Фотометрический метод измерения гемоглобина
2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГЕМ
Принцип метода: Основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива (р-р Драбкина). Под влиянием железисто – синеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина (гемоглобина), который затем превращается при помощи калия в цианметгемоглобин (гемоглобинцианид).
Реактивы: 1) Трансформирующий р-р
Устройство: Гемоглобинометр МиниГЕМ 540 представляет собой специализированный фотометр, предназначенный для определения общего гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом с фотометрированием на длине волны 540 нм.
Диапазон измеряемой прибором оптической плотности составляет от 0 до 0,9. Б, что соответствует концентрации общего гемоглобина крови от 0 до 360 г/л. В приборе используется стандартная проб подготовка – 20 мкл крови, разведение 1:250. Суммарная погрешность определения гемоглобина (с учетом погрешностей дозаторов и погрешностей биохимического метода), полученная при сравнительных медицинских испытаниях, не превышает 2% (коэффициент вариации) во всем диапазоне измеряемых концентраций. При этом собственная погрешность гемоглобинометра как фотометра – не более 1%, а воспроизводимость, оцененная по коэффициенту вариации, – не более 0,25%.
Два фактора обеспечивают это качество прибора:
высокая воспризводимость характеристик раствора гемиглобинцианида, который сохраняет свои свойства при надлежащем хранении долгие годы, в т. ч. коэффициента пересчета оптической плотности в концентрацию гемоглобина (или фактора калибровки);
конструкция гемоглобинометра МиниГЕМ 540 обеспечивает высокую надежность фотометрических параметров прибора. МиниГЕМ 540 снабжен функцией саморегулирования, он обладает многолетней стабильностью измерений.
Другая отличительная особенность гемоглобинометра – полностью автоматизированная процедура фотометрирования.
Для определения гемоглобина достаточно опустить кювету с фотометрической пробой в прибор, и через мгновенье на дисплее отобразится значение концентрации. Пересчет оптической плотности раствора в концентрацию производится автоматически. Перед измерением прибор не нужно включать, “прогревать”, подстраивать или калибровать. Гемоглобинометр автоматически выключится при вынимании кюветы до следующего измерения.
Третья особенность гемоглобинометра МиниГЕМ 540 – его портативность и низкое энергопотребление.
Масса прибора без батарей не превышает 300 г. Питание от сети через адаптер или от встроенных батарей. Ресурс батарей – 1 000 000 измерений, или 4 года работы.
Для контроля работоспособности гемоглобинометра используется контрольная стеклянная мера, паспортизованная для каждого прибора. Внутрилабораторный и внешний контроль качества может проводиться с помощью обычных контрольных материалов -контрольных растворов гемоглобина.
Методика измерений:
подготовить пробирки, поместив в каждую из них по 5 мл трансформирующего раствора (раствор Драбкина);
во время взятия крови в каждую пробирку перенести по 20 мкл капиллярной крови( 0,02 мл пипеткой Сали) и тщательно перемешать раствор;
через 20 мин каждую пробирку перед измерением перемешать путем переворачивания пробирки вверх вниз (время лизирования) и провести серию измерений:
Учет результата:
перелить в оптическую кювету реакционную смесь из очередной пробирки;
опустить оптическую кювету в фотометрическую ячейку прибора, при этом автоматически произойдет фотометрирование реакционной смеси, сопровождаемое звуковым сигналом, и на индикаторе появится число, соответствующее концентрации гемоглобина;
записать результат измерения.
2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре MF-1020
Введение: мини фотометры являются миниатюрными настольными приборами для измерения гемоглобина крови.
Особенности прибора: цифровой индикатор, кювета открытого типа, относительная устойчивость к светорассеиванию, двухканальная оптическая схема.
Прибор показывает концентрацию гемоглобина в г/л. Светопоглощение зеленого света с длиной волны(546 нм) раствором гемиглобинцианида напрямую переводятся в единицы измерения гемоглобина. Настройка и калибровка прибора осуществляется при помощи двух ручек – « ZERO» и «CAL» . К прибору прилагается светофильтр (калибратор), назначение которого – убедиться в исправности оптических и электронных узлов и калибровки минифотометра.
Масса прибора 1 кг 300 гр.
Порядок измерения:
1.Включите прибор.
2.В течение 10 мин прогрейте.
3.Убедитесь в том, что прибор правильно откалиброван.
4.Установите кювету с холостой пробой реагента трансформирующего раствора. 5.С помощью ручки « ZERO» на цифровом индикаторе установите нулевое значение. 6.Приготовьте кровь, разбавив ее 1:251 с трансформирующим раствором и проведите измерение.
Приготовление пробы:
1 .Двадцать микрометров крови (0,02 мл) необходимо разбавить в 5 ,0 мл трансформирующего раствора р-ра Драбкина- 1:21
2.Хорошо перемешайте (встряхните). Прежде чем приступить к измерению, подождите 5-10 мин, особенно если реагент не содержит детергент.
Калибровка минифотометра по стандартному р-ру гемиглобинцианида
Вставьте кювету, содержащую трансформирующий реактив (р-р Драбкина) в кюветный отсек.
При помощи ручки « ZERO» установите нулевое значение в цифровом табло.
Вставьте кювету, содержащую стандартный р-р гемиглобинцианида, в кюветный отсек.
При помощи ручки « CAL» установите данное значение стандартного калибровочного р-ра в цифровом табло (пример 150 г/л).
Повторите процедуру калибровки от пункта 1 до пункта 4.
Калибровка окончена, и Вы можете приступить к измерению
Калибровка минифотометра при помощи калибратора (по фактору)
1.Вставьте калибратор со светофильтром в кюветный отсек таким образом, чтобы была
видна надпись «ZERO» с цифровым значением (например, 0.1.6)
2.При помощи ручки «ZERO» установите это значение (п.п.0.1.6) в цифровом табло.
3.Переверните калибратор и вставьте его в кюветный отсек таким образом, чтобы
была видна надпись «CAL» с калибровочным значением (пример 159).
4.При помощи ручки «CAL» установите данное значение на цифровом табло.
Повторите процедуру от пункта 1 до пункта 4.
Калибровка окончена, и Вы можете приступать к измерениям.
Требования к реактивам:
1.Любая модификация р-ра пригодна для применения.
2.Разбавление 10 мкл крови в 2,5 мл трансформирующего не пригодно для этой модели.
3.Можно приготавливать самим р-р-1 раз в месяц, хранится в посуде из темного стекла.
2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
Принцип метода: Гемоглобин, взаимодействуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеродистого калия K3[Fe(CN)6] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина в пробе крови.
Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCb растворяют в 1 л дистиллированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинцианида (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» —64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз).
Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 20 мин при комнатной температуре.
Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина волны 540 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм (1 см) против дистиллированной воды.
Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу.
Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандартному раствору гемиглобинцианида или по формуле:
С=Е о/ Е к х 120
Где С- концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л
Ео – оптическая плотность опытной, ед. опт. Плотность
Ек- оптическая плотность калибровочной пробы, ед.плот.
120-концекнтрация гемоглобина кВ калибровочном растворе, г/л.
Приготовленные разведения фотометрируют. против дистиллированной воды («холостая» проба).
Гемоглобинометры МиниГЕМ – уникальная разработка мирового уровня (фото).
Гемоглобинометры МиниГЕМ – экспортная продукция.
МиниГЕМ 540 – это портативный и, в то же время, высокоточный микропроцессорный гемоглобинометр с функцией автокалибровки.
Определение концентрации гемоглобина.
Забор крови производится традиционным лабораторным способом – 20 мкл капиллярной (или венозной) крови. Для приготовления фотометрической пробы используется гемиглобинцианидный метод.
Этот метод рекомендован Международным Комитетом по стандартизации в гематологии Всемирной Организации Здравоохранения и используется в мировой практике более 40 лет.
Разведение 1:251. Для приготовления пробы требуется 5 мл реагента.
Время подготовки пробы – 15-20 минут (зависит от используемого реагента).
Объем пробы в кювете для фотометрирования – от 2 до 4 мл.
Для измерения концентрации гемоглобина достаточно опустить в фотометрическую ячейку прибора кювету с приготовленным раствором крови и через мгновение на дисплее появится значение концентрации. Пересчет оптической плотности раствора в концентрацию гемоглобина производится автоматически. Прибор не нужно включать, “прогревать”, калибровать перед измерениями. При опускании кюветы в фотометрическую ячейку гемоглобинометр МиниГЕМ 540 автоматически включается, производит измерение и индицирует измеренную концентрацию. После извлечения кюветы из фотометрической ячейки, гемоглобинометр переходит в режим “ожидания” до следующего измерения.
Повторные измерения возможны через каждые 2 секунды.
Автокалибровка.
В отличие от множества фотометров, гемоглобинометр “МиниГЕМ” обладает функцией автоматической подстройки оптико-электронных параметров (автокалибровки), и не требует традиционной калибровки специальными растворами в процессе эксплуатации. Начальные параметры калибровки задаются при изготовлении прибора и сохраняются весь срок эксплуатации.
Экономичность.
МиниГЕМ 540 потребляет энергию только во время измерения, что обеспечивает долговременное использование элементов питания – свыше 1 миллиона измерений от одного комплекта из 3 свежих элементов DURASEL в течение срока службы элементов (4-5 лет). Элементы питания размещены в корпусе гемоглобинометра (фото), однако при желании можно использовать сетевой адаптер, для которого имеется гнездо подключения на тыльной стороне прибора (фото).
Контроль
Контроль работоспособности гемоглобинометра МиниГЕМ 540 производится посредством стеклянной контрольной меры (фото). Свойства стеклянных мер отличаются многолетней стабильностью. Никакие традиционные средства – возобновляемые жидкие контрольные растворы с незначительным временем годности – не нужны. Кроме того, гемоглобинометр МиниГЕМ 540 снабжен двумя кнопками на тыльной стороне корпуса, предназначенными для проверки заданных цифровых установок и их восстановления при необходимости.
Средство измерения.
МиниГЕМ 540 является средством измерения. Для поверки анализатора используется набор стеклянных мер оптической плотности НОСМОП-6-1. Поверка производится метрологическими службами, которые обеспечены этим набором мер. Набор выпускается ЗАО НПП “ТЕХНОМЕДИКА”.
Удобная конструкция.
Гемоглобинометр МиниГЕМ 540 имеет привлекательный внешний вид. Корпус выполнен из светлого химически стойкого пластика. Лицевая панель покрыта износоустойчивой ламинирующей пленкой, легко поддающейся стандартной санитарной обработке. В гемоглобинометре используется высококонтрастный жидкокристаллический индикатор с крупными цифрами (фото). Для защиты от возможного загрязнения фотометрическая ячейка снабжена удобной задвижкой. Размеры гемоглобинометра составляют 178х128х43 мм, масса без батарей не превышает 300 граммов. Несмотря на малые размеры и вес прибор надежно фиксируется на рабочем столе резиновыми ножками. Для фотометрирования используются стандартные стеклянные фотометрические кюветы с длиной оптического пути 10 мм. Допускается использование одноразовых пластиковых кювет. В корпус гемоглобинометра встроен выдвигающийся пенал для хранения кюветы и контрольных мер (фото).
Минимум обслуживания.
Тщательное соблюдение указаний по эксплуатации гемоглобинометра, своевременный уход за его оптическими поверхностями обеспечивают многолетнюю безотказную работу прибора без привлечения сервисных инженеров.
Обозначение прибора при его заказе и в документации других изделий:
Гемоглобинометр фотометрический портативный для измерения общего гемоглобина в крови гемиглобинцианидным методом АГФ-03/540-“МиниГЕМ” ТУ 9443-022-11254896-2009, торговое наименование “МиниГЕМ 540”.
Смотрите также:
МиниГЕМ 523. Измерение общего гемоглобина крови оригинальным модифицированным методом Дервиза-Воробьевам АГФ-03/523-“Минигем” на рабочей длине волны 523 нм.
МиниГЕМ+. Расширенные возможности определения гемоглобина любыми методами на рабочей длине волны 540 нм.
ПолиГЕМ ЭКСПРЕСС ПРО. Экспресс-анализатор производных гемоглобина.
Импортозамещающая продукция ЗАО НПП “ТЕХНОМЕДИКА”
Перечень конкурентоспособной продукции Российской Федерации
Каталог импортозамещающих медицинских изделий Росмедпрома
- Диапазон измеряемой прибором оптической плотности составляет от 0 до 0,9 Б, что соответствует концентрации общего гемоглобина крови от 0 до 360 г/л.
- Суммарная погрешность определения концентрации гемоглобина, полученная при сравнительных медицинских испытаниях, не превышает 2% во всем диапазоне измеряемых концентраций.
- Число разрядов десятичного кода на цифровом табло-индикаторе равно трем.
- Пределы допускаемой систематической составляющей погрешности при измерениях оптической плотности стеклянных мер из набора НОСМОП-6-1 составляют:
- ±0,01 Б – в диапазоне от 0 до 0,3 Б.
- ±5% – в диапазоне от 0,3 до 0,9 Б.
- Предел допускаемого среднего квадратического отклонения (СКО) случайной составляющей погрешности измерений равен 0,01 Б.
- Время установления показаний от момента запуска измерительного цикла, сопровождаемого звуковым сигналом, до момента появления результата на табло-индикаторе не превышает 2 с.
- Объем пробы для фотометрирования – не менее 1 мл и не более 4 мл.
- Длина оптического пути кюветы – 10±0,1 мм.
- Питание прибора может осуществляться одним из следующих способов:
- от сети переменного тока напряжением 220 В 50 Гц через вторичный источник питания, с автоматическим отключением внутренних элементов питания.
- от 3-х внутренних стандартных сухих элементов питания типа АА. Прибор содержит экономичную электронную схему, поэтому время работы в автономном режиме составляет от одного года до 4 лет (в течение всего срока годности батарей) без замены элементов питания.
- Количество циклов измерения при питании от одного комплекта элементов питания – не менее 1000000.
- Габаритные размеры прибора составляют 178x127x43 мм.
- Средняя наработка на отказ – не менее 100000 циклов измерений.
- Средний срок службы прибора – не менее 4 лет при средней интенсивности эксплуатации 4 часа в сутки.
- Гарантийный срок 4 года.
Базовый комплект поставки
| № | Наименование | Шифр документации | К-во |
|---|---|---|---|
| 1 | Гемоглобинометр фотометрический портативный для измерения общего гемоглобина в крови гемиглобинцианидным методом АГФ-03/540-“Минигем” | ТУ 9443-022-11254896-2009 | 1 |
| 2 | Кювета оптическая 10 мм | ГОСТ 20903 | 1 |
| 3 | Контрольная мера КМ2 | ДГВИ.203319.002-01 | 1 |
| 4 | Элементы питания | 3 | |
| 5 | Руководство по эксплуатации | ДГВИ.941416.003-01РЭ | 1 |
| 6 | Источник питания ~220В/=5В | ДГВИ.436615.004 | 1 |
Гемоглобинометры МиниГЕМ 523 и МиниГЕМ 540 прошли процедуру оценки соответствия директивам Евросоюза по медицинской технике и с 1 декабря 2010 года получили право маркировки знаком CE (декларация).
Заключения испытательных медицинских центров.
Главный военный клинический госпиталь им. Н.Н. Бурденко
Центральная КДЛ им. С.П.Боткина
Отзывы организаций и потребителей.
СПб ГМУ им. академика И.П. Павлова (отзыв).
ГНЦ. Лаборатория гемоцитологии (отзыв).
МЗ РФ. Главный специалист по КЛД (отзыв).
Гематологический научный центр РАМН (отзыв).
Мещерская участковая больница Пензенской области (отзыв).
Центральная клинико-диагностическая лаборатория (отзыв).
Награды.
Золотой знак «Всероссийская марка (III тысячелетие). Знак качества 21 века» (диплом, знак качества).
Диплом Программы “100 лучших товаров России” (диплом, знак).
Аттестат Высшей категории качества (аттестат, приложение, знак).
Знак качества средства измерения (знак).
Диплом Сибирской ярмарки МЕДСИБ (диплом, медаль).
Диплом ВВЦ (аттестат, медаль).
Гемоглобинометры МиниГЕМ по праву снискали славу “Золотого стандарта” благодаря высокой точности измерения, надёжности и предельной простоте в использовании.
Гемоглобинометры МиниГЕМ – это самые массовые гемоглобинометры в России. Сейчас их насчитывается свыше 20 тысяч.
Гемоглобинометры МиниГЕМ – экспортная продукция, они поставляются в страны СНГ, Европы, Африки и Азии.
Особое значение в признании гемоглобинометров МиниГЕМ имеет победа в конкурсах на поставку по Национальному проекту “Здоровье” в 2006 и 2007 годах (фото) и по госзаказам Минобороны.
Другие материалы
Как обеспечить требуемую точность определения гемоглобина крови
Ованесов Е.Н.
Лаборатория. № 1, 2002 г. Москва
Гемоглобинометр портативный МиниГЕМ 540
Руководство по эксплуатации
(Справочный материал)
Опыт работы на отечественном гемоглобинометре МиниГЕМ
Е.Н. Ованесов, И.М. Овчинников
Материалы Симпозиума «Объем, организация и экономика лабораторного обеспечения медицинской помощи в условиях модернизации здравоохранения»
ММА им. И.М. Сеченова, Москва, 10-12 октября 2006 года
Простой гемоглобинометр с автокалибровкой
К.А. Щетникович
Лаборатория. № 10, 1998 г. Москва
Оценка качества работы лаборатории в системе мер по сертификации процессов выполнения клинических лабораторный исследований
Школенко А. А., Аппелъганс Т. В, Конкина М. В., Пешкова А. В.
ДПО Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей,
МЛПУ ТКБ № 1″, Новокузнецк,
МЛПУ “Городская больница” Междуреченск Кемеровской области
Клиническая лабораторная диагностика, №9, 2007, Медицина
Новая аналитическая система по месту лечения “Варио плюс”
Медтехника. Лекарства. Изделия медназначения. Дезсредства.
№9 (183), 2009 ИД “Медицинский бизнес”
Проблема определения гемоглобина в лабораторной диагностике и методы ее решения. Лекция
ТУРНА А. А.
главный специалист-эксперт по клинической лабораторной диагностике ФМБА России,
доктор медицинских наук, доцент кафедры КЛД ФГБОУ ДПО ИПК ФМБА России
Опубликовано на сайте фирмы МЕД-М
Фотометрия в лабораторной практике
Долгов В.В., Ованесов Е.Н., Щетникович К.А.
Витал Диагностикс, Санкт-Петербург, 2004 г.
Гемоглобин: особенности определения концентрации на различных фотометрах
Захаров К.А., Ованесов Е.Н., Сецко И.В.
Лабораторная медицина. Москва, No.1, 1998 г.
назад
Certified Reference Material Certified for Total Hemoglobin Measurement JCCRM 622
Handling Instructions
Reference Material Institute for Clinical Chemistry Standards (ReCCS)
Japan
VP01 Hematocrit and Hemoglobin Measurements
Technical note No 3
DATAMED S.r.L., Milano, September 2008
NCCLS. Reference and Selected Procedures for the Quantitative Determination of Hemoglobin in Blood
Approved Standard—Third Edition.
NCCLS document H15-A3 (ISBN 1-56238-425-2). USA, 2000.
Measurement of haemoglobin as a screening test in general practice
S M Lewis, A Osei-Bimpong, A Bradshaw
Journal of Medical Screening 2004 Volume 11 Number 2
Haemoglobin Colour Scale
Report of an informal consultation
WHO headquarters, Geneva, Switzerland
10 May 2004
Haemoglobin measurement: the reliability of some simple techniques for use in a primary health care setting
van Lerberghe W, Keegels G, Cornelis G, Ancona C, Mangelschots E, van Balen H.
Bull World Health Organ. 1983;61(6):957-65.
Blood haemoglobin measurement as a predictive indicator for the progression of HIV/AIDS in resource-limited setting
Christian Obirikorang and Francis A Yeboah
Journal of Biomedical Science 2009, 16:102
Accuracy of noninvasive haemoglobin measurement by pulse oximetry depends on the type of infusion fluid
Bergek, Christian; Zdolsek, Joachim H.; Hahn, Robert G.
European Journal of Anaesthesiology:
December 2012 – Volume 29 – Issue 12 – p 586–592
Very High Leucocytes count Interfere with Colorimetric Measurement of Hemoglobin Level
Dr. Md. Mujibur Rahman
Northern Medical Journal, 2006; Vol-15 (2)
A comparative study of common techniques used to measure haemolysis in stored red cell concentrates
V. Han, K. Serrano & D. V. Devine
Canadian Blood Services, Research and Development and the Centre for Blood Research,
University of British Columbia, Vancouver, Canada
О модернизации лабораторной службы в рамках национального проекта “Здоровье” в МУЗ “Городская центральная детская поликлиника” г. Пензы. Стр. 115
В.С. Иванова, В.Г. Асеев, Г.М. Гришанович, Л.Г. Этингер, И.Е. Ситникова
Материалы XIII межрегиональной научно-практической конференции
ГОУ ДПО «Пензенский институт усовершенствования врачей
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
25-26 октября 2007 года
Лабораторный мониторинг здоровья детей и обучение медицинского персонала в условиях городской Центральной детской поликлиники. Стр.117
В.С. Иванова, Р.П. Савченко, Л.Г. Этингер, Г.М. Гришанович, И.Е. Ситникова
Материалы XIII межрегиональной научно-практической конференции
ГОУ ДПО «Пензенский институт усовершенствования врачей
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
25-26 октября 2007 года
Recommended Mehtod for the Determination of Parked Cell Volume by Centrifugation
The Expert Panel on Cytometry jf the International Council for Standardization in Hematology
World Healt Organization
Фундаментальное образование – лифт в профессию врача
Ерофеев Н.П., Захарова Л.Б., Парийская Е.Н., Петрова О.П.
СПб Государственный университет, Медицинский факультет, кафедра физиологии
Ваше здоровье – в Ваших руках
О работе Якутского ЦСМ
- УКРАИНА
БиАн, МиниГЕМ 540, МиниГЕМ+, Белур 600, Билитест, Билимет К
ДП «Спектар-Украина»
Украина, 03150, г. Киев, ул. Боженко, 31, оф. 352
Тел./факс (044) 502-68-10; 522-95-69
Электронная почта spektar-ua@mail.ru
Сайт https://www.spektar.com.ua/
- КАЗАХСТАН
БиАн, МиниГЕМ 540, Белур 600, Билитест, Билимет К
ТОО « ЦР Достык»
Республика Казахстан,160050
г. Шымкент, ул. Байтурсынова, б/н, угол ул.Мадели Кожа.
Тел.+7 (7252) 212-718, 300-825, 300-075.
Электронная почта info@dostykmed.kz
Сайт https://www.dostykmed.kz
ТОО «Аль-Фараби Фарм Лтд»
Республика Казахстан, г. Алматы, ул. Кунаева, 21
Тел./факс (727) 259-09-46
Электронная почта alfaph@nursat.kz