Иммуноферментный анализ крови у детей норма
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
Где можно сдать анализ?
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Узнать больше…
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Как подготовиться?
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).
Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.
Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Это интересно
Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА.
Преимущества метода
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
Недостатки метода
К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Показания к назначению и выявляемые заболевания
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Анализируемый биоматериал и особенности его забора
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
Сроки готовности результатов ИФА
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
Расшифровка иммуноферментного анализа
Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).
Анализируемые показатели
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
Возможные результаты ИФА
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Методика иммуноферментного анализа применяется в различных отраслях медицины. Но в большинстве случаев данным методом диагностируют широкий круг инфекционных заболеваний, таких как вирус иммунодефицита человека, гепатит, герпес и прочих инфекций половых органов. Также иммуноферментный анализ применяют для выявления онкомаркеров различного происхождения, определения гормонов и при диагностике репродуктивной функции организма. Материалом для иммуноферментного исследования является кровь человека.
Что это такое
Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование крови, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.
Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.
Какие антитела проверяют
При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки. Первыми начинают проявляться иммуноглобулины класса М (пятый день после начала болезни). Такие иммуноглобулины задерживаются в организме пять-шесть недель, после чего начинают исчезать из крови организма. Именно в данный период времени выявляются антитела класса М.
Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.
Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек. Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев. Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме. Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.
Расшифровка анализа
Расшифровка результатов анализа может принимать такие значения:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции;
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции;
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции;
- JgM (-) – выздоровление.
В расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом.
Помимо уточнения классов антител в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.
Иммуноферментный анализ сыворотки крови
Сыворотка крови – это прозрачная жидкость с желтым оттенком. После свертывания крови она отделяется от кровяного сгустка. Не содержит фибрина и форменных элементов.
Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:
- подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
- пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
- материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
- оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.
Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.
Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.
К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).
Нормы
Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:
- тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
- тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
- трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
- свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
- свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).
В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:
- фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
- овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
- лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.
В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.
При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.
- У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
- У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.
Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.
Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.
Существует множество способов для проверки эффективности какого-либо лечения или диагностики и подтверждения определённого диагноза. В качестве контрольного теста врачи используют исследование крови методом ИФА. Он направлен на определение некоторых антител и антиген, связанных с возбудителями, которые при взаимодействии между собой представляют некий комплекс. Обнаружение такого вещества определяется наличием изменения окраски при добавлении некоторых реактивов.
Расшифровка
Другими словами, исследование крови методом ИФА расшифровывается как лабораторный химический анализ на содержание различных антител в крови, при помощи различных реагентов на конкретные возбудители. Точность диагноза напрямую зависит от интенсивности окрашивания: чем ярче цвет, тем больше вероятность заболевания.
Возможность проведения иммуноферментного анализа крови есть только в случае наличия специальной аппаратуры в лабораториях, которая определяет количество антител и чужеродных веществ, то есть антиген. Только они могут подвести иммунную систему к борьбе с инфекцией. Сейчас в медицине широко используются самые разные антигены крови, поэтому с помощью необходимого оборудования можно получить достаточно точный анализ для конкретного возбудителя. Однако важно правильно расшифровать иммуноферментны анализ и полученные данные, а ИФА проводить только при наличии соответствующей нормы или её отклонения.
Диагностика
Обычно процедуру ИФА используют в диагностике различных вирусных заболеваний. Гематит, ИППП, герпес и многие другие заболевания на разных стадиях дадут достаточно высокую точность подтверждения наличия заболевания в организме. Преимущество такого иммуноферментного анализа в том, что можно взять не только венозную кровь, но и спинномозговую жидкость или жидкость стекловидного тела.
Иммуноферментный анализ
ЭЛИ-тесты
Для диагностики разных видов и форм заболеваний в организме иммуноферментный анализ крови использует множество ЭЛИ-тестов. Так, состояние сердца и кровеносных сосудов, определение высокого риска сердечно-сосудистых заболеваний, определяют с помощью ЭЛИ-Анкор-тесту-12, а для оценки состояния печени, почек, кишечника, желудка и других основных органов используют ЭЛИ-Висцеро-16. Можно легко диагностировать сахарный диабет некоторых типов или общее состояние ЦНС.
Есть множество разных тестов, для проверки состояния практически всех органов:
- ЭЛИ-Н-Комплекс-12 – определяет общее состояние нервной системы.
- ЭЛИ-ЖКТ-12 – ИФА для общего состояния пищеварительного тракта человека и возможность его патологий в дальнейшем.
- ЭЛИ-ХГЧ-АФС – показывает нарушение системы половых органов.
- ЭЛИ-П-комплекс-12 –оценивает систему половых органов.
Три метода исследования заболеваний
Существует три метода оценки иммуноферментного анализа крови:
- Непрямой метод. Антитела смешивают со специальным реактивом, в процессе которого показывается определённая метка. Таким способом обнаруживаются практически все заболевания.
- Прямой метод отличается от непрямого только тем, что к антителу добавляется антиген, с уже имеющейся на нём меткой.
- Метод сандвич-тип практически идентичен непрямому, однако, в нём на специальном планшете собираются антитела, а не антигены.
Норма
Исследование крови методом ИФА считается в норме, когда показатели анализа на гормоны щитовидной железы не превышают показателей:
Результат ИФА
- тироксин (Т4) – 62-145 нмоль/л (51-112 нг/мл);
- трийодтиронин (Т3) – 0,5-1,8 нмоль/л (0,7-3,4 нг/мл);
- тиреоглобулин (ТГ) – 65-75 МЕ/мл.
У женщин:
Нормой ИФА для женщин в исследовании на половые гормоны является наличие лютеинизирующего гормона в пределах:
- фолликулярной фазы – 3-18 мЕд/л; ( первые 13 дней.);
- овуляционной фазы – 25-160 мЕд/л; ( с 13 по 15-е дни);
- лютеиновой фазы – 4-18 мЕд/л. ( с 15 до следующей фолликулярной фазы).
У мужчин:
- Нормой ИФА у мужчин считается, если половой гормон выделяется в пределах 0,4-9 мЕд/л.
Нормальные показатели иммуноферментного анализа у детей:
- Аутоиммунные антитела «-»;
- Антинуклеарный фактор «-»;
- Антистрептолизин – О 0—5 лет — менее 110 Ед/мл; 5—15 лет — 150—300 Ед/мл; 15 и далее – менее 250 Ед/мл.
У беременных:
- При помощи современной диагностики крови методом ИФА у беременных могут быть выявлены какие-либо заболевания ИППП. Женщины обязаны делать биохимию крови 2 раза во время беременности, для того, чтобы в дальнейшем не было осложнений при родах. Но для них допустимой нормой считаются немного завышенные показатели.
Исследование крови методом иммуноферментного анализа крови достаточно увлекательный процесс, однако, по недостающим медицинским знаниям углубляться в него не имеет смысла. После получения результата врач отдаёт их вам на руки, так или иначе, вы получите точный подтверждённый диагноз.
Главное, не придумывать себе несуществующих симптомов и не лечить их народными способами, существующая медицина сама справится с поставленной для неё задачей, такой, как обнаружение различных заболеваний в тех или иных органах.