Задачи на содержание гемоглобина

Необходимые животные и оборудование на 1 рабочее место:

1. Кролик с постгеморрагической анемией (постгеморрагическую анемию у кролика вызывают за 4 — 5 дней до занятия кровопусканием из бедренной артерии) в количестве 2% от массы тела.

2. Кролик с гемолитической анемией (гемолитическую анемию у кролика вызывают подкожным введением за 5-6 дней до занятия 2,5% раствора фенилгидразина солянокислого в количестве 0,6 мл на кг массы в течение 3 дней)

3. Гемометр Сали (с пипеткой и пробирками).

4. Соляная кислота 0,1 н. раствор — 5,0 мл.

5. Глазная пипетка — 2 шт.

6. Дистиллированвая вода 5,0 мл.

7. Инъекционная игла.

8. Вата — 5,0 г.

Ход исследования:

В градуированную пробирку гемометра Сали до метки 1,0 наливают 0,1 н. раствор HCl. Кровь набирают в пипетку от гемометра до метки 0,02 мл (20 мкл), обтирают наружную часть капилляра ватой и осторожно (избегая образования пены) выдувают в соляную кислоту на дно пробирки. Несколько раз ополаскивают капилляр раствором соляной кислоты и затем пробирку встряхивают (для смешения крови с соляной кислотой) и далее оставляют пробирку на 1О – 15 минут. Жидкость в пробирке приобретает коричневый цвет вследствие образования солянокислого гематина. При добавлении дистиллированной воды уравнивают цвет жидкостей в пробирке с цветом стандартного раствора. Цифра на пробирке соответствует количеству гемоглобина в исследуемой крови в условных единицах, а также и в г/л. В том случае, если на пробирке указаны только условные единицы, то для перевода в г/л необходимо полученную цифру условных единиц умножить на 6.

Нормальное содержание гемоглобина у мужчин 12-16г%, у женщин 12-14г%.

Задание 2. Перерасчет содержания гемоглобина в крови в г%, в г/л и в %.

Содержание гемоглобина в крови выражается как абсолютных единицах (г/л, г/100мл ), так и в относительных единицах ( в %). Для всех расчетов принимается показатель содержания гемоглобина в крови, составляющий 166,7г/л (соответственно 166,7г/100 мл или 16,67г%). Эта величина соответствует максимальной концентрации гемоглобина, т.е. при максимальном насыщении гемоглобином одного эритроцита и при содержании в крои эритроцитов 5 ×1012/л. Ее принимают за 100%. Таким образом, 16,67г гемоглобина в 100 мл крови также равно 100%. При необходимости перевода в % любого показателя, выраженного в абсолютных единицах составляется пропрция:

16,67 г/дл Hb – 100% A × 100

x = _______________ = A × 6

А г/л Hb – х % 16,67

Таким образом, для перевода абсолютных показателей гемоглобина ( вг/100мл) в относительные (%), абсолютные показатели умножают на 6. Соответственно, при переводе относительных показателей в абсолютные, относительную величину делят на 6.

Рассчитатьотносительные показатели содержания гемоглобина в крови при следующих абсолютных показателях:

12 г%

11 г%

8 г%

70 г/л

Задание 3. Определение количества эритроцитов в 1 л крови

Необходимые животные в оборудование на 1 рабочее место:

1. Кролики те же, что в задании 1.

2 Пробирки.

3. Счетная камера Горяева.

4. 1% раствор NaCl.

5. Инъекционная игла.

6. Вата – 5 г.

7. Микроскоп с ок. 10, об. 8.

Ход исследования:

Кровь от животного (кролика) с экспериментальной анемией набирают из краевой вены уха в капилляр гемометра Сали (0,02мл), затем переносят в пробирку с 4 мл раствора NaCl и тщательно перемешивают. Полученное разведение составляет 1:202 и практически его можно принять 1:200. Небольшую каплю смеси помещают на площадку счетной камеры (Горяева) под предварительно притертое покровное стекло. Через 1- 2 минуты (когда эритроциты осядут на дно камеры) начинают подсчет эритроцитов, пользуясь увеличением микроскопа 20 х 8 при вогнутом зеркале и опущенном конденсоре. Подсчет ведут в 5 больших квадратах, каждый из которых разделен на 16 малых. Таким образом, всего сосчитываются эритроциты в 80 малых квадратах, в разных участках камеры по диагонали. Для исключения возможности подсчета дважды одной и той же клетки (расположенной на границе квадрата) считают в данном квадрате все эритроциты, находящиеся на левой и нижней границах квадрата.

Определяют количество эритроцитов в л крови по формуле:

а · 200 · 4000 = а ·10 000 ,

где: а – количество эритроцитов, сосчитанных в 8О малых квадратах;

200 — разведение крови в смесителе,

4000 -множитель объема жидкости малого квадрата ( объем малого квадрата равен 1/4000 куб.мм),приводящий к объему в куб. мм.

80- количество сосчитанных малых квадратов.

Найденное количество эритроцитов в 1 куб. мм для выражения их содержания в 1 литре умножают на 10 6.

Нормальное количество эритроцитов в крови 4,5-5,0·10 12/л

Источник

Важнейшими
методами являются колориметрические.

О
с н а щ е н и е: гемометр Сали, 0,1% раствор
HCI,
дистилированная вода, капилляр.

С
о д е р ж а н и е р а б о т ы.

Гематиновый
метод (метод Сали). Основан на превращении
гемоглобина при добавлении к крови
хлористоводородной кислоты в хлорид
гематина коричневого цвета. Используют
гемометр Сали, состоящий из трех пробирок
одинакового диаметра.

Одна
(средняя) порбирка – пустая, две другие
содержат стандартный раствор солянокислого
гематина определенной окраски. В
градуированную пробирку до нижней метки
наливают 0,1% раствор хлористоводородной
кислоты. В капиллярную пипетку до линейки
0,1 набирают кровь и медленно выпускают
ее под слой кислоты. Содержимое пробирки
перемешивают и оставляют на 5—10 мин.
Затем полученный раствор хлорида
гематина темно-коричневого цвета
разводят водой до цвета стандарта,
интенсивность окраски которого
соответствует идеальной норме –
содержанию гемоглобина 166,7 г/л (16,67г%).
Как только цвет исследуемой жидкости
полностью сравняется с цветом стандартов
в гемометре Сали, отмечают, какому
делению шкалы градуированной контрольной
пробирки соответствует нижний мениск
жидкости: это
и будет искомое количество гемоглобина.
В настоящее время метод считается
рутинным, в клиниках применяется редко.

Цианметгемоглобиновый
фотометрический метод
является наиболее точным. Основан на
превращении гемоглобина в цианметгемоглобин
при добавлении к крови специального
реактива (раствор Драбкина). Показания
фотоэлектроколориметра соответствует
определенному содержанию в крови
гемоглобина.

О
ф о р м л е н и е п р о т о к о л а. 1)
Определите концентрацию гемоглобина
в образце крови, предлагаемой для
исследования. 2) Занесите данные в
тетрадь:

3)
Сделайте заключение о соответствии
полученных вами данных нормативным.

Заключение

Задача 3. Вычисление цветового показателя .

Цветовым
показателем (ЦП) называют условную
величину, характеризующую степень
насыщения гемоглобином каждого
эритроцита. Этот показатель можно
вычислить, зная содержание гемоглобина
в исследуемой крови и количество
эритроцитов в 1 мкл этой же крови, а также
по приведенной ниже номограмме (метод
является рутинным; в клинике не
используется, но в условиях студенческого
практикума применяется с обучающей
целью).

Содержание работы.

3.1. Определение цветового показателя по номограмме

На шкалах “в”
и “б” (стр 326 руководства по практич.
занятиям) найдите точки, соответствующие
количеству эритроцитов и гемоглобина,
найденным в предыдущих заданиях, и
соедините их прямой. По точке пересечения
на шкале “а” найдите ЦП.

На рис. 24.4.
(руководства по практич. занятиям)приведен
пример показателя величины цветового
показателя при количестве эритроцитов
3,5 млн и содержании гемоглобина по Сали
70 %. Находят точки, соответствующие этим
значениям на шкалах “б” и “в”,
и соединяют их прямой. Прямую продолжают
до пересечения со шкалой “а”. Точка
пересечения отражает величину цветового
показателя; в данном случае он составляет
1,0.

Оформление
протокола. Сравните ЦП, вычисленный по
номограмме, с ЦП, который подсчитан на
основании определенного вами процента
гемоглобина и числа эритроцитов.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Источник

Необходимые животные и оборудование на 1 рабочее место:

3. Гемометр Сали (с пипеткой и пробирками).

4. Соляная кислота 0,1 н. раствор — 5,0 мл.

5. Глазная пипетка — 2 шт.

6. Дистиллированвая вода 5,0 мл.

7. Инъекционная игла.

8. Вата — 5,0 г.

Ход исследования:

Нормальное содержание гемоглобина у мужчин 12-16г%, у женщин 12-14г%.

Задание 2. Перерасчет содержания гемоглобина в крови в г%, в г/л и в %.

16,67 г/дл Hb – 100% A × 100

x = _______________ = A × 6

А г/л Hb – х % 16,67

Рассчитатьотносительные показатели содержания гемоглобина в крови при следующих абсолютных показателях:

12 г%

11 г%

8 г%

70 г/л

Задание 3. Определение количества эритроцитов в 1 л крови

Необходимые животные в оборудование на 1 рабочее место:

1. Кролики те же, что в задании 1.

2 Пробирки.

3. Счетная камера Горяева.

4. 1% раствор NaCl.

5. Инъекционная игла.

6. Вата – 5 г.

7. Микроскоп с ок. 10, об. 8.

Ход исследования:

Определяют количество эритроцитов в л крови по формуле:

а · 200 · 4000 = а ·10 000 ,

где: а – количество эритроцитов, сосчитанных в 8О малых квадратах;

200 — разведение крови в смесителе,

80- количество сосчитанных малых квадратов.

Найденное количество эритроцитов в 1 куб. мм для выражения их содержания в 1 литре умножают на 10 6.

Нормальное количество эритроцитов в крови 4,5-5,0·10 12/л

Читайте также:

Рекомендуемые страницы:

©2015-2021 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2019-11-09
Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных

Источник

Молекула
гемоглобина состоит из четырех белковых субъединиц. В состав каждой субъединицы
входит гем – органическое соединении, содержащее атом Fe2+, способный связывать одну молекулу О2. Таким
образом, одна молекула гемоглобина может переносить до 4-х молекул кислорода.

Существует
три основных вида гемоглобина:

·
HbP – примитивный;

·
HbF – фетальный (от лат. fetus – плод);

·
HbA – гемоглобин взрослых (от лат.adultus – взрослый).

HbP и HbF обладают большим сродством к кислороду, чем HbA, благодаря
чему облегчается переход кислорода от матери к плоду. HbP обнаруживается у плода
до 3-месячнего возраста, начиная со 2-го месяца внутриутробного развития
преобладающим видом гемоглобина плода становится HbF, а потом – HbA. У
новорожденных HbF составляет около 20% от общего количества гемоглобина
крови, у взрослых – не более 2%.

У больных
серповидно-клеточной анемией образуется патологический HbS, неспособный
переносить кислород.

В
норме гемоглобин содержится в крови в виде трех физиологических соединений:

1.
Восстановленный (Hb).

2.
Оксигемоглобин (НbO2).

3.
Карбгемоглобин (НbCO2).

Цвет
НbO2 –
алый, Нb и НbСО2 – синий, что обуславливает различия
цветя артериальной и венозной крови.

При
действии повреждающих факторов образуются патологические соединения
гемоглобина:

4.
Карбоксигемоглобин
(НbСО) –
стойкое соединение с угарным газом (СО), неспособное переносить кислород.
Отравление СО (угорание) часто происходит на пожарах, в гаражах, при
неправильном эксплуатировании печей. СО в больших концентрациях содержится в
табачном дыме. НbCO, как
и НbO2
имеет алый цвет, поэтому кожные покровы и видимые слизистые больного с тяжелым
отравлением СО и выраженной гипоксией не синюшные, а розовые, что может ввести
в заблуждение врача.

5.
Метгемоглобин (MetНb) –
содержит железо, окисленное до степени +3, и поэтому неспособен переносить
кислород. Образуется при действии окислителей: нитраты и нитриты, анилиновые
красители, оксиды азота и др. Имеет коричневый цвет (“шоколадная
кровь”).

При
действии на гемоглобин соляной кислоты (например, в желудке) образуется солянокислый гематин –
вещество коричневого цвета. Поэтому при желудочных кровотечениях может
наблюдаться рвота цвета “кофейной гущи”.

Для
определения содержания гемоглобина в крови используется колориметрический метод (лат. color – цвет). По
классической методике Сали, исследуемую
кровь смешивают в градуированной пробирке с определенным количеством соляной
кислоты. При этом происходит гемолиз, превращение гемоглобина в солянокислый
гематин и образование прозрачной жидкости темно-коричневого цвета. Пробирку помешают
в колориметр-гемометр Сали и добавляют по каплям дистиллированную воду, пока
цвет раствора в пробирке не станет таким же, как цвет стандартного раствора
солянокислого гематина. При этом уровень жидкости в пробирке указывает на шкале
величину содержания гемоглобина в исследуемой крови. Методика Сали очень
проста, но дает большую погрешность (до 30%). В современной унифицированной
методике гемоглобин исследуемой крови с помощью специальных реактивов
превращают в окрашенное соединение метгемоглобина, концентрацию которого
определяют с помощью фото-электроколориметров.

Норма
содержания (концентрации) гемоглобина в крови:

·
для мужчин – 130-160 г/л;

·
для женщин – 120-145 г/л.

Изменения
содержания в крови гемоглобина могут быть вызваны:

1.
Разведением или концентрированием
крови

2.
Повышением или снижением общего
количества гемоглобина

·
вследствие изменения количества эритроцитов;

·
вследствие изменения содержания гемоглобина в эритроцитах.

Как правило,
между изменениями содержания гемоглобина и эритроцитов в крови нет прямой
пропорциональности (например, содержание эритроцитов может снизиться при
нормальном содержании гемоглобина). Количественную оценку соотношению между эритроцитами и гемоглобином дает цветовой показатель
крови (ЦП), который характеризует степень
насыщения одного эритроцита гемоглобином и рассчитывается по формуле:

Уважаемый посетитель!

Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).

Ссылка на скачивание – внизу страницы.

Источник

Цветовой показатель равен 0,7. Означает ли это, что количество эритроцитов в крови выше нормы?

В данном случае цветовой показатель ниже нормы (0,85-1,05). Это означает, что:

· либо уменьшен синтез гемоглобина (например, при железодефицитной анемии), что приводит к уменьшению содержания гемоглобина в эритроците;

· либо изменены размеры эритроцитов в сторону их уменьшения (микроцитоз).

Уменьшение ЦП означает, что снижено (относительно нормы) содержание гемоглобина в эритроците, и никак не обозначает увеличение или уменьшение количества эритроцитов в крови.

Что произойдет с эритроцитами в растворе, содержащим только белки с концентрацией равной концентрации белков в плазме крови?

Если раствор содержит белки в концентрации, равной их концентрации в плазме крови, то данный раствор является гипотоничным (так как около 90% – 304 мОсм/л – осмотического давления создается ионами Na и Cl, а белки создают лишь мизерную часть – 0,8 мОсм/л – коллоидно-осмотического давления). В гипотоничном растворе эритроциты увеличиваются в объеме (набухают) и разрываются, вследствие того, что вода следует из области с низким осмотическим давлением (раствор с белками) в область с высоким осмотическим давлением (пространство внутри эритроцита).

Почему количество эритроцитов у мужчин выше, чем у женщин?

Если говорить об абсолютном содержании эритроцитов, то причина в том, что в организме мужчин количества крови больше, чем в организме женщин.

Если говорить об относительном содержании эритроцитов, то причина заключается в том, что у женщин (в каком бы она возрасте не была), энергообмен ниже, чем у мужчин. Поэтому последним требуется больше кислорода, для переноса которого от легких к тканям требуется больше эритроцитов.

Есть правда, свои исключения: женщина, которая занимается спортом и мужчина, который ведет неактивный образ жизни, у них количество эритроцитов может быть одинаковым.

Поэтому на данный вопрос нельзя дать 100% верный ответ, так как все относительно.

4. (Экзаменационная задача) Почему вводят 5% раствор глюкозы, концентрация глюкозы в котором превышает нормальное содержание этого вещества в крови?

Осмотическое давление плазы кров и создается всеми растворенными в ней веществами, пропорционально их молярным концентрациям. Более 90% создастся ионами Na+ и Cl-, а на долю глюкозы приходится менее 1% осмотического давления плазмы крови. Поэтому раствор, содержащий только глюкозу в той же концентрации, что и в плазме (около 0,1%) будет резко гипотоничным. Его введение приведет к осмотическому гемолизу и к отекам.

Как изменится величина гематокрита при эритропении?

Гематокрит определяется как часть объема, занимаемая клетками крови, от общего объема крови. При эритропении (уменьшении абсолютного количества эритроцитов в крови) гематокрит уменьшится.

Почему цвет артериальной крови отличается от венозной?

Красный цвет оксигемоглобина (и, следовательно, крови) обусловлен тем, что это вещество относительно сильно поглощает коротковолновый свет, то есть в синей области спектра, а большую часть длинноволнового (красного) света пропускает.

Дезоксигемоглобин несколько интенсивнее, чем оксигемоглобин, поглощает длинноволновые лучи и менее интенсивно – коротковолновые. В связи с этим венозная кровь выглядит темнее и имеет красный цвет с синеватым оттенком.

Назовите причину отеков тканей вследствие длительного голодания.

При длительном голодании происходит снижение в крови концентрации питательных веществ (углеводов, белков), которые участвуют в создании коллоидно-осмотического давления. Как известно, коллоидно-осмотическое давление является главным фактором, который обусловливает возврат жидкости из тканей в венозную часть капилляра.

Сколько грамм NaCl необходимо добавить в 1 л воды, чтобы получить физиологический раствор?

Физиологический раствор (физраствор) – раствор, осмотическое давление которого равно осмотическому давлению крови. Для приготовления физраствора необходимо в 1 л воды добавить 9 грамм NaCl (получится 0,9% раствор NaCl).

Источник