входящие в состав набора
- контейнеры для сбора образцов кала;
- одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
- часы или таймер.
Аналитические характеристики
- Чувствительность теста «РЭД скрытая кровь» составляет >99%.
- Специфичность теста «РЭД скрытая кровь» составляет >99%.
- Время проведения анализа – 10 мин.
Тест «РЭД скрытая кровь» специфичен по отношению к гемоглобину человека и не дает перекрестных реакций с гемоглобином и миоглобином животного происхождения, поступающими с пищей.
Каждый тест «РЭД скрытая кровь» предназначен для одного определения наличия гемоглобина (скрытой крови) в кале человека.
Меры предосторожности
Тест «РЭД скрытая кровь» предназначен только для in vitro диагностики.
Все компоненты теста «РЭД скрытая кровь» в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Не следует использовать тесты «РЭД скрытая кровь» после истечения срока годности.
При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.
Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.
Анализируемые образцы
Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.
Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер.
Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже.
Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.
Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.
Подготовка образцов
1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца. Для этого ввести стержень в образец 3 раза, собрав примерно 100 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, пипеткой отобрать 100 мкл.
2. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).
3. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).
Проведение анализа
Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД скрытая кровь» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).
4. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.
5. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД скрытая кровь», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.
6. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД скрытая кровь».
7. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.
Интерпретация результатов
Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала гемоглобина (рис. 3-1).
Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации гемоглобина в образце.
В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только красная аналитическая линия (Т), результат анализа признается недействительным (рис. 3-3). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД скрытая кровь».
Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД скрытая кровь».
Образцы кала, забранные у пациентов с кровоточащим геммороем, запорами, а также в период менструации, могут показать ложноположительные результаты.
Результаты, полученные с использованием теста «РЭД скрытая кровь», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.
Условия хранения и эксплуатации
Тесты «РЭД скрытая кровь» должны храниться при температуре от 2 до 25°С в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание тестов «РЭД скрытая кровь» не допускается.
Срок годности тестов «РЭД скрытая кровь» – 24 мес. с даты изготовления.
После вскрытия упаковки тесты «РЭД скрытая кровь» должны быть использованы в течение 2 ч при хранении в сухом месте при комнатной температуре.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение Инструкции по применению теста «РЭД скрытая кровь».