Для подсчета концентрации гемоглобина в крови

Клиническое значение определения гемоглобина

У взрослого человека норма концентрации Hb зависит от пола:

• женщины 11-14г/% или 110-140 г/л;
• мужчины 12-16 г/% или 120-160 г/л.

Для мужчин норма более завышена, так как они имеют большую мышечную массу, по сравнению с женщинами.

Снижение концентрации гемоглобина наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

• сниженная концентрация эритроцитов в следствии железодефицитной, серповидно-клеточной анемии;
• недостаточное количество веществ, которые влияют на продукцию эритроцитов (фолиевая кислота, витамин B12);
• заболевание красного костного мозга.

Повышенная концентрация Hb наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

• повышенная продукция эритроцитов при заболевании красного костного мозга, злокачественных новообразованиях;
• компенсаторное повышение количества эритроцитов вследствие сердечно-сосудистых и легочных заболеваний;
• снижение количества плазмы крови вследствие чего число форменных элементов повышается в 1 л биологической жидкости.

Гемоглобин появляется в эритроцитах после утраты ядра и приобретении зрелости клетки. Местом утилизации красных кровяных клеток и Hb является селезенка. Жизненный цикл 1 клетки совместно составляет 120 дней. После гибели в кровь выделяется железо, которое поставляется в красный костный мозг. С помощью этого элемента продуцируются новые красные кровяные тельца.

Методы измерения гемоглобина в крови

Существуют следующие методы анализа гемоглобина в биологической жидкости:

• гемиглобинцианидный;
• гемихромный;
• Сали;
• аммиачный;

После использования соответствующей методики чаще всего применяют полуавтоматический анализатор, который измеряет спектр длины волны молекулы Hb.

Подсчет показателей осуществляется не только в крови, но и в моче, так как в мочевыделительной системе возможны небольшие или значительные кровотечения.

Полуавтоматический гематологический анализатор полностью исключают реставрации врачебные ошибки в отчете необходимого значения. Но прибор не сможет увидеть и распознать нарушение различных параметров.

Ручной подсчет основывается на применении реактива и биологической жидкости. Метод не подсчитывает число клеток, а определяется их присутствие или отсутствие. Подходит для мочи

Унифицированные методы определения гемоглобина

Унифицированная методика – способы измерения показателей, применяемые в большинстве лаборатории. Являются точными, быстрыми, практичными. Для Hb это гемицианидный метод с фотоколориметрическим подсчетом. Позволяет выявить точное количество показателя с помощью подсчета длины волны на специализированном полуавтоматическом приборе.

Второй унифицированной методикой является гимехромный способ. Его принцип тот же, но используются более качественные реактивы, которые не приносят вреда здоровью врачей.

Гемиглобинцианидный метод определения гемоглобина в крови

У гемоглобина имеется множество форм, поэтому рассчитать длину его волны очень сложно. Для упрощения подсчета применяют специализированные химические вещества, которые переводит его в метгемоглобин.

Для получения точных результатов необходимо использовать трансформирующий раствор, специализированные измерительные пробирки, фотоэлектроколориметр. Hb имеет длину волны 540 м. Именно в таком пределе прибор подсчитывает заданный показатель.

Полученные данные подставляют в формулу, которая переводит общее количество показатели в граммы на литры (г/л).

Важно! На данный момент метод определения концентрации гемоглобина в крови используется редко, так как применяемые реактивы опасны для жизни и здоровья в врачей-лаборантов. При нарушении правил приготовления могут возникнуть ожоги кожных покровов и слизистых оболочек.

Читай подробно о гемиглобинцианидном методе в отдельной статье!

Гемихромный метод определения гемоглобина в крови

С помощью методики Hb переводится в циангемоглобин с помощью реактивов, которые полностью безопасны для человека. Для этого используют цианистые соединения (натрий додецилсульфат, лаурилсульфат).

Образуется гемихром, который подсчитывается при длине волны 540 нм. Полученные данные подставляют в формулу для перевода показателя в г/л.

Подробная статья о гемихромном методе определения гемоглобина.

Цианидный метод исследования гемоглобина в крови

Для проведения анализа используют капиллярную и венозную кровь. В биологическую жидкость человека добавляют трансформирующий раствор. С помощью него происходит преобразование всех форм Hb в метгемоглобин.

В пробирку наливают 5 мл реагента и 20 мкл биологической жидкости. Выжидают 10 минут, пока произойдет реакция. Полученную жидкость заливают в специальную кювету, фотоэлектроколориметр пропускает через нее лучи, подсчитывает элементы в области длины волны, равной 543 нм. Содержание Hb рассчитывается по формуле с помощью полученных показателей.

Метод Сали для определения гемоглобина в крови

Определение количества гемоглобина по методу Сали редко применяется в клинических учреждениях, так как существуют более совершенные способы.

Получают биологическую жидкость человека, в которую добавляют хлористоводородная кислоту. Раствор тщательно перемешивают. Это позволяет Hb перейти в другую форму – солянокислый гематин. Добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока окрашивание не будет идентичным с контрольной пробиркой (коричневый цвет).

На нижнем мениске пробирки будет стоять цифра, которая указывает на содержание показателя в 100 г крови. Для вычисления концентрации в 1 литре, показатели умножают на 10. Процентное содержание Hb вычисляется с помощью пропорции:

16,7%=100

• А%=Х
• Х=А×100/16,7
• Х – определяемый показатель,
• А – полученное число гемоглобина с помощью гемометра,
• 16,7 – процентное количество гемоглобина в контрольной пробе.

Метод спектрального анализа для измерения гемоглобина

Наиболее точным методом определения гемоглобина является использование спектрофотометра. Он определяет только 1 из форм гемоглобина, улавливая длину его волны. В крови человека существуют различные формы Hb:

• Оксигемоглобин;
• Дезоксигемоглобин;
• Карбоксигемоглобин;
• Метгемоглобин.

Для исследования с помощью спектрофотометра необходим перевод показателей только в 1 из форм. Для этого применяют различные реактивы. Показатель окрашивается определенным цветом (красный, зеленый). Его длину волны улавливает прибор, подсчитывает все элементы в заданной траектории.

Аммиачный метод определения гемоглобина

Аммиачный метод количественного определения гемоглобина соответствует предыдущим способам. Разницу составляет использование аммиака в концентрации 0,04%. Проба должна настояться, чтобы произошла реакция перехода всех форм Hb в одну. Ее рассчитывают с помощью полуавтоматического анализатора в виде спектрофотометра. Раствор помещают в кювету, устанавливают в прибор. Рассчитывают показатель на длине волны 543 нанометров.

Методы определения гемоглобина в моче

Существует 4 разновидности исследования мочи. Каждая из них отличается применяемыми реактивами. Для исследования собирают только свежую порцию урины. Если она настоится, Hb превратиться в медгемоглобин, Поэтому реакция будет невозможна. Урину подготавливают. Для этого к ней добавляет 2 мл уксусной кислоты и 5 мл диэтилового эфира.

• Реакция с гваяковой кислотой. Разводят щепотку кислоты, добавляют 3 мл этанола 96%. Добавляют 8-10 капель получившейся жидкости к 8-10 каплям разведенной урины. Если Hb присутствует в образце, он окрашивается в синий цвет.
• Реакция с амидопирином. К 2-3 мл разведенной урины добавляют 10 капель раствора амидопирина и 10 капель 3% перекиси водорода. Если Hb присутствует, урина окрашивается в фиолетовый цвет.
• Реакция с бензидином. В пробирку добавляют 6 капель бензидина, 6 капель 3% перекиси водорода,4 капли чистой урины. Если Hb присутствует, получившаяся жидкость окрашивается в зеленый цвет.
• Использование тест-полосок, таблеток. Они содержат специализированные реактивы в готовом виде. Полоски опускают в мочу, достают, оценивают цветовую шкалу. Таблетки полностью растворяют в биологической жидкости человека. Индикаторная шкала подписана на упаковке.

Какой метод определения гемоглобина наиболее точный?

Наиболее точным методом определения показателя считается фотоколориметрический с использованием гемихромного разведения. С помощью него снижается риск врачебной ошибки. Прибор автоматически подсчитывает показатель. Здесь важно правильно подготовить приборы, пробирки, кюветы, настроить аппарат. Методика безопасна для лаборанта.

В определении Hb в моче наиболее информативным является использование тест-полосок. Здесь полностью исключается риск неправильного разведения реактивов. 

Определение гемоглобина является важным информативным тестом. Можно определить кровотечение в мочевыводящих путях, состояние сердечно-сосудистой и легочной системы. С помощью методов вовремя выявляются различные виды анемии при низких концентрациях гемоглобина. После получения данных рекомендуется обратиться к лечащему врачу. Он расшифрует полученный результат, выявит нормы и отклонения, назначит лечение. 

Узнай о методах определения гликозилированного гемоглобина в крови!

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

Полезное видео

Гемоглобинометр – это устройство, с помощью которого определяется содержание гемоглобина в крови человека. Железосодержащий белок, будучи одним из самых важных элементов крови, является основными компонентом эритроцитов. Гемоглобин «захватывает» кислород и транспортирует его ко всем внутренним органам и тканям. Без жизненно важного белка ткани и клетки организма не могли бы нормально насыщаться кислородом и исправно функционировать.

Гемоглобинометр позволяет определить концентрацию гемоглобина в крови и сравнить его с нормальными показаниями. Дефицит или избыток этого показателя крови может быть крайне опасным для здоровья человека и свидетельствовать о серьезных заболеваниях в организме.

Норма гемоглобина у женщин и мужчин

У женщин нормальные показатели гемоглобина колеблются от 120 до 140 грамм на один литр крови (сокращенно г/л.). У девочек, которым еще не исполнилось восемнадцать лет, количество гемоглобина может колебаться в пределах 110-153 г/л. Если представительница прекрасного пола – заядлый курильщик или профессионально занимается каким-либо видом спорта, норма этого элемента в крови может быть от 150 до 160 г/л.

Во время беременности уровень гемоглобина чаще всего понижается и может составлять от 105 до 120 г/л. С возрастом концентрация гемоглобина составляет примерно 118-160 г/л. Отклонение от нормы может свидетельствовать о серьезных заболеваниях, патологических изменениях и аномалиях. Если гемоглобинометр показал значение, которое не находится в пределах нормы, следует, не откладывая в долгий ящик, обратиться к доктору.

Нормальным уровнем гемоглобина для мужчин в возрасте 18-65 лет является 130-173 г/л. Для мужчин старше 65-70 лет возрастной нормой считается показатель в пределах 126-174 г/л. При выявлении отклонения от общепринятого норматива следует проконсультироваться с врачом и при необходимости пройти дополнительный ряд исследований.

Причины высокого и низкого уровня гемоглобина

Повышенный показатель гемоглобина у женщин негативно влияет на консистенцию крови (она становится более густой), вследствие чего замедляется движение и клетки не получают кислород. Если вовремя не отреагировать на повышение гемоглобина, то образовываются тромбы в сосудах. Повышение показателя может быть обусловлено различными заболеваниями, такими как: кишечная непроходимость; заболевания сердечно-сосудистой системы; заболевания крови (лейкемии).

Высокий показатель также может говорить о различных физиологических изменениях и нарушениях, таких как: чрезмерная физическая нагрузка, проживание в условиях высокогорья; гемоконцентрация (сгущение крови), обусловленная обезвоживанием организма – дегидратацией, или обширными ожогами. В таких случаях уровень гемоглобина после исключения этих причин со временем приходит в норму. Симптоматика, свидетельствующая о повышении гемоглобина, включает: ухудшение работы мозга; снижение работоспособности; отсутствие концентрации; усталость; сонливость или бессонницу; отсутствие аппетита; чрезмерную раздражительность. При появлении этих симптомов необходимо обратиться к врачу.

У мужчин повышение уровня гемоглобина также может быть связано с курением, интенсивными тренировками, физическими нагрузками и сильными стрессовыми потрясениями. Признаками высокого гемоглобина у мужчин являются:

• повышенная утомляемость;
• частые головные боли;
• головокружение, обмороки;
• сонливость;
• потеря аппетита.

Данная симптоматика характерна для ряда заболеваний: дыхательной и сердечной недостаточности; поликистоза почек; эритремии. Количество гемоглобина в крови может колебаться из-за серьезного обезвоживания организма.

Причинами низкого гемоглобина могут быть: анемии различного генеза, в том числе обусловленные различными заболеваниями; нарушение циркуляции крови; заболевания щитовидки; строгое диетическое питание; эмоциональная усталость; алкоголизм.

Определение количества белка с помощью гемоглобинометра

Устройства, измеряющие количество гемоглобина в крови, называются портативные. Они имеют функцию автоматической калибровки. Забор образца крови проводится классическим лабораторным способом: с помощью шприца с иглой набирается около 20 мкл венозной или капиллярной крови. Чтобы приготовить фотометрическую пробу применяется гемоглобинцианидная методика.

Современная методика рекомендована ВОЗ и используется в медицине на протяжении сорока лет. Разводить вещество надо в пропорции 1 к 251 (делает это лаборант). Чтобы приготовить пробу, понадобится пять миллилитров реагента. Длительность приготовления пробы варьируется от 15 до 20 минут и прямо зависит от выбранного реагента, который используется для анализа. Нужный объем пробы для проведения фотометрирования равен 2-4 мл.

Чтобы определить количество гемоглобина в крови, нужно поставить в ячейку гемоглобинометра кювету с пробой. Через несколько секунд на дисплее появится показатель концентрации железосодержащего белка. Устройство автоматически определяет количество гемоглобина. Его не запрещено трясти, греть и даже включать перед измерением показателя (он включается и выключается автоматически).

После опускания кюветы в ячейку аппарат автоматически запускается, измеряет концентрацию гемоглобина и показывает результат на мониторе. Когда кювета будет извлечена из гемоглобинометра, прибор выключится. Повторный замер возможен уже через 2-3 секунды после выключения аппарата.

Преимущества гемоглобинометра

Гемоглобинометр имеет ряд преимуществ, среди которых: наличие функции автоматической настройки калибровки (первоначальные параметры автокалибровки задают производители, они сохраняются на протяжении всей работы приспособления); длительность использования (устройство может работать без замены комплектующих в течение 5-6 лет); удобство в эксплуатации (небольшой, имеет красивый дизайн); легко чистится; есть возможность использовать стеклянные или одноразовые кюветы.

Гемоглобинометр является средством для измерения концентрации гемоглобина, его работу проверяют производители. При соблюдении указаний в инструкции и своевременном уходе за приспособлением, прибор будет работать безотказно минимум 5 лет. Аппарат просто незаменим в салонах транспортных средств скорой помощи, а также экспресс-лабораториях, стационарных исследовательских центрах и обычных медицинских учреждениях. Он используется во время выезда на дом к больным людям. Его с собой берет медицинский работник с целью измерения уровня гемоглобина в крови пациента. Если показатель не будет в пределах нормы, человеку следует обратиться к семейному доктору или терапевту.

Профилактические и терапевтические меры

Чтобы обезопасить себя от патологических колебаний гемоглобина, как в сторону увеличения, так и уменьшения, следует задуматься о профилактических и терапевтических мерах. При небольшом дефиците гемоглобина нужно соблюдать специальное диетическое питание. В ежедневный рацион должны входить продукты, содержащие железо (говядина, куриные и перепелиные яйца, орехи, бобовые, печень). Чтобы железо правильно и безопасно усваивалось, необходимо следить за состоянием желудочно-кишечного тракта.

Профилактика и лечение заболеваний, из-за которых наблюдаются скачки гемоглобина, не может проходить без адекватных физических нагрузок и прогулок на свежем воздухе. Лечащий доктор назначит лекарственные средства или биологически активные добавки, в состав которых входит железо, если выявится его дефицит. При нарушениях работы желудочно-кишечного тракта, врач назначает железосодержащие вещества для внутривенного введения.

Концентрация гемоглобина в крови является одним из наиболее значимых показателей здоровья человека, поэтому за ней нужно постоянно следить. Контролировать уровень показателя крайне важно женщинам, планирующим беременность и, тем более, вынашивающим ребенка. Врачи рекомендуют периодически измерять концентрацию гемоглобина в крови с помощью гемоглобинометра пожилым людям.

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru