Что такое серологическое исследование крови норма
Что такое серологическое исследование крови?
Объект серологии — антигены и антитела
Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.
Система иммунитета борется с проникающими в организм болезнетворными микробами (антигенами) при помощи антител, при этом создавая к каждому из вирусов, паразитов либо бактерий свой определённый тип защиты.
Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.
Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение. Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело. На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.
Показания к проведению анализа.
Серологические исследования широко применяется в акушерстве
Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе. Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду. Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:
- вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
- выявление активности, стадии развития болезни;
- гормональные патологии;
- бесплодие;
- аутоиммунные заболевания;
- нарушение обмена веществ;
- аллергии;
- онкологические заболевания;
- планирование беременности, период вынашивания, патологии беременных;
- выявление ревматоидного фактора;
- определение группы крови и резус-фактора;
- эффективность терапии при различных болезнях;
- эффективность вакцинации;
- предоперационный и постоперационный период при необходимости оценки уровня некоторых антител;
- изучение иммунного состояния организма.
Подготовка к исследованию.
Прием препаратов желательно отменить накануне теста
Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:
- За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
- Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
- В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
- Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
- Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
- Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
- В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
- СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.
Методы проведения серологического исследования.
В серологии может применяться большое число методов
Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.
Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).
Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики
Методы серологических исследований:
- Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
- Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
- Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
- Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
- Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
- Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
- Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
- Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
- Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
- Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
- Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.
Иммунофлюорисцентный метод.
«Свечение» в темнопольном микроскопе
Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения. Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.
РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.
Иммуноферментный анализ.
Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики
ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.
Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.
Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.
Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.
Принцип «сэндвич»-метода
Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.
- Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
- Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
- Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.
Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.
Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя
СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.
Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.
Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:
- вирус гепатита А, В, С, D, Е;
- сифилис;
- ВИЧ;
- герпес;
- цитомегаловирус;
- краснуха;
- корь;
- паротит;
- Эпштейн-Барр;
- хеликобактер;
- хламидии;
- микоплазмы;
- токсоплазмы;
- лямблии;
- гельминты;
- уреаплазмы;
- парвовирус;
- вирус ветряной оспы;
- вирус клещевого энцефалита;
- вирус Денге;
- коклюш;
- боррелии;
- легионеллы.
Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.
Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций.
Серологическая диагностика — быстро и доступно
- Высокая чувствительность и специфичность.
- Широкий спектр определяемых инфекций.
- Ранняя диагностика инфицирования.
- Возможность мониторинга развития заболевания.
- Быстрота и удобство в исполнении.
- Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
- Безопасность исследования.
Серологическое исследование крови – новейший метод клиническо-лабораторной диагностики, который совершенствуется и дополняется с каждым годом. Расшифровка цито-анализов может быть готова в течение нескольких часов с момента забора крови. Результат анализов максимально точно выявит возбудителя болезни; те антитела, которые способны противостоять инфекции. Также серологическое тестирование определяет группу крови человека, сложные гормональные отклонения.
Что такое серология
Серология – это наука о физико-химических, биологических свойствах сыворотки крови. Сыворотка – плазма крови, лишенная бесцветного белка фибриногена. В академической медицине под серологией понимают в узком смысле раздел иммунологии, изучающий взаимодействие антител крови с антигенами. Основная задача серологии – приготовление специфических лечебных сывороток, которые вводят человеку и животным при обнаружении пандемического заболевания. Проверка на ВИЧ, сифилис, туляремию, краснуху возможна благодаря этому исследованию.
Самое раннее открытие и применение серологических постулатов – учение о группах, переливании крови. Научные знания о локусах и аллелях А, В и 0, дали возможность проводить гемотрансфузию по правилам совместимости доноров и реципиентов.
Читайте также
Что показывает серология
Серологические анализы распространены в педиатрии, иммунологии и эпидемиологии. Широко применяют такие исследования на выявление инфекций, передающихся половым путем. Анализ назначают при исследовании:
- краснухи;
- кори;
- паротита;
- туляремии;
- туберкулеза;
- брюшного тифа;
- ветряной оспы;
- скарлатины;
- коклюша;
- сифилиса;
- хламидиоза;
- уреаплазмоза;
- простого герпеса;
- вируса иммунодефицита человека;
- токсоплазмоза;
- вирусных гепатитов;
- Эпштейн-Барр (мононуклеоз);
- хеликобактер;
- лямблии;
- клещевого энцефалита;
- парвовируса;
- боррелиоза;
- микоплазмоза;
- бруцеллеза.
Также исследования назначают для проверки эффективности назначенного лечения. Путем диагностики сыворотки, определяют количество, активность вируса. Профилактическое рассмотрение иммуноглобулина класса IgG позволяет оценить иммунную защиту организма, реакцию гуморального ответа, готовность противостоять заражению. Такой вариант назначают перед прививкой от гепатита В.
Показания
Серологические исследования (СИ) человека проводятся еще при внутриутробном развитии, когда проверяют резус-совместимость плода, матери. Во время беременности женщина сдает ряд СИ на ИППП; те болезни, которые могут передаться эмбриону. Основными показаниями к СИ считают:
- Вирусные, бактериологические, инвазионные болезни.
- Этап течения, степень тяжести заболевания.
- Эффективность лечения.
- Гормональные нарушения.
- Бесплодие неясной этиологии.
- Аутоиммунные заболевания.
- Аллергии.
- Ревматоидный артрит под вопросом.
- Скрининг беременных и готовящихся к зачатию (обследование мужчин).
- Иммунно-реактивная готовность организма.
- Определение группы крови и резуса.
Сдавать СИ можно в любой государственной или частной медицинской клинике. Предпочтение нужно отдать той лаборатории, которая имеет новейшее оборудование, врачей клин-лаб диагностики, а не фельдшеров, выполняющих расшифровку.
Обратите внимание!
При самообращении в медицинское учреждение, пациентам предлагают два вида серологического теста – обычный и экспресс-метод. В таком случае можно выбрать стандартное исследование, так как знаниями о необходимости ускоренного варианта обладают только врачи. В некоторых случаях быстрый метод малоинформативен.
Исследование сыворотки в обязательном порядке назначают потенциальным донорам крови при обращении в центр переливания. Микрореакция на сифилис проводится очень быстро, в течение 2-3 минут; другие тесты делают чуть дольше 15-20 минут.
Подготовка к анализу
По скольку спектр серодиагностики инфекционных заболеваний очень разнообразен, на каждый случай составляют индивидуальный план подготовки. Основные принципы, которые применимы к приготовлению перед медицинскими манипуляциями:
- не есть за 10-14 часов до сдачи анализа;
- за 1-2 дня исключить прием жирной пищи и алкоголя;
- не принимать медицинские препараты (витамины в том числе);
- избегать стрессовых ситуаций и переживаний;
- не курить за 3 суток до сдачи крови;
- сдавать анализ утром на тощак;
- проводить любые другие манипуляции, вмешательства после СИ.
Если нельзя отменить прием лекарств, например, пероральных контрацептивов, статинов, инсулина, то нужно предоставить врачу и лаборанту полный список принимаемых средств.
Методы проведения СИ
Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:
- Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
- Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
- Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
- Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
- Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
- Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
- Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
- Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
- Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
- Нейтрализация вирусов родными антителами.
- Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.
В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.
Обратите внимание!
Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.
Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.
Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы
Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.
Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.
Расшифровка
В расшифровке на первом месте стоит приставка Anti, после которой следуют буквы T или G, что указывает на антитела или антигены. Ранние и поздние тела возбудителя болезни указываются как M и G соответсвенно. Например, анализ на гепатит на ранние антитела выглядет как Аnti-НАV IgМ, поздние Аnti-НАV IgG. Цифры со знаками + указывают на количество обнаруженых тел. Например, Аnti-НАV IgМ +11 и Аnti-НАV IgG +++ 1000 означает, что человек переболел гепатитом ранее, на данный момент воспалительного процесса в организме нет. HВsAg антиген, показывающий наличие заболевания. Аnti-НВе – признак вялотекущей формы гепатита.
По группам крови иная расшифровка – А, В и 0. 0 (+) – первая положительная группа крови, 0 (-) первая отрицательная. А0 и АА втораяя группа, ВВ и В0 третья, АВ четвертая. Знак + положительный резус, – отрицательный. При исследовании крови матери и эмбриона, результаты матери пишут первыми, через дробную черту плода. Если обнаружен резус конфликт, то в конце ставят три восклицательных знака.
Преимущества серологии
Высокая чувствительность к возбудителям инфекции сделали серологические анализы самыми востребованными по всей планете. Обширный перечень определяемых антигенов пополняется с каждым годом, что совершенствует серологию, обновляет ее поисковый список. Быстрая исполнительность анализов – от 2 минут, позволяет максимально рано определить причину болезни. Для постановки диагноза достаточна маленькая доза крови – до 10 мл. Возможность мониторинга течения заболевания делают СИ способом дополнительного обследования во время лечения.
Минусов серологические исследования практически не имеют. На данный момент перечень исследований ограничен базой антител и антигенов, которые открыты наукой и изучены. Новые вспышки вирусных болезней пополняют объекты наблюдения эпидемиологов, инфекционистов, поэтому появление очередного вида вируса только способствует развитию серологии.
Существенная сложность, отличающая серологические анализы, это высокие требования к лаборантам и врачам-вирусологам. От исполнителя анализа требуется внимательность и точность при совершении реакций и подсчете результатов. А ученые должны точно описать и исследовать свойства и характерные особенности изучаемых объектов, на основании которых построить алгоритм для младшего медицинского персонала.
Читайте также
Серологические исследования – это новейший метод изучения сыворотки крови, направленный на выявление специфичных антител и антигенов. СИ рассматривают широкий перечень исследуемых возбудителей, передающихся воздушно-капельным, урогенитальным, гематологическим путем. Серологические анализы могут быть выполнены в кратчайшие сроки и представить в расшифровке не только идентифицированного возбудителя, но и наиболее эффективное лечение. СИ также позволяют наблюдать за течением заболевания и определять его тяжесть. Серология широко используется для определения группы крови, резус-фактора, гормональных сбоев, аллергий.